식품의약품안전청 고시 제2012-34호

식품첨가물의 기준 및 규격 일부개정고시

2012. 6. 1.

식품의약품안전청

식품의약품안전청 고시 제2012-34호

식품첨가물의 기준 및 규격 일부개정고시

1. 개정 이유

“자당지방산에스테르” 등 일부 품목의 시험법을 재정비하고, “효모” 중 건조효모의 정의에 비활성 건조효모를 추가하며, “소르빈산류”의 사용기준을 신설하고, 현행 식품첨가물 사용기준 중 사용대상 식품유형을 식품공전과 통일되도록 재정비하여 식품첨가물에 대한 기준․규격을 개선․보완하려는 것임

2. 주요 내용

가. 성분규격 개정

1) 사용시약 확대 및 계산식 명확화 등 시험법 재정비 필요

2) “자당지방산에스테르” 등 12품목의 일부 시험법 재정비 및 자구수정(II. 제3. 가. 203, 288, 347, 355, 나. 34, 83, 104, 106, 107, 159, 183, 197)

3) “효모” 중 건조효모의 정의에 비활성 건조효모 추가 및 이에 따른 미생물 규격 적용대상 명확화(II. 제3. 나. 99)

4) 시험법 재정비를 통한 효율적인 식품첨가물의 관리방안 마련

나. 사용기준 제․개정

1) 관련업체의 사용기준 개정 요청 사항을 반영하여 국제적 조화를 위한 기준 신설 및 「식품의 기준 및 규격」과 식품유형 통일화 필요

2) “소르빈산류” 3품목의 조미된장, 조미고추장에 대해 사용대상 식품유형을 현행 「식품의 기준 및 규격」의 식품유형과 통일되도록 정비 및 향신료조제품에 대한 사용기준 신설(II. 제4. 가. 소르빈산, 소르빈산칼륨, 소르빈산칼슘)

3) “이초산나트륨” 1품목에 대해 사용대상 식품유형을 현행 「식품의 기준 및 규격」의 식품유형과 통일되도록 정비(II. 제4. 가. 이초산나트륨)

4) 다양한 식품개발 등 관련 산업 발전에 기여 및 식품유형 통일화로 민원 개선

3. 기타 참고사항

가. 관계법령 : 「식품위생법」 제7조

나. 예산조치 : 별도조치 필요 없음

다. 합의 : 해당기관 없음

라. 기타 : (1) 행정예고(‘12.4.9. ～ ‘12.4.29.) 결과, 특이할 사항 없음

(2) 식품위생심의위원회 심의 완료(‘12.5.8)

(3) 규제심사 : 없음

식품의약품안전청 고시 제2012-34호

「식품위생법」 제7조제1항에 따른 「식품첨가물의 기준 및 규격」(식품의약품안전청 고시 제2012-10호, 2012. 3. 27.)을 다음과 같이 개정하고자 합니다.

2012년 6월 1일

식품의약품안전청장

식품첨가물의 기준 및 규격 일부개정고시

식품첨가물의 기준 및 규격 일부를 다음과 같이 개정한다.

II. 제 3. 가. 203. 자당지방산에스테르의 순도시험 (6) 중 “헥사메틸디실란”을 “헥사메틸디실라잔”으로 한다.

II. 제 3. 가. 288. 폴리비닐폴리피로리돈의 순도시험 (2) 중 “45μm의”를 “0.45μm의”로 한다.

II. 제 3. 가. 347. L-글루타민산의 순도시험 (3) 중 “3ppm”을 “4ppm”으로 한다.

II. 제 3. 가. 355. 말티톨시럽의 정량법 (2) 중 “표준품의 채취량(g)”을 “무수물로 환산한 표준품의 채취량(g)”으로 하고, “검체의 채취량(g)”을 “무수물로 환산한 검체의 채취량(g)”으로 한다.

II. 제 3. 나. 34. 셀룰라아제의 정량법(역가) 중 “Hercules(Aqualon) Type 7HF”를 “Hercules(Aqualon) Type 7HF 또는 이와 동등한 것”으로 한다.

II. 제 3. 나. 83. 펙틴의 순도시험 (5) 중 “한외여과원심분리관에 옮기고 5,000rpm에서 30분간 원심여과한”을 “0.45μm 필터로 여과한”으로 한다.

II. 제 3. 나. 99. 효모의 정의 중 “건조효모를”을 “건조효모(활성) 및 살균처리한 건조효모(비활성)를”로 하고, 가. 건조효모의 순도시험 (1) 중 “활성”을 “활성(활성 건조효모에 한함)”으로 하며, (4) 중 “세균수”를 “세균수(비활성 건조효모에 한함)”으로 하고, (5) 중 “대장균군”을 “대장균군(비활성 건조효모에 한함)”으로 하며, (6) 중 “살모넬라”를 “살모넬라(비활성 건조효모에 한함)”으로 한다.

II. 제 3. 나. 104. 말토게닉아밀라아제의 정량법 중 “Thermo Fisher Scientific Code. 981304 또는 981779”를 “Thermo Fisher Scientific Code. 981304, 981779 또는 이와 동등한 것”으로 한다.

II. 제 3. 나. 106. 트랜스글루코시다아제의 정량법(역가) 중 “Wako Chemical”을 “Wako Chemical 또는 이와 동등한 것”으로 한다.

II. 제 3. 나. 107. 포스포리파아제의 정량법(역가) 제2법 중 “A-AS”를 AS-AB”로 하고, “mM”을 “mmol/L”로 한다.

II. 제 3. 나. 159. 키토사나아제의 정량법(역가) 중 “Sigma Co.”를 “Sigma-Aldrich Co. 또는 이와 동등한 것”으로 한다.

II. 제 3. 나. 183. 판크레아틴의 정량법(역가) (2) 중 “아카시아용액 : 아카시아용액”을 “아라비아검용액 : 아라비아검용액”으로 하고, “아카시아용액”을 “아라비아검용액”으로 한다.

II. 제 3. 나. 197. 탄나아제의 정량법(역가) 중 “Sigma USP Grade”를 “Sigma-Aldrich USP Grade 또는 이와 동등한 것”으로 한다.

II. 제 4. 가. 소르빈산 중 제4호 “된장, 고추장”을 “된장, 조미된장, 고추장, 조미고추장”으로 하고, 제15호를 다음과 같이 신설한다.

15. 향신료조제품(건조제품 제외) : 1.0g/kg 이하

II. 제 4. 가. 소르빈산칼륨 중 제4호 “된장, 고추장”을 “된장, 조미된장, 고추장, 조미고추장”으로 하고, 제15호를 다음과 같이 신설한다.

15. 향신료조제품(건조제품 제외) : 1.0g/kg 이하

II. 제 4. 가. 소르빈산칼슘 중 제4호 “된장, 고추장”을 “된장, 조미된장, 고추장, 조미고추장”으로 하고, 제15호를 다음과 같이 신설한다.

15. 향신료조제품(건조제품 제외) : 1.0g/kg 이하

II. 제 4. 가. 이초산나트륨 중 제4호 “스프”를 “수프”로 한다.

부   칙

제1조(시행일) 이 고시는 고시한 날부터 시행한다.

제2조(적용례) 이 고시는 이 고시 시행 당시 종전의 규정에 따라 제조․가공․판매 또는 수입(선적일 기준)되었거나 검사가 진행 중인 사항에 대하여도 적용한다.

신․구조문 대비표

현    행

개 정 안

Ⅱ. 화학적합성품, 천연첨가물 및 혼합제제류

제 3. 품목별 성분규격 및 보존기준

가. 화학적 합성품

Ⅱ. 화학적합성품, 천연첨가물 및 혼합제제류

제 3. 품목별 성분규격 및 보존기준

가. 화학적 합성품

203. 자당지방산에스테르

Sucrose Esters of Fatty Acids

정    의 (생  략)

성    상 (생  략)

확인시험 (생  략)

순도시험 (1) ～ (5) (생  략)

(6) 기타용매(자당초산이소낙산에스테르는 제외) : (생  략)

(가) (생  략)

(나) 프로필렌글리콜 : 이 품목 1g을 정밀히 달아 내부표준용액 0.1mL를 가해 주고 피리딘을 가하여 녹인 다음 정확히 10mL로 한다. 이 액 0.5mL를 정확히 취하여 헥사메틸디실란 0.25mL 및 트리메틸클로로실란 0.1mL를 가해 주고 격렬히 흔들어 섞은 다음 실온에서 30분간 방치한 후, 원심분리하여 상등액을 시험용액으로 한다. 시험용액을 아래의 조작조건으로 가스크로마토그래피를 행하여 내부표준법에 의한 검량선으로부터 프로필렌글리콜의 함량을 구한다.

내부표준용액 : 에틸렌글리콜 0.025g을 달아 피리딘을 가하여 50mL로 한다.

표준용액 : 프로필렌글리콜 0.025g을 정밀히 달아 피리딘을 가하여 50mL로 하고, 이 액 40, 200, 500 및 1,000μL를 정확히 취하여 각각의 10mL 플라스크에 넣고 각각에 내부표준용액 0.1mL를 첨가하고 피리딘으로 정확히 10mL씩으로 한다. 시험용액과 동일한 방법으로 처리한 액을 각  표준용액으로 한다.

검량선의 작성 : 4개 농도의 표준용액을 아래의 조작조건으로 가스크로마토그래피를 행하여 검량선을 작성한다.

조작조건

컬      럼 : HP-1(30m×0.32mm

, 0.25μm) 또는 이와 동등한 것

검  출  기 : 수소염이온화검출기                  (FID)

주입구온도 : 230℃

주  입  량 : 1μL

주입방식 : 비분할(splitless)

컬럼온도 : 60℃ 5분 유지, 250℃까지 분당 20℃의 속도로 승온, 250℃ 5분 유지

캐리어가스 : 헬륨

유      량 : 프로필렌글리콜유도체의 유지시간이 약 8분이 되도록 조정

(7) ～ (9) (생  략)

수    분 (생  략)

강열잔류물 (생  략)

203. 자당지방산에스테르

Sucrose Esters of Fatty Acids

정    의 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

확인시험 (현행과 같음)

순도시험 (1) ～ (5) (현행과 같음)

(6) 기타용매(자당초산이소낙산에스테르는 제외) : (현행과 같음)

(가) (현행과 같음)

(나)------------------------

---------------------------

------------------------------------------------------

---------------------------헥사메틸디실라잔-------------

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

----------------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------------------------------------.

--------

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

(7) ～ (9) (현행과 같음)

수    분 (현행과 같음)

강열잔류물 (현행과 같음)

288. 폴리비닐폴리피로리돈

Polyvinyl Polypyrrolidone

성    상 (생  략)

확인시험 (생  략)

순도시험 (1) (생  략)

(2) 물가용액 : 이 품목 약 25.0g을 정밀히 달아 증류플라스크에 넣고 물 225mL를 가하여 환류냉각기를 부착하여 교반기를 이용하여 섞으면서 20시간 가열한다. 냉각 후 이 액을 메스플라스크에 옮겨 물을 가하여 250mL로 하고, 15분간 정치시킨 후 이 상등액을 원심분리 시킨다(12,000rpm, 1시간).

이 상등액을 구멍크기 45μm의 멤브레인필터로 여과하여 여액 50mL를 정확히 취하여, 미리 무게를 단 유리제 증발접시에 넣어 증발건고한다. 다시 90℃에서 3시간 동안 건조하고 데시케이터에서 방냉한 후 중량을 정밀히 달았을 때,  그 양은 1.5% 이하이어야 한다.

(3) ～ (7) (생  략)

수    분 (생  략)

강열잔류물 (생  략)

288. 폴리비닐폴리피로리돈

Polyvinyl Polypyrrolidone

성    상 (현행과 같음)

확인시험 (현행과 같음)

순도시험 (1) (현행과 같음)

(2) 물가용액 :-----------------

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.--------------------0.45μm의----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

(3) ～ (7) (현행과 같음)

수    분 (현행과 같음)

강열잔류물 (현행과 같음)

347. L-글루타민산

L-Glutamic Acid

Glutamic Acid

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

확인시험 (생  략)

순도시험 (1) ～ (2) (생  략)

(3) 비  소 : 이 품목 0.25g을 백금제, 석영제 또는 자제도가니에 취하여 질산마그네슘의 에탄올(1→50) 10mL를 넣고 에탄올에 점화하여 연소시킨 다음 서서히 가열하여 450～550℃로 회화한다. 만일 탄화물이 존재하면 소량의 질산으로 적신 다음 다시 강열하고 450～550℃로 회화한다. 식힌 다음 잔류물에 염산 3mL를 가하여 수욕상에서 가온하여 녹인 것을 시험용액으로 하여 비소시험법에 따라 시험할 때, 그 양은 3ppm 이하이어야 한다.

(4) (생  략)

건조감량 (생  략)

강열잔류물 (생  략)

정 량 법 (생  략)

347. L-글루타민산

L-Glutamic Acid

Glutamic Acid

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

확인시험 (현행과 같음)

순도시험 (1) ～ (2) (현행과 같음)

(3) 비  소 :-------------------

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------4ppm--------------.

(4) (현행과 같음)

건조감량 (현행과 같음)

강열잔류물 (현행과 같음)

정 량 법 (현행과 같음)

355. 말티톨시럽

Maltitol Syrup

Hydrogenated Glucose Syrup

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

확인시험 (생  략)

순도시험 (생  략)

수    분 (생  략)

강열잔류물 (생  략)

정 량 법 (1) (생  략)

(2) 말티톨 : 이 품목 약 1g을 정밀히 달아 물을 가하여 50mL로 한 다음 0.45μm 필터로 여과한 액을 시험용액으로 하여 표준용액 및 시험용액 20μL씩 액체크로마토그래피에 주입하고 다음식에 따라 말티톨의

말티톨의 함량(%)	=

함량을

표준품의 채취량(g)	×	시험용액의 피크면적	× 100
검체의 채취량(g)		표준용액의 피크면적

구한다.

조작조건

칼    럼 : Aminex HPX 87C(칼슘 형태) 또는 이와 동등한 것

검 출 기 : 시차굴절계(RI Detector)

칼럼온도 : 85℃

이 동 상 : 물

유    속 : 0.5 mL/min

시   액

표준용액 : 말티톨표준품 0.5g을 정밀히 달아 50mL 메스플라스크에 넣고 물을 가하여 50mL로 한다.(이 액 1mL는 말티톨 10mg 함유)

355. 말티톨시럽

Maltitol Syrup

Hydrogenated Glucose Syrup

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

확인시험 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

수    분 (현행과 같음)

강열잔류물 (현행과 같음)

정 량 법 (1) (현행과 같음)

(2) 말티톨 :-------------------

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

말티톨의 함량(%)	=

-----------------.

무수물로 환산한 표준품의 채취량(g)	×	시험용액의 피크면적	× 100
무수물로 환산한 검체의 채취량(g)		표준용액의 피크면적

-------

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

-------

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

나. 천연첨가물

34. 셀룰라아제

Cellulase

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

정 량 법(역가)

분석원리 : 본 역가시험은 pH 4.5, 온도 40℃에서 카르복시메틸셀룰로오스기질의 내부 Glucosidic 결합의 효소적 가수분해에 근거를 두고 있다. 기질의 점도에 있어서 해당하는 감소는 눈금보정이 된 점도계를 사용하여 측정한다.

시험용액의 조제 : 최종희석액 1mL가 본 시험방법의 제시된 조건하에서 5분 안에 0.18～0.22사이의 상대유동성 변화를 생성하도록 물로 희석하여 시험용액을 조제한다. 검체 일정량을 유리분쇄기에 취하고 물을 넣어 준다. 이를 적당한 용량의 메스플라스크에 옮겨 물로 일정량으로 희석하고 사용 전에 왓트만 No.1 또는 동종의 여지로 여과한다.

시험조작 : 눈금 보정된 점도계를 미리 충분한 양의 세제에 담근 다음 물을 사용하여 깨끗이 닦은 다음 40±0.1℃의 유리수욕조에 정확하게 수직으로 장치한다. 기질용액 20mL와 초산염완충액(pH 4.5) 4mL를 50mL 공전삼각플라스크에 취하고 1 검체당 효소시험용 2개, 기질공시험용 1개를 준비한다. 효소시험용 플라스크에 마개를 하고 수욕조에서 15분간 방치하여 온도를 평형시킨 다음 이에 시험용액 1mL를 정확히 취하여 가해주고 시간을 측정하기 시작하며 용액을 잘 혼합한다. 즉시 이 혼액 10mL를 취하여 점도계의 큰 가지에 가하고 약 2분 후 반응용액을 점도계의 가느다란 가지입구에 고무관을 부착하여 상부눈금 위까지 빨아올린다. 용액이 상부눈금에 도달할 때까지의 시간(분)을 측정하고 이를 TR이라고 하고, 다시 상부눈금을 통과하여 하부눈금을 통과하는 시간(초)을 측정하여 이를TT라 한다. 다시 반응용액을 상부눈금위로 빨아 올리고 액의 표면이 상부의 눈금에 도달할 때까지의 시간(분)을 즉시 측정하여 이를 TR로 하고 상부눈금에서 하부눈금까지 도달하는 시간(초)을 측정하여 이를 TT라 한다. 15분이내에서 반응시간(TR)에 대하여 "다시 반응용액을 상부 눈금위로 빨아" 이하의 조작을 총 4회 반복한다. 기질공시험용에는 기질용액 20mL와 초산염완충액(pH 4.5) 4mL의 혼액에 물 1mL를 가하여 혼합하고 이 혼액 10mL를 즉시 취하여 점도계의 큰 가지에 넣은 다음 액을 상부눈금에서 하부눈금까지 도달하는 시간 TS(초)를 5회 반복 측정하여 평균한 값을 TS로 한다. 물 공시험용에는 미리 40±0.1℃로 평형 시킨 물 10mL를 취하여 점도계의 큰 가지에 넣고 두 눈금사이에 도달하는 시간 TW(초)를 5회 반복 측정하여 평균한 값을 TW로 한다.

다음 계산식에 따라 4회의 유출시간(TT)과 반응시간(TR) 각각에 대하여 상대유동성(FR)과 TN값을 구한다.

FR ＝	TS−TW
	TT−TW

＝	TT	+ TR
	120

TN ＝	1	(TT / 60초 / 분) + TR
	2

FR TS TW TT TR TN	: 각 반응시간에 대한 상대유동성 : 기질공시험에 대한 평균 유출시간(초) : 물공시험에 대한 평균 유출시간(초) : 효소반응용액에 대한 유출시간(초) : 반응의 경과시간(분)(시험용액을 가한 시간에서 유출시간(TT) 측정시작시간까지) : 반응시간(TR)(분)+시험용액 유출시간(TT)(분)의 1/2

4개의 반응시간(TN)에 대한 4개의 상대유동성(FR)을 사용하여 검량선을 작성한다. 이 때 하나의 직선이 그려져야 한다. 선의 기울기는 분당 상대유동성변화에 대응하며 효소의 양에 비례한다. 일련의 시험점을 통과하는 최선의 기울기는 단독의 상대유동성값보다는 좋은 효소역가의 기준이 된다. 검량선으로부터 10분과 5분에서 FR값을 측정한다.

유동성의 차이는 0.18～0.22이어야 한다.

다음 계산식에 따라 효소제의 역가를 구한다.

역가(CU/g) ＝	1,000( FR10 - FR5)
	W

FR10 FR5 1,000 W	: 반응시간 10분에서 상대유동성 : 반응시간 5분에서 상대유동성 : g을 mg으로 환산 : 시험용액 1mL에 함유된 검체의 양(mg)

역가의 정의 : 1 Cellulase unit(CU)는 상기시험조건 하에서 카르복시메틸셀룰로오스기질에서 5분동안에 1 상대유동성변화를 생성하는 효소의 양이다.

장    치

점도계 : 싸이즈-100의 눈금보정이 된 캐논-팬스케형 점도계(Cannon-Fenske Type Viscometer)를 사용하거나 이와 동등한 것을 사용한다.

유리수욕조 : 40±0.1℃의 유리 항온수욕조를 사용하거나 이와 동등한 것을 사용한다.

시약 및 시액

초산염완충액(pH 4.5) : 0.4N 초산나트륨용액을 0.4N 초산 400mL에 계속 저어주면서 가하여 pH를 4.5±0.05로 조절한다.

카르복시메틸셀룰로오스나트륨 : 카르복시메틸셀룰로오스나트륨[셀룰로오스검, Hercules(Aqualon) Type 7HF]을 사용한다.

기질용액 : 혼합기그릇에 물 200mL를 가하고 혼합기를 저속에 맞춘다. 건조물로서 1g의 카르복시메틸셀룰로오스나트륨을 용기내에서 튀어 나오지 않도록 천천히 그릇내에서 분산시킨다. 고무폴리스만을 사용하여 더운물로 그릇기벽을 씻어 내린 다음 그릇에 뚜껑을 하고 고속에서 1분간 혼합한다. 이를 500mL 메스플라스크에 옮겨 물을 가하여 500mL로 하고 사용 전에 거즈로 여과하여 사용한다.

보존기준 (생  략)

나. 천연첨가물

34. 셀룰라아제

Cellulase

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

정 량 법(역가)

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------

----.

-------------------------------------.

---------------------------

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

-----------

---------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------Hercules(Aqualon) Type 7HF 또는 이와 동등한 것--------.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

보존기준 (현행과 같음)

83. 펙틴

Pectin

정    의 (생  략)

성    상 (생  략)

확인시험 (생  략)

순도시험 (1) ～ (4) (생  략)

(5) 잔류용매 : 이 품목 0.1g을 정밀히 달아 희석한 내부표준용액(1→25) 10mL를 가해 주고 마개를 한 다음 균일하게 분산될 때까지 섞어준다. 이 액을 한외여과원심분리관에 옮기고 5,000rpm에서 30분간 원심여과한 다음 여액을 시험용액으로 한다. 다만, 내부표준용액은 tert-부틸알콜(1→1,000)을 사용한다. 따로, 메탄올 및 이소프로필알콜을 각각 0.1g씩을 정밀히 달아 물을 가하여 100mL로 하고, 다시 이 액 10mL 및 내부표준용액 4mL를 취한 다음 물을 가하여 100mL로 한 액을 혼합표준용액으로 한다. 시험용액 및 혼합표준용액을 각각 2μL씩 취하여 다음의 조작조건으로 가스크로마토그래피에 주입한다. 이어서 시험용액 및 혼합표준용액 중의 tert-부틸알콜피크면적에 대한 메탄올 및 이소프로필알콜의 피크면적비 QT1, QT2 및 QS1, QS2를 각각 구하여 다음 계산식에 따라 메탄올, 이소프로필알콜의 양을 구할 때, 단독 또는 병용시 합계로서 1.0% 이하이어야 한다.

메탄올의 양(%) =

메탄올의 채취량(g)	×	QT1
검체의 채취량(g)		QS1

이소프로필알콜의 양(%) =

이소프로필알콜의 채취량(g)	×	QT2
검체의 채취량(g)		QS2

QT1 : 시험용액의 tert-부틸알콜에 대한 메탄올의 피크면적비

QT2 : 시험용액의 tert-부틸알콜에 대한 이소프로필알콜의 피크면적비

QS1 : 혼합표준용액의 tert-부틸알콜에 대한 메탄올의 피크면적비

QS2 : 혼합표준용액의 tert-부틸알콜에대한 이소프로필알콜의 피크면적비

조작조건

칼      럼 : PLOT Q 또는 이  와 동등한 것

검  출  기 : 수소염이온화검출기

(FID)

주입구온도 : 200℃

칼럼온도 : 120℃

검출기온도 : 300℃

캐리어가스 : 질소 또는 헬륨

(6) ∼ (8) (생  략)

건조감량 (생  략)

83. 펙틴

Pectin

정    의 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

확인시험 (현행과 같음)

순도시험 (1) ～ (4) (현행과 같음)

(5) 잔류용매 :-----------------

------------------------------------------------------------------------------------------------0.45μm 필터로 여과한----------------------

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

-------

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

(6) ∼ (8) (현행과 같음)

건조감량 (현행과 같음)

99. 효모

Yeast

정    의 효모란 Saccharomyces sp.에 속하는 식용효모를 배양하여 분리세척한 액상효모, 이것을 탈수하여 성형한 생효모와 수분을 제거한 건조효모를 말한다. 다만, 유화제를 소량 첨가할 수 있다.

가. 건조효모

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험

(1) 활  성 : 이 품목 5g을 10% 설탕용액 50mL에 가하여 35～40℃로 가온할 때, 2시간 30분 이내에 가스가 발생하여야 한다.

(2) ∼ (3) (생  략)

(4) 세균수 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」일반시험법의 미생물시헙법 중 세균수(일반세균수)에 따라 시험할 때, 1g당 7,500 이하이어야 한다.

(5) 대장균군 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」일반시험법의 미생물시험법 중 대장균군에 따라 시험할 때, 제품 1g당 10 이하이어야 한다.

(6) 살모넬라 : 이 품목은 「식품의 기준 및 규격」일반시험법의 미생물시험법 중 살모넬라균 시험법에 따라 시험할 때, 음성(-)이어야 한다.

나. 생효모

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

다. 액상효모

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

보존기준 (생  략)

99. 효모

Yeast

정    의 ---------------------

---------------------------------------------------------------------------------------건조효모(활성) 및 살균처리한 건조효모(비활성)를-----

--------------------------.

가. 건조효모

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험

(1) 활  성(활성 건조효모에 한함) : -----------------------------------------------------------------------------------------------.

(2) ∼ (3) (현행과 같음)

(4) 세균수(비활성 건조효모에 한함) : ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

(5) 대장균군(비활성 건조효모에 한함) : --------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

(6) 살모넬라(비활성 건조효모에 한함) : --------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

나. 생효모

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

다. 액상효모

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

보존기준 (현행과 같음)

104. 말토게닉아밀라아제

Maltogenic Amylase

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

정 량 법

분석원리 : 본 역가시험은 온도 37℃에서 말토트리오스기질의 가수분해에 근거를 두고 있다. 생성된 포도당은 Glucose dehydrogenase 및 NAD가 함유된 혼합액을 사용하여 측정한다.

시험용액의 조제 : 검체 일정량을 취하여 1mL당 0.015～0.075 MANU를 함유하도록 물로 희석한다. 다만, 최종희석액은 1%의 1M 염화나트륨용액을 함유하도록 조제한다.

시험조작 : 기질용액 0.5mL를 시험관에 넣고 37±1℃의 수욕조에서 항온시킨다. 시험용액 0.5mL를 정확히 가하고 흔들어 혼합한 후 수욕조에 방치한다. 정확히 30분 후 시험관을 수욕조에서 꺼내어 0.06N 수산화나트륨용액 1mL를 가하여 반응을 중지시킨 다음 이 액에 GluDH용액 3mL를 가하여 잘 혼합하고 상온에서 정확히 30분간 유지시킨다. 기질용액 0.5mL, 0.06N 수산화나트륨용액 1mL, 시험용액 0.5mL의 순으로 가해주고 GluDH용액 3mL를 가해준 다음 상온에서 30분간 유지시킨 액을 효소공시험용으로 한다. 효소공시험용액을 대조액으로 하여 액층 1cm, 파장 340nm에서 흡광도를 측정하여 검량선에서 포도당표준용액의 농도(μmol/L)를 구한다.

검량선의 작성 : 포도당 1.6g을 정밀히 달아 물을 가하여 1,000mL로 한다. 이 액을 사용하여 각각 88.8μmol/L, 177.6μmol/L, 266.4μmol/L, 355.2μmol/L, 444.0μmol/L, 532.9μmol/L의 포도당을 함유하도록 포도당표준용액을 조제한다. 각 표준용액 2mL를 각각의 시험관에 넣고 GluDH용액 3mL를 가해준 다음 상온에서 30분간 방치한다. 이들 용액에 대해 물을 대조액으로 하여 액층 1cm, 파장 340nm에서 흡광도를 각각  측정하고 포도당표준용액의 농도(μmol/L)에 대한 검량선을 작성한다.

다음의 계산식에 따라 효소제의  역가를 구한다.

역가(MANU/g) ＝	A × 4 × F
	30 × W × 1,000

A F 4 30 W 1,000	: 검량선에서 얻은 시험용액의 포도당표준용액의 농도(μmol/L) : 시험용액의 희석배수 : 시험에 사용된 시험용액의 양 0.5mL와 포도당표준용액의 양 2mL의 비 : 반응시간(분) : 검체의 채취량(g) : L를 mL로 전환시키는 계수

역가의 정의 : 1 Maltogenic amylase novo unit(MANU)는 상기시험조건 하에서 분당 1μmol의 말토트리오스를 분해하는 효소의 양이다.

시   액

구연산완충액 : 구연산 0.225g에 물 20mL를 가하여 녹인 다음 4N 또는 1N 수산화나트륨용액을 가하여 pH 5.0으로 조절한 다음 물을 가하여 250mL로 한다.

기질용액 : 말토트리오스(Maltotriose) 1g을 구연산완충액에 녹여 50mL로 한다.

1M 염화나트륨용액 : 염화나트륨 29.22g에 물을 가하여 500mL로 한다.

0.06N 수산화나트륨용액 : 1N 수산화나트륨용액 30mL를 취한 다음 물을 가하여 500mL로 한다.

GluDH용액 : 글루코오스디하이드로게나아제(Glucose dehydrogenase)를 함유한 혼합시액(Thermo Fisher Scientific Code. 981304 또는 981779)을 사용한다.

보존기준 (생  략)

104. 말토게닉아밀라아제

Maltogenic Amylase

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

정 량 법

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------.

------------------------------------------------------

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

----------------------------------------------------------.

----------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------Thermo Fisher Scientific Code. 981304, 981779 또는 이와 동등한 것----------.

보존기준 (현행과 같음)

106. 트랜스글루코시다아제

Transglucosidase

1,4-α-D-Glucan 6-α-D-glucosyl transferase

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

정 량 법(역가)

분석원리 : 본 역가시험은 pH 5.0, 온도 40℃에서 60분간 α- Methyl-D-glucoside기질의 가수분해에 근거를 두고 있다.

시험용액의 조제 : 검체 일정량을 취하여 물로 희석한 최종 희석액 0.5mL를 사용하여 다음의 시험방법에 따라 시험할 때, 흡광도차(AS—AB)가 0.15～0.32의 범위가 되도록 시험용액을 조제한다.

시험조작 : 기질용액 1mL 및 초산‧초산나트륨완충액(pH 5.0) 1mL를 시험관에 넣고 40±0.5℃에서 5분간 항온시킨다. 시험용액 0.5mL를 정확히 가하고 흔들어 혼합한 후 40±5℃수욕조에서 60분간 방치한 다음 끓는 수욕조에서 5분간 가열한다. 흐르는 물로 식힌 다음 이 액 0.1mL를 시험관에 넣고 발색시액 3mL를 가해주고 나서 40±0.5℃에서 20분간 방치시킨 후 물을 대조액으로 하여 액층 1cm, 파장 505nm에서 흡광도(As)를 측정한다. 따로, 효소공시험용은 초산‧초산나트륨완충액(pH 5.0) 1mL 및 시험용액 0.5mL를 시험관에 넣고 40±0.5℃에서 60분간 방치한 다음 끓는 수욕조에서 5분간 가열한다. 흐르는 물로 식힌 다음 기질용액 1mL를 가해주고 시험용액과 동일조작하여 흡광도(AB)를 측정한다.

검량선의 작성 : 미리 105℃에서 6시간 건조한 포도당 1g을 정밀히 달아 물에 녹여 100mL로 한다(10mg/mL). 이 액을 사용하여 1mL당 100μg, 200μg, 300μg, 400μg, 500μg의 포도당을 함유하는 포도당표준용액을 만든다. 각 표준용액 0.1mL를 각 시험관에 넣고 발색시액 3mL씩을 가해준 다음 40±0.5℃의 수욕조에 20분간 방치한다. 따로, 표준용액대신 물을 사용한 것을 대조액으로 하여 각각의 흡광도를 측정하고 포도당 양(μg)에 대한 흡광도로 검량선을 작성한다.

역가(units/g) ＝

(As - AB)	×	G	×	2.5	×	n
				0.5		0.1 × W

다음의 계산식에 따라 효소제의 역가를 구한다.

G : 흡광도차가 1일 때의 포도당 양(μg)으로 검량선에서 구함

n : 시험용액의 희석배수

W : 검체의 채취량(g)

역가의 정의 : 1 Transglucosidase unit는 상기시험조건 하에서 60분동안 1μg의 포도당을 생성하는 효소의 양이다.

시   액

기질용액 : 메틸글루코시드(α-Methy1-D-glucoside) 2g을 달아 물에 녹여 100mL로 한다.

초산‧초산나트륨완충액(pH 5.0) : 0.02M 초산나트륨용액에 0.02M 초산을 가해 pH 5.0으로 조절한다.

발색시액 : 포도당측정용 kit(Wako Chemical 또는 이와 동등한 것, Glucose oxidase, Peroxidase, 4-Aminoantipyrine 및 Phenol이 포함된 발색시약임) 1병을 희석완충액(Wako Chemical) 150mL와 혼합하여 사용한다. 보관 시 냉장보관한다.

보존기준 (생  략)

106. 트랜스글루코시다아제

Transglucosidase

1,4-α-D-Glucan 6-α-D-glucosyl transferase

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

정 량 법(역가)

---------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

---------------------------------------------------------------------------------------------.

-------

-----------------------------------------------------------------------------.

-----------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------Wako Chemical 또는 이와 동등한 것-------------------

-----------------.

보존기준 (현행과 같음)

107. 포스포리파아제

Phospholipase

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

정 량 법(역가)

제1법 (생  략)

제2법

분석원리 : 본 역가시험은 pH 5.5, 온도 37℃에서 레시틴의 가수분해에 근거를 두고 있다.

시험용액의 조제 : 검체 일정량을 취하여 mL당 0.1～0.2 unit을 함유하도록 트리스-말레인산완충용액으로 희석한다.

시험조작 : 기질용액 0.1mL, 트리스․말레인산완충용액 0.1mL, 0.1M 염화칼슘용액 0.05mL, 7.5% 및 Triton X-100 용액 0.15mL를 각각 정확히 취하여 넣고, 잘 섞은 다음 37℃에서 5분간 유지하여 평형시킨다. 시험용액 0.1mL를 정확히 가하고 즉시 섞은 다음, 37℃에서 정확히 10분간 방치한 다음, EDTA․트리스시액 0.2mL를 정확히 가하고 섞은 다음, 즉시 끓는 수욕에 넣고 정확히 5분간 가열한다. 식힌 다음 발색시액 4mL를 정확히 가하고 흔들어 섞은 다음, 37℃에서 20분간 방치한다. 이 액을 물을 대조액으로하여 파장 500nm에서 흡광도 A를 측정한다. 따로, 시험용액 대신 물을 이용하여 동일 조작을 행하여 흡광도 AB를 측정한다. 따로, 시험용액 대신에 염화콜린 표준용액 0.1mL로 동일 조작을 행하여 흡광도 AS를 측정한다.

다음의 계산식에 따라 효소제(포스포리파아제 D)의 역가를 구한다.

역가(units/g) =	A-AB	×	1.43	×	1
	A-AS		10		W

A : 효소시험용액의 흡광도

AB : 공시험액의 흡광도

AS : 염화콜린표준용액의 흡광도

1.43 : 염화콜린 표준액의 농도(mM)

10 : 반응시간(분)

W : 시험용액 1mL 중 검체의 양(g)

역가의 정의 : 1 Phospholipase D unit는 상기시험조건 하에서 기질로부터 분당 1μmol의 콜린을 생성하는 효소의 양이다.

시  액

표준용액 : 염화콜린(choline chloride) 0.2g을 정확히 달아 물을 가하고 녹여 1,000mL로 한다(1.43mM).

기질용액 : 레시틴(Cargill사의 Epikuron 200 또는 이와 동등한 것) 0.5g을 정밀히 달아 물 9.5mL에 녹이고, 하룻밤 방치한다.

트리스․말레인산완충용액(pH 5.5) : 트리스[Tris(hydroxy ethyl)aminomethane] 1.21g 및 말레인산 1.16g을 물에 녹여 100mL로 한다. 이 액 25mL를 취하여 0.1N 수산화나트륨용액으로 pH 5.5로 조정한 다음 물을 가하여 100mL로 한다.

0.1M 염화칼슘용액 : 염화칼슘 1.47g을 물에 녹여 100mL로 한다.

Triton X-100 용액 : Triton- 100폴리옥시에틸렌(10) 옥틸페닐에테르) 7.5g에 물에 가하여 100mL로 한다.

EDTA․트리스시액 : 에틸렌디아민사초산이나트륨 22.6g을 트리스․염산완충용액(pH 8.0)에 녹여 1,000mL로 한다.

트리스․염산완충용액 : 트리스 12.1g을 물에 녹여 100mL로 한 다음, 2M 염산 32mL 및 물 800mL를 가하고 필요시에 수산화나트륨용액 또는 염산을 가하여 pH 8.0으로 조정한 후, 물을 가하여 1,000mL로 한다.

발색시액 : 콜린옥시다아제(choline oxidase) 3단위, 퍼옥시다아제(peroxidase) 6단위, 페놀 0.001g, 4-아미노안티피린(4-aminoantipyrine) 0.0006g을 HEPES 완충액(pH 7.4) 4mL에 녹인다.

HEPES 완충액(pH 7.4) : N-2-히드록시메틸피페라진-N'-2-에탄술폰산 11.9g을 달아 물 600mL를 가하여 녹이고 0.05N 수산화나트륨용액으로 pH 7.4로 조정한 다음 물을 가하여 1,000mL로 한다.

보존기준 (생  략)

107. 포스포리파아제

Phospholipase

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

정 량 법(역가)

제1법 (현행과 같음)

제2법

----------------------------------------------------------------------.

----------------------------------------------------------------------------------------------.

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------.

역가(units/g) =	A-AB	×	1.43	×	1
	AS-AB		10		W

------------------------------------------------------------------------------------------------------mmol/L------------------------------------------------------

-----------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------

----------------------------------------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-----------------------------------------------------.

----------------------------------------------------------------------------------------------.

-------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

보존기준 (현행과 같음)

159. 키토사나아제

Chitosanase

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

정 량 법(역가)

분석원리 : 본 역가시험은 pH 5.0, 온도 48℃에서 chitosan 기질의 가수분해에 근거를 두고 있다. 가수분해에 의하여 생성된 환원당인 글루코사민을 알칼리성페리시아나이드 시액과 반응시켜 흡광도측정법으로 측정하는데 근거를 두고 있다.

시험용액의 조제 : 시험조건하에서 최종희석액 1mL가 효소공시험용액과의 흡광도차이가 0.1～0.5의 범위가 되도록 일정량을 취한 다음 0.05M 초산염완충액에 녹여 시험용액을 조제한다.

시험조작 : 기질용액 2mL를 시험관에 넣고 이에 미리 48℃의 수욕조에서 5분간 항온시킨 시험용액 1mL를 정확히 가해주고 흔들어 혼합한 후 수욕조에 방치한다. 정확히 5분 후 시험관을 끓는 수욕조에서 3분간 가열하여 효소반응을 중지시킨 다음 상온으로 식혀준다. 따로 효소공시험용으로 시험용액 대신 미리 수욕조에서 3분간 가열실활시킨 시험용액 1mL를 사용한다. 별도로 2개의 시험관에 물 1.4mL를 각각 넣고 이에 위의 효소반응액 0.1mL와 효소공시험반응액 0.1mL를 각각 가해준 다음 알칼리성페리시아나이드시액 2mL씩을 가해 주고 끓는 수욕조에서 15분간 가열하고 상온으로 식힌 다음 액층 1cm, 파장 420nm에서 효소시험용액과 효소공시험용액의 흡광도를 각각 측정하여 검량선에서 D-글루코사민의 농도(μmol/mL)를 구한다.

검량선의 작성 : 미리 건조 항량시킨 D-글루코사민염산염 215.6mg을 정밀히 달아 물을 가하여 100mL로 한다. 이 액을 사용하여 1mL당 D-글루코사민을 2.0, 4.0, 6.0, 8.0, 10.0μmol/mL을 함유하도록 글루코사민표준용액을 각각 조제한다. 각 표준용액 1mL와 물 2mL를 각 시험관에 넣고 시험관 모두를 끓는 수욕조에서 3분간 끓여주고 상온으로 식힌 다음 시험조작의 「별도로 2개의 시험관에」 이하와 동일조작을 행한다. 따로, 표준용액 1mL 대신 물 1mL를 사용하여 시험한 것을 대조액으로 하여 액층 1cm, 파장 420nm에서 각각의 흡광도를 측정하고 글루코사민표준용액의 농도(μmol/mL)에 대한 검량선을 작성한다.

다음의 계산식에 따라 효소제의 역가를 구한다.

역가(CU/mL 또는 g) ＝	A
	5 × W

A : 검량선에서 얻은 시험용액의 D-글루코사민 표준용액의 농도(μmol/mL 또는 g)

5  : 반응시간(분)

W : 시험용액 1mL에 함유된 검체의 양(mL)

역가의 정의 : 1 Chitosanase unit(CU)는 상기시험조건 하에서 분당 1μmol의 D-글루코사민에 상당하는 환원당을 유리시키는 효소의 양이다.

시   액

0.05M 초산염완충액(pH 5.0) : 0.1M 초산 14.8mL와 0.1M 초산나트륨용액 35.2mL를 혼합하고 물을 가하여 100mL로 한다. 이 용액의 pH는 5.0이어야 한다.

기질용액 : 키토산(Sigma Co.) 0.2g을 물 40mL에 현탁시키고 1.0M 초산 10mL를 가하여 교반 용해시킨 후 1.0M 초산나트륨용액을 가하여 pH를 5.0으로 조절한 다음 0.05M 초산염완충액(pH 5.0)을 가하여 100mL로 한다. 이 용액은 냉장고에 보관한다.

알칼리성페리시아나이드시액 : 페리시안화칼륨(K3Fe(CN)6) 0.5g을 0.5M 탄산나트륨용액 1,000mL에 녹인다. 이 액은 갈색병에 넣어 밀봉하여 보존한다.

보존기준 (생  략)

159. 키토사나아제

Chitosanase

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

정 량 법(역가)

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------.

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

-------

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

------------------Sigma-Aldrich Co. 또는 이와 동등한 것------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

보존기준 (현행과 같음)

183. 판크레아틴

Pancreatin

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

정 량 법(역가)

(1) (생  략)

(2) 리파아제역가

시험용액의 조제 : 이 품목 200mg을 정밀히 달아 유발에 넣고 물 3mL를 가해주고 10분간 분쇄한 후 최종희석액 1mL의 리파아제역가가 8～16USP units를 함유하도록 시험용액을 조제한다.

시험조작 : 기질용액 10.0mL, 트리스완충용액 8.0mL 및 타우로콜린산나트륨용액 2.0mL 및 물 9.0mL를 뚜껑이 있는 50mL 용량의 수기에 넣고 혼합한 후 온도조절장치가 부착된 수욕조에 넣고 수기의 뚜껑을 닫은 다음 후 교반기로 지속적으로 교반한다. 이 혼합액을 37±0.1℃의 수욕조에서 항온시킨 후 0.1N 수산화나트륨용액으로 pH를 9.2로 맞춘다. 시험용액 1.0mL를 가하여 5분간 pH가 9.0이 될 때까지 0.1N 수산화나트륨용액을 가해주면서 분당 0.1N 수산화나트륨용액의 소비 mL수를 기록한다. 따로, 표준용액 1mL를 사용하여 시험용액과 같은 조작을 행하여 0.1N 수산화나트륨용액의 소비 mL에 대한 표준용액의 분당 적정곡선을 작성하고 이 때 적정곡선중 직선구간만을 적용하여 시험용액에 대한 0.1N 수산화나트륨용액의 분당 소비 mL수를 구한다.

다음 계산식에 따라 효소제(리파아제)를 구한다.

A : 표준용액 1mL의 리파아제역가 (USP units/mL)

V : 표준적정곡선의 직선구간에 대응하는 시험용액의 분당 소비 mL수(mL/min)

W : 시험용액 1mL에 함유된 검체의 양(mg)

역가(USP units/mg) =	A × V
	W

시   액

표준용액 : USP판크레아틴표준품 200mg을 정밀히 달아 유발에 넣고 물 3mL를 가해주  고 10분간 분쇄한 다음 이 액 mL의 리파아제역가 8～16USP units를 함유하도록 차가운 물로 희석한 액을 표준용액으로 한다. 이 현탁액은 4℃에서 유지하면서 사용 전에 혼합한다. 또한 이 액은 시험하기 전에 미리 차가운 현탁액 5～10mL를 취한 다음 20℃가 될 때까지 방치시킨 후 정확한 양을 취한다.

아카시아용액 : 아카시아용액(1→10)이 맑게 될 때까지 원심분리한 후 맑은 액만 사용한다.

기질용액 : 아카시아용액 165mL, 올리브오일 20mL, 및 얼음 15g을 고속혼합기의 수기에 넣고 혼합한 후 5℃로 얼음욕조에서 혼합물을 냉각하고 15분간 고속으로 균질화한다.

트리스완충액 : 트리스(하이드록시메틸)아미노메탄[Tris(hydroxymethyl) aminomethane] 60mg 및 염화나트륨 234mg에 물을 가하여 100mL로 한다.

타우로콜린산나트륨용액 : 이 액 1mL당 USP타우로콜린산나트륨표준품 80.0mg을 함유하도록 조제한다.

(3) (생  략)

보존기준 (생  략)

183. 판크레아틴

Pancreatin

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

정 량 법(역가)

(1) (현행과 같음)

(2) 리파아제역가

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

----------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

-------

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

아라비아검용액 : 아라비아검용액---

------------------------------------------------.

------아라비아검용액---------

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------------------.

(3) (현행과 같음)

보존기준 (현행과 같음)

197. 탄나아제

Tannase

정    의 (생  략)

함    량 (생  략)

성    상 (생  략)

순도시험 (생  략)

정 량 법(역가)

분석원리 : 본 역가시험은 온도 30℃에서 탄닌산 기질의 뎁시드(depside) 결합의 가수분해에 근거를 두고 있다. 흡광광도계를 이용하여 310nm에서 흡광도 차를 측정한다.

시험용액의 조제 : 최종 희석액 1mL가 1 Tananse unit를 함유하도록 검체 일정량을 취하여 즉시 저온(5±3℃) 상태의 50mM 구연산 완충액(pH 5.5)을 가하여 시험용액을 조제한다.

시험조작 : 25×150mm 시험관에 기질용액 4mL을 넣고 30℃의 수욕조에서 10분간 항온시킨다. 이에 시험용액 1mL를 정확히 가하고 흔들어 혼합한 후 다시 수욕조에서 반응을 시킨다(반응개시). 시험관을 반응액 A용과 반응액 B용으로 하여, 시험관 A에는 반응개시로부터 정확히 10분 후에 반응액 1mL를 정확히 취한 다음, 이에 80%에탄올용액 9mL를 넣고 격렬히 흔들어 반응을 정지시킨다. 이 반응액을 A액이라고 한다. 또 시험관 B에는 반응개시로부터 정확히 20분 후 반응액 1mL를 정확히 취한 다음 이에 80% 에탄올용액 9mL를 넣고 혼합하여 반응을 정지시킨다. 이 반응액을 B액이라고 한다. A액 및 B액을 각각 다시 80% 에탄올용액으로 10배 희석시킨 다음 효소시험용액 A, B로 한다. 효소시험용액 A 및 B액을 각각 80% 에탄올용액을 대조액으로 하여 액층 1cm, 파장 310nm에서의 흡광도 a 및 b를 측정한다.

다음의 계산식에 따라 효소제의 역가를 구한다.

역가(units/g) =	(a - b) × 20.3 × 4
	10 × 0.71 × C

20.3 : 4 : 10 : 0.71 : C : a : b :	기질용액 1.0mL에 함유된 탄닌산의 마이크로몰수(μmol) 반응에 사용된 기질용액(mL) 최종반응시간과 최초반응시간의 차이(min) 상기시험조건 하에서 탄닌산 20.3μmol을 완전히 가수분해했을 때의 흡광도 변화 시험용액 1mL중에 함유된 검체의 양(g) 효소시험용액 A의 흡광도 효소시험용액 B의 흡광도 [단, (a - b)의 값은 0.09～0.11 범위에 들어가야 한다.]

역가의 정의 : 1 Tannase unit는 상기 시험조건 하에서 분당 뎁시드(depside) 결합된 기질 탄닌산 1μmol을 가수분해시키는 효소의 양이다.

시  액

50mM 구연산완충액(pH 5.5)

A 액 : 구연산 10.5g을 물에 녹여 1,000mL로 한다.

B 액 : 구연산나트륨(2수염) 14.7g을 물에 녹여 1,000mL로 한다.

A액 138mL와 B액 500mL를 섞고 양액을 사용하여 pH 5.5로 한다.

기질용액 : 탄닌산(Sigma USP Grade) 0.32g을 달아 50mM 구연산완충액(pH 5.5) 10mL에 가하여 가온교반하면서 녹인 다음 50mM 구연산완충액(pH 5.5)을 가하여 100mL로 한다.

보존기준 (생  략)

197. 탄나아제

Tannase

정    의 (현행과 같음)

함    량 (현행과 같음)

성    상 (현행과 같음)

순도시험 (현행과 같음)

정 량 법(역가)

-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

---------------------------------------.

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

---------------------------

----------------------------------------------------------------------------------------.

-------

---------------------

---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

------------------Sigma-Aldrich USP Grade 또는 이와 동등한 것-------------------------

----------------------------------------------------------------------.

보존기준 (현행과 같음)

제 4. 품목별 사용기준

가. 화학적 합성품

소르빈산

소르빈산은 아래의 식품 이외에 사용하여서는 아니 된다. 소르빈산의 사용량은 소르빈산으로서

1. ～ 3. (생  략)

4. 젓갈류(단, 염분 8% 이하의 제품에 한함), 한식된장, 된장, 고추장, 춘장, 청국장(단, 비건조 제품에 한함), 혼합장, 어패건제품, 팥등앙금류, 절임류(식초절임 제외), 플라워페이스트, 드레싱∶1.0g/kg 이하

5. ～ 14. (생  략)

<신  설>

제 4. 품목별 사용기준

가. 화학적 합성품

소르빈산

----------------------------------------------------------------------

1. ～ 3. (현행과 같음)

4. -------------------------- -------------- 된장, 조미된장, 고추장, 조미고추장, ----------- -------------------------------------------------------------------------------------------------

5. ～ 14. (현행과 같음)

15. 향신료조제품(건조제품 제외) : 1.0g/kg 이하

소르빈산칼륨

소르빈산칼륨은 아래의 식품 이외에 사용하여서는 아니 된다. 소르빈산칼륨의 사용량은 소르빈산으로서

1. ～ 3. (생  략)

4. 젓갈류(단, 염분 8% 이하의 제품에 한함), 한식된장, 된장, 고추장, 춘장, 청국장(단, 비건조 제품에 한함), 혼합장, 어패건제품, 팥등앙금류, 절임류(식초절임 제외), 플라워페이스트, 드레싱∶1.0g/kg 이하

5. ～ 14. (생  략)

<신  설>

소르빈산칼륨

--------------------------------------------------------------------------

1. ～ 3. (현행과 같음)

4. -------------------------- -------------- 된장, 조미된장, 고추장, 조미고추장, ----------- -------------------------------------------------------------------------------------------------

5. ～ 14. (현행과 같음)

15. 향신료조제품(건조제품 제외) : 1.0g/kg 이하

소르빈산칼슘

소르빈산칼슘은 아래의 식품 이외에 사용하여서는 아니 된다. 소르빈산칼슘의 사용량은 소르빈산으로서

1. ～ 3. (생  략)

4. 젓갈류(단, 염분 8% 이하의 제품에 한함), 한식된장, 된장, 고추장, 춘장, 청국장(단, 비건조 제품에 한함), 혼합장, 어패건제품, 팥등앙금류, 절임류(식초절임 제외), 플라워페이스트, 드레싱∶1.0g/kg 이하

5. ～ 14. (생  략)

<신  설>

소르빈산칼슘

--------------------------------------------------------------------------

1. ～ 3. (현행과 같음)

4. -------------------------- -------------- 된장, 조미된장, 고추장, 조미고추장, ----------- -------------------------------------------------------------------------------------------------

5. ～ 14. (현행과 같음)

15. 향신료조제품(건조제품 제외) : 1.0g/kg 이하

이초산나트륨

이초산나트륨은 아래의 식품 이외에 사용하여서는 아니 된다. 이초산나트륨의 사용량은

1. ～ 3. (생  략)

4. 스프, 과자：0.05% 이하

이초산나트륨

--------------------------------------------------------------

1. ～ 3. (현행과 같음)

4. 수프, ---------------