식품의약품안전청 고시 제2011-68호

건강기능식품의 기준 및 규격 일부개정고시

2011. 11. 17

식품의약품안전청

식품의약품안전청 고시 제2011-68호

건강기능식품의 기준 및 규격 일부개정고시

1. 개정 이유

바나바잎추출물 등 기능성 원료 8품목에 대한 기준 및 규격을 신설하고, 각 원료별 기능성 내용 및 일일섭취량을 개정하여 소비자에게 올바른 정보를 제공하고 건강기능식품산업 활성화를 유도하고자 함

2. 주요 내용

가. 용어의 정비 [총칙, Ⅰ.1, Ⅰ.2, Ⅰ.3 Ⅰ.4]

(1) 개정된 타 고시의 명칭인 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」으로 용어 개정

(2) 장용성 제품의 정의 신설

나. 기능성 원료별 기준 및 규격 추가 등재 개정 [총칙 5. 1)]

개별인정형 기능성 원료를 고시형으로 전환하는 기간을 2년에서 3년으로 연장

다. 바나바잎추출물 등 8개 품목의 기준 및 규격 신설 [Ⅱ.2.2.6, Ⅱ.2.2.7, Ⅱ.2.2.8, Ⅱ.2.2.9 Ⅱ.2.2.10, Ⅱ.2.3.14, Ⅱ.2.6.2 및 Ⅱ.2.7.1 ]

(1) Ⅱ.2.2 페놀류에 구아바잎추출물, 바나바잎추출물, 은행잎추출물, 밀크씨슬(카르두스 마리아누스)추출물, 달맞이꽃종자추출물의 기준 및 규격

(2) Ⅱ.2.3 지방산 및 지질류에 포스파티딜세린의 기준 및 규격

(3) Ⅱ.2.6 아미노산 및 단백질류에 테아닌의 기준 및 규격

(4) Ⅱ.2.7 기타류 및 디메틸설폰(Methyl sulfonylmethane, MSM)의 기준 및 규격

라. 기능성 원료 최종제품의 요건 개정 [Ⅱ.2]

(1) 기능성 원료별로 부여된 기능성 내용을 일관성이 유지되도록 동일한 문장형태로 개정

(2) 기능성 내용별 각각 설정된 일일섭취량을 안전성이 확보된 범위 내에서 동일성이 유지되도록 일일섭취량의 상한치 확대

마. 건강기능식품 시험법 개정 [Ⅲ.2.6, Ⅲ.3.2]

(1) 무기질 시험법 중 전처리 방법에 황산-질산법과 마이크로웨이브 시험법과 분석방법으로 기존의 원자흡광광도법 외에 유도결합플라즈마법 추가

(2) 레시틴 중 콜레스테롤 시험법을 더 정밀한 방법으로 개정

3. 기타 참고사항

가. 관계법령 : 건강기능식품에 관한 법률 제14조, 제15조

나. 예    산 : 별도조치 필요 없음

다. 합    의 : 해당사항 없음

라. 기타사항 : (1) 신․구조문 대비표, 별첨

(2) 행정예고(2011. 9. 28. ～ 2011. 10. 18)

(3) 건강기능식품심의위원회 심의 (2011. 10. 28 ～ 2011. 11. 5)

식품의약품안전청 고시 제2011-68호

「건강기능식품에 관한 법률」 제14조 및 제15조에 따른 「건강기능식품의 기준 및 규격」(식품의약품안전청 고시 제2011-25호, 2011. 6. 21)을 다음과 같이 개정 고시합니다.

건강기능식품의 기준 및 규격 일부개정고시

건강기능식품의 기준 및 규격 일부를 다음과 같이 개정한다.

총칙 4. 중 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」을 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」으로 한다.

총칙 5. 중 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」을 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」으로 하며, 5.의 1) 중 “2년”을 “3년”으로 한다.

Ⅰ.1 건강기능식품의 제조에 사용되는 원료는 다음과 같다. 1)의 (2) (나) 중 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」을 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」으로 한다.

Ⅰ.2 공통제조기준 중 1) 및 3) (1) 및 6) 중 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」을 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」으로 각각 한다.

Ⅰ.3 공통규격 1) 중 (2)와 (3)을 (3)과 (4)로 하고, (2)를 다음과 같이 신설한다.

(2) 붕해 특성에 따른 제품의 정의

(가) 장용성(Delayed release)제품이란 섭취 시 위(胃)의 산성조건에서 붕해되지 않고 장(腸)에서 붕해되는 특성을 가진 제품을 말함

Ⅰ.4 건강기능식품의 기준 및 규격 적용 1) 중 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」을 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」으로 하며, [표1]을 별지와 같이 한다.

Ⅱ.2.1.1 인삼 3)의 (1) 중 “면역력 증진, 피로회복”을 “면역력 증진․피로개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.1.2 홍삼 3)의 (1) 중 “면역력 증진, 피로회복, 혈소판 응집억제를 통한 혈액흐름에 도움, 기억력 개선에 도움을 줄 수 있음”을 “면역력 증진․피로개선․혈소판 응집억제를 통한 혈액흐름․기억력 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 하고 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 면역력 증진․피로개선에 도움을 줄 수 있음 : 진세노사이드 Rg1과 Rb1의 합계로서 3～80 mg

(나) 혈소판 응집억제를 통한 혈액흐름․기억력 개선에 도움을 줄 수 있음 : 진세노사이드 Rg1과 Rb1의 합계로서 2.4～80 mg

Ⅱ.2.1.3 엽록소 함유 식물 3)의 (1) 중 “피부건강에 도움, 항산화 작용”을 “피부건강․항산화에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.1.4 클로렐라 3)의 (1) 중 “피부건강에 도움, 항산화 작용, 면역기능 증진에 도움을 줄 수 있음”을 “피부건강․항산화․면역력 증진에 도움을 줄 수 있음”으로 하며 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 피부건강․항산화에 도움을 줄 수 있음 : 총 엽록소로서 8～150 mg

(나) 면역력 증진에 도움을 줄 수 있음 : 총 엽록소로서 125～150 mg

Ⅱ.2.1.5 스피루리나 3)의 (1) 중 “피부건강에 도움, 항산화 작용, 혈중 콜레스테롤 수치 개선에 도움을 줄 수 있음”을 “피부건강․항산화․혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 하며 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 피부건강․항산화에 도움을 줄 수 있음 : 총 엽록소로서 8～150 mg

(나) 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음 : 총 엽록소로서 40～150 mg

Ⅱ.2.2.1 녹차추출물 3)의 (1) 중 “항산화 작용, 체지방 감소에 도움을 줄 수 있음”을 “항산화․체지방 감소에 도움을 줄 수 있음”으로 하고, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

카테킨으로서 0.3～1 g

Ⅱ.2.2.2 알로에 전잎 3)의 (1) 중 “배변활동 원활”을 “배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.2.3 프로폴리스추출물 3)의 (1) 중 “항산화 작용, 구강에서의 항균작용”을 “항산화․구강에서의 항균작용에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.2.4 코엔자임Q10 3)의 (1) 중 “항산화에 도움을 줄 수 있음, 혈압이 높은 사람에게 도움을 줄 수 있음”을 “항산화․높은 혈압 감소에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

“Ⅱ.2.2.6 구아바잎 추출물”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.2.6 구아바잎 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 구아바(Psidium gujava)의 잎

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 열수 추출하고 여과, 농축하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 총 폴리페놀이 250～450 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 총 폴리페놀

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 0.5 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

총 폴리페놀로서 120 mg

“Ⅱ.2.2.7 바나바잎 추출물”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.2.7 바나바잎 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 바나바(Lagerstroemia speciosa)의 잎

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 주정으로 추출하고 여과, 농축하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분) : 코로소린산(Corosolic acid)으로서 9～13 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 코로소린산

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

코로소린산으로서 0.45～1.3 mg

“Ⅱ.2.2.8 은행잎 추출물”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.2.8 은행잎 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 은행나무(Ginko biloba)의 잎

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 분쇄 후 주정으로 추출하고 정제, 농축, 여과하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 플라보놀 배당체(flavonol glycoside)가 240～300 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 플라보놀 배당체

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 깅콜릭산(ginkgolic acid)(mg/kg) : 5.0 이하

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 1.0 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 1.0 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 기억력 개선․혈행 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

플라보놀 배당체로서 28～36 mg

(3) 섭취 시 주의사항

임산부, 수유부, 어린이 및 수술전후 환자는 섭취에 주의

의약품(항응고제) 복용 시 섭취에 주의

“Ⅱ.2.2.9 밀크씨슬(카르두스 마리아누스) 추출물”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.2.9 밀크씨슬(카르두스 마리아누스) 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 밀크씨슬(Silybum marianum)

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 그대로 주정 추출하거나 압착 또는 헥산으로 탈지하여 주정 추출한 후 여과, 농축, 정제하여 제조하여야 함. 정제과정 중 헥산 또는 초산에틸 사용 가능함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 실리마린(실리빈으로서)이 320～660 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 실리마린(실리빈으로서)

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 잔류용매 (해당 용매를 사용한 경우에 한함)

(가) 헥산(mg/kg) : 5.0 이하

(나) 초산에틸(mg/kg) : 50.0 이하

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 간 건강에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

실리마린으로서 130 mg

(3) 섭취 시 주의사항

알레르기 반응이 나타나는 경우에는 섭취 중단

설사, 위통, 복부팽만 등의 위장관계 장애가 나타나는 경우에는 섭취에 주의

“Ⅱ.2.2.10 달맞이꽃종자 추출물”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.2.10 달맞이꽃종자 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 달맞이꽃(Oenothera biennis)의 종자

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 압착 또는 헥산으로 탈지하고 주정으로 추출한 후 여과, 농축하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : PGG(Penta-O-galloyl beta-D-glucose)가 20-28 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) PGG

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 헥산(mg/kg) 5.0 이하 (사용한 경우에 한함)

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

PGG로서 4～8.4 mg

Ⅱ.2.3.1 오메가-3 지방산 함유 유지 3)의 (1) 중 “혈중 중성지질 개선, 혈행개선”을 “혈중 중성지질 개선․ 혈행개선에 도움을 줄 수 있음” 으로 한다.

Ⅱ.2.3.2 감마리놀렌산 함유 유지 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 혈행개선”을 “혈중 콜레스테롤 개선․혈행 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.3.3 레시틴 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선”을 “혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.3.4 스쿠알렌 3)의 (1) 중 “항산화 작용”을 “항산화에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.3.5 식물스테롤/식물스테롤에스테르 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선”을 “혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.3.6 알콕시글리세롤 함유 상어간유 3)의 (1) 중 “면역력 증진”을 “면역력 증진에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.3.7 옥타코사놀 함유 유지 3)의 (1) 중 “지구력 증진”을 “지구력 증진에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.3.8 매실추출물 3)의 (1) 중 “피로개선”을 “피로개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

“Ⅱ.2.3.14 포스파티딜세린”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.3.14 포스파티딜세린

1) 제조기준

(1) 원재료 : 대두 레시틴

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 L-세린(serine)과 효소(phopholiphase)반응하여 물, 주정, 아세톤 또는 헥산으로 추출하고 정제하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 포스파티딜세린이 380 mg/g 이상 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 포스파티딜세린

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 잔류용매 (해당 용매를 사용한 경우에 한함)

(가) 헥산(mg/kg) : 5.0 이하

(나) 아세톤(mg/kg) : 10.0 이하

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 1.0 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 1.0 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 노화로 인해 저하된 인지력 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

포스파티딜세린으로서 300 mg

(3) 섭취 시 주의사항

임산부와 수유부는 섭취에 주의

과잉섭취 시 위장장애나 불면증을 유발할 수 있음

Ⅱ.2.4.1 글루코사민 3)의 (1) 중 “관절 및 연골 건강에 도움”을 “관절 및 연골 건강에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.2 N-아세틸글루코사민 3)의 (1) 중 “관절 및 연골 건강에 도움, 피부보습에 도움을 줄 수 있음”을 “관절 및 연골 건강․피부보습에 도움을 줄 수 있음”으로 하고, 3)의 (2) (가) 중 “관절 및 연골건강에 도움”을 “관절 및 연골건강에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.3 뮤코다당․단백 3)의 (1) 중 “관절 및 연골 건강에 도움”을 “관절 및 연골 건강에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.4.1 구아검/구아검가수분해물 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제, 배변활동 원활, 장내 유익균 증식에 도움을 줄 수 있음”을 “혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․장내 유익균 증식․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 하고, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 구아검/구아검가수분해물 식이섬유로서 9.9～27 g

(나) 장내 유익균 증식에 도움을 줄 수 있음 : 구아검/구아검가수분해물 식이섬유로서 4.6～27 g

Ⅱ.2.4.4.2 글루코만난(곤약, 곤약만난) 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 배변활동 원활”을 “혈중 콜레스테롤 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 하고, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

글루코만난 식이섬유로서 2.7～17 g

Ⅱ.2.4.4.3 귀리 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제”를 “혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음”으로 하며, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음 : 귀리식이섬유로서 3 g 이상

(나) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 : 귀리식이섬유로서 0.8 g 이상

Ⅱ.2.4.4.4 난소화성말토덱스트린 3)의 (1) 중 “식후혈당상승억제, 배변활동 원활, 혈중 중성지질 개선에 도움을 줄 수 있음”을 “식후 혈당상승 억제․혈중 중성지질 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 하며, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 : 난소화성말토덱스트린 식이섬유로서 11.9～30 g (액상원료는 11.6～44 g)

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 난소화성말토덱스트린 식이섬유로서 2.5～30 g (액상원료는 2.3～44 g)

(다) 혈중 중성지질 개선에 도움을 줄 수 있음 : 난소화성말토덱스트린 식이섬유로서 12.7～30 g (액상원료는 12.7～44 g)

Ⅱ.2.4.4.5 대두식이섬유 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제, 배변활동 원활”을 “혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 하고, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 대두식이섬유로서 20～60 g

(나) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 : 대두식이섬유로서 10～60 g

Ⅱ.2.4.4.6 목이버섯 3)의 (1) 중 “배변활동 원활”을 “배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.4.7 밀식이섬유 3)의 (1) 중 “식후혈당상승억제, 배변활동 원활”을 “식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 하며, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음: 밀식이섬유로서 6～36 g

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 밀식이섬유로서 36 g

Ⅱ.2.4.4.8 보리식이섬유 3)의 (1) 중 “배변활동 원활”을 “배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.4.9 아라비아검(아카시아검) 3)의 (1) 중 “배변활동 원활”을 “배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.4.10 옥수수겨 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제”를 “혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.4.11 이눌린/치커리추출물 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제, 배변활동 원활”을 “혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 하고, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 : 이눌린/치커리추출물 식이섬유로서 7.2～20 g

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 이눌린/치커리추출물 식이섬유로서 6.4～20 g

Ⅱ.2.4.4.12 차전자피 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선, 배변활동 원활”을 “혈중 콜레스테롤 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 하고, 3)의 (2)를 다음과 같이 한다.

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음 : 차전자피 식이섬유로서  5.5 g 이상

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 차전자피 식이섬유로서 3.9 g 이상

Ⅱ.2.4.4.13 폴리덱스트로스 3)의 (1) 중 “배변활동 원활”을 “배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.4.14 호로파종자 3)의 (1) 중 “식후혈당상승억제”를 “식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.5 알로에겔 3)의 (1) 중 “피부건강에 도움, 장 건강에 도움, 면역력 증진”을 “피부건강․장 건강․면역력 증진에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.6 영지버섯 자실체 추출물 3)의 (1) 중 “혈행개선”을 “혈행개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.7 키토산/키토올리고당 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선”을 “혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.4.8 프락토올리고당 3)의 (1) 중 “유익균 증식, 유해균 억제, 배변활동 원활, 칼슘 흡수에 도움”을 “유익균 증식 및 유해균 억제․칼슘 흡수․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.5.1 프로바이오틱스 1)의 (1) 중 “B.animalis spp. lactis"를 ”B.animalis ssp. lactis“로 하며, 3)의 (1) 중 “유익한 유산균 증식, 유해균 억제 또는 배변활동 원활”을 “유산균 증식 및 유해균 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.5.2 홍국 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선”을 “혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

Ⅱ.2.6.1 대두단백 3)의 (1) 중 “콜레스테롤 개선”을 “ 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음”으로 한다.

“Ⅱ.2.6.2 테아닌”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.6.2 테아닌

1) 제조기준

(1) 원재료 : L-글루타민, 에칠아민

(2) 제조방법

(가) 상기 (1)의 원재료를 glutaminase 효소반응시켜 정제, 농축 후 주정으로 결정화하여 제조하여야 함

(나) 상기 (1)의 원재료를 화학적으로 합성하는 경우 식품첨가물의 기준 및 규격에 적합하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : L-테아닌이 940 mg/g 이상 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) L-테아닌

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 스트레스로 인한 긴장완화에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

L-테아닌으로서 200～250 mg

(3) 섭취 시 주의사항

카페인 함유음료(커피, 홍차, 녹차 등)와의 병용 섭취에 주의

임산부, 수유부, 어린이 및 수술전후 환자는 섭취에 주의

“Ⅱ.2.7 기타류” 및 “Ⅱ.2.7.1 디메틸설폰(Methyl sulfonylmethane, MSM)”을 다음과 같이 신설한다.

Ⅱ.2.7 기타류

Ⅱ.2.7.1 디메틸설폰(Methyl sulfonylmethane, MSM)

1) 제조기준

(1) 원재료 : 식품원료로 사용 가능한 식물류의 리그닌

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료에서 생성된 DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 산화한 후 증류, 정제, 여과, 농축한 후 결정화하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 디메틸설폰(MSM)이 980 mg/g 이상 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 디메틸설폰(MSM)

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 원료제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 0.1 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.1 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 0.1 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 관절 및 연골건강에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

디메틸설폰(MSM)으로서 1.5～2.0 g

Ⅲ.건강기능식품 시험법 중 “Ⅲ.3.2.1 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬”을 다음과 같이 한다.

Ⅲ.3.2.1 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬

Ⅲ.3.2.1.1 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬(제1법 원자흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬을 건식 또는 습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다. 이는 시험용액 중의 금속원소를 적당한 방법으로 해리시켜 원자 증기화하여 생성한 기저상태의 원자가 그 원자증기를 통과하는 빛으로부터 측정파장의 빛을 흡수하는 현상을 이용하여 광전측정 등에 따라 목적원소의 특정파장에서의 흡광도를 측정하고 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 유리여과기 또는 석면

2.1.5 시험관

2.1.6 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Copper

분자식 : Cu, 분자량 : 63.55, CAS No. : 7440-50-8

3.1.2 Magnesium

분자식 : Mg, 분자량 : 24.31, CAS No. : 7439-95-4

3.1.3 Maganese

분자식 : Mn, 분자량 : 54.94, CAS No. : 7439-96-5

3.1.4 Molybdenum

분자식 : Mo, 분자량 : 95.94, CAS No. : 7439-98-7

3.1.5 Selenium

분자식 : Se, 분자량 : 78.96, CAS No. : 7782-49-2

3.1.6 Chromium

분자식 : Cr, 분자량 : 52.00, CAS No. : 7440-47-3

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 황산(Sulfuric acid)

3.2.4 증류수(Distilled water)

3.2.5 수산암모늄용액(Ammonium hydroxide liquid)

3.2.6 구연산암모늄용액(Ammonium citrate liquid)

3.2.7 BTB시액(Bromothymol blue)

3.2.8 황산암모늄용액(Ammonium sulfate liquid)

3.2.9 암모니아수(Ammonia water)

3.2.10 DDTC(Diethyl dithiocatbamic acid)

3.2.11 MIBK(Methyl iso-butyl ketone)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1 시료(건조물) 약 5∼20 g을 취해 건조하여 탄화시킨다.

4.1.1.2 450∼550℃에서 회화한다. 잘 되지 않으면 일단 식혀 질산(1+1) 또는 50% 질산마그네슘용액 또는 질산알루미늄 40 g 및 질산칼륨 20 g을 물 100 mL에 녹인 액 2∼5 mL로 적시고 건조한 다음 회화를 계속한다. 회화가 불충분할 때는 위의 조작을 1회 되풀이하고 필요하면 마지막으로 질산(1+1) 2∼5 mL를 가하여 완전하게 회화를 한다.

4.1.1.3 회분을 물로 적시고 염산 2∼4 mL를 가하여 수욕 상 또는 건조장치에서 건조한다.

4.1.1.4 염산 1∼2 mL 또는 0.5 N 질산을 가하여 가온해서 녹이고 불용물이 있으면 석면 또는 유리여과기로 여과한 다음 일정량으로 하여 시험용액으로 한다. 다만, 회화보조제로서 염산, 산화마그네슘, 탄산나트륨 등을 사용해도 좋으나 시험조작에 영향이 없을 때에만 사용하되 공시험용액에 대해서도 같은 조작을 하여 시험용액을 보정한다.

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 황산-질산법

4.1.2.1.1 시료(건조물로서 5∼20 g에 상당하는 양)를 분해플라스크에 취해 물 50∼70 mL, 질산 10～40 mL를 넣고 혼합하여 방치한다.

4.1.2.1.2 시험액을 조용히 가열하여 격렬한 반응이 그치면 식힌 다음 황산 5∼20 mL를 넣고 다시 서서히 가열한다.

4.1.2.1.3 내용물이 암색이 되기 시작하면 질산 2～3 mL을 추가하면서 가열을 계속하여 내용물이 미황색∼무색이 되었을 때 분해가 끝난 것으로 한다.

4.1.2.1.4 분해액을 식힌 후 물 30∼50 mL, 포화수산암모늄용액 10～25 mL를 가해서 황산의 흰 연기가 발생할 때까지 가열하고 식힌 다음 물로 일정량으로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.1.5 공시험용액에 대해서도 같은 조작을 하여 시험용액을 보정한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

4.2.1 직접법

4.2.2.1 시험용액 및 공시험용액을 그대로, 혹은 희석 또는 농축한다.

4.2.2.2. 원자흡광광도계에 주입하여 흡광도를 구하고 따로 표준용액 및 이의 공시험용액에 대해서도 각각 시험용액의 경우와 같은 조작을 해서 검량선을 작성하여 시험용액의 농도를 구한다.

4.2.2 용매 추출법

4.2.2.1 시험용액 및 공시험용액을 분액깔대기에 각각 10∼50 mL 취한다.(질산으로 pH 4.0 조정)

4.2.2.2 25% 구연산암모늄용액 2∼10 mL 및 BTB시액 2방울을 가하여 액의 색이 황색에서 연한 녹색이 될 때까지 암모니아수로 중화한다.

4.2.2.3 40% 황산암모늄시액 2∼10 mL 및 물을 가하여 일정량으로 한다.

4.2.2.4 10% DDTC용액 2∼10 mL를 넣고 혼합하여 수 분간 방치한 다음 MIBK 10∼20 mL를 가하여 격렬히 흔들어 섞는다.

4.2.2.5 MIBK층을 분취하여 원자흡광광도계에 주입하여 각각의 원소측정파장에 있어서 흡광도를 측정하고 따로 표준용액 및 공시험용액에 대해서도 같은 조작을 하고 검량선을 작성하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.3.2.1.2 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬(제2법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온선의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.1.2 유도결합플라즈마 질량 검출기(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Copper

분자식 : Cu, 분자량 : 63.55, CAS No. : 7440-50-8

3.1.2 Magnesium

분자식 : Mg, 분자량 : 24.31, CAS No. : 7439-95-4

3.1.3 Maganese

분자식 : Mn, 분자량 : 54.94, CAS No. : 7439-96-5

3.1.4 Molybdenum

분자식 : Mo, 분자량 : 95.94, CAS No. : 7439-98-7

3.1.5 Selenium

분자식 : Se, 분자량 : 78.96, CAS No. : 7782-49-2

3.1.6 Chromium

분자식 : Cr, 분자량 : 52.00, CAS No. : 7440-47-3

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.1.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 및 공시험용액을 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.건강기능식품 시험법 중 “Ⅲ.3.2.2 칼슘”을 다음과 같이 한다.

Ⅲ.3.2.2 칼슘

Ⅲ.3.2.2.1 칼슘(제1법 과망간산칼륨 용량법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 칼슘을 함유하는 용액에 수산염을 첨가하여 물에 매우 난용성인 수산칼슘으로 침전시켜 침전물을 황산에 녹여 용액 내의 수산을 과망간산칼륨용액으로 적정하여 정량하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 비커

2.1.6 유리봉

2.1.7 피펫

2.1.8 유리여과기(15AG-4)

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Calcium

분자식 : Ca, 분자량 : 40.08, CAS No. : 7440-70-2

3.2 일반시약

3.2.1 수산암모늄용액(Ammonium water)

수산암모늄[(NH4)2C2O4] 3.0 g에 물을 가하여 100 mL로 한다.

3.2.2 메틸레드지시약(Methyl red, 특급)

0.1% 메틸레드알코올용액

3.2.3 요소(Urea)

특급요소 70∼80℃의 저온으로 건조한 다음 흡습하지 않도록 보존한다.

3.2.4 세척용 암모니아수(1→50)

3.2.5 황산(Sulfuric acid)용액(1→25)

3.2.6 0.02 N 과망간산칼륨용액(Potassium permanganate)

3.2.7 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1 시료 적절량을 회화용기에 취하여 탄화시킨 후 550∼600℃의 온도에서 여러 시간 가열하여 백색∼회백색의 회분이 얻어질 때까지 회화한다.

4.1.1.2 회분을 방냉 후 주의하여 물로 적신 후 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가해 수욕 상에서 완전 증발 건고시킨다.

4.1.1.3 건고물에 염산용액(1→4) 약 8∼10 mL를 가해 수 분 가열 후 100 mL 메스플라스크에 여과한다.

4.1.1.4 불용물은 여지와 같이 사용했던 회화용기에 옮겨 건고한 후 다시 회화한다. 이 회분을 물로 적시어 염산용액(1→4) 약 2 mL를 가해 물 약 5 mL로 희석한 후 수욕 상에서 가온하고, 여과한 액을 앞의 100 mL 메스플라스크에 채워 물을 가하여 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 시료 적절량을 200∼300 mL 분해 플라스크에 취하여 질산 5 mL를 가하여 서서히 약하게 가열하고 최초의 심한 반응이 끝난 후 다시 온도를 올려 가열시킨다.

4.1.2.1.2 질산이 휘산되어 내용물이 거의 건고될 때까지 가열하고 질산용액(1→2) 10 mL와 70% 과염소산 10 mL를 가하여 가열을 조절하면서 서서히 가열시킨다.

4.1.2.1.3 고형물이 완전히 용해되고 액이 거의 무색이 될 때까지 가열을 계속하여 분해한다. 만약, 액이 착색되어 있으면, 70% 과염소산 수 mL를 가하여 가열한다.

4.1.2.1.4 분해 후 냉각하고 소량의 물로 희석한 후 직경이 9 cm의 자제증발접시에 액을 씻어 옮기고 증발 건고하여 과염소산을 증발시킨다.

4.1.2.1.5 잔류물에 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가하고 동량의 물로 희석시켜 수욕 상에서 가온하여 완전히 녹인 후 100 mL 메스플라스크에 옮겨 물을 가하여 전량을 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크 등에 옮겨 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

4.2.1 시험용액의 조제에서 얻은 시험용액 중에 40 mL(Ca 1∼12 mg에 대응하는 양)를 200 mL의 비커에 취하여 메틸레드시액 수 방울 및 수산암모늄용액 10 mL를 가한 다음 요소 2∼5 g을 가해 녹인다.

4.2.2 비커를 시계접시로 덮고 약하게 가열을 계속시킨다. 메틸레드시액을 색이 적색에서 등황색으로 (pH 약 5.6) 되었을 때 가열을 중지하고 방냉한다. 이를 2시간 이상(침전이 적을 때는 하룻밤) 실온으로 방치한다. 이 때의 액량은 약 20∼30 mL 정도이다.

4.2.3 충분히 침전을 형성시킨 후 석출 전 수산칼슘 결정을 유리여과기(15AG-4)로 흡입여과하고 세척용 암모니아수 30∼40 mL를 수 회 나누어 침전과 여지를 잘 씻는다.

4.2.4 세척이 끝나면 침전 생성에 사용한 비커를 앞의 유리여과기의 밑에 놓고 여과에 사용한 유리봉을 유리여과기에 넣어 미리 70℃ 이상으로 가온한 황산용액(1→25)을 유리여과기에 주입한다.

4.2.5 유리봉으로 교반하여 잠시 방치하고 수산칼슘을 용해한 다음 흡입한다. 다음 흡입을 그치고 가온한 황산용액(1→25) 약 5∼7 mL를 유리여과기에 주입하고 유리봉으로 교반하여 내벽을 씻고 흡입한다. 이 조작을 2회 반복한다.

4.2.6 비커를 여과장치에서 들어내고 65∼80℃로 가열하여 0.02 N 과망간산칼륨용액으로 적정한다. 공시험에 대하여도 같은 조작을 한다.

5. 분석 및 계산

[eqn: rm칼슘~함량(mg/g)={(b-a)×0.4008×F×V}over{시료채취량(g)}]  5.1 과망간산칼륨 용량법의 계산

a：공시험에 대한 0.02 N 과망간산칼륨용액의 소비 mL 수

b：검액에 대한 0.02 N 과망간산칼륨용액의 소비 mL 수

F：0.02 N 과망간산칼륨용액의 역가

V：시험용액의 희석배수

Ⅲ.3.2.2.2 칼슘(제2법 원자흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 칼슘을 건식 또는 습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Calcium

분자식 : Ca, 분자량 : 40.08, CAS No. : 7440-70-2

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

3.2.4 염화란탄(Lanthanum chloride, LaCl3) 또는 염화스트론티움(Strontium chloride, SrCl2)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.2.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 1 N 염산용액을 사용하여 칼슘 농도 1∼5 μg/mL가 되도록 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

4.2 사용될 1 N 염산용액에는 La으로서 1,000 ppm이 되도록 염화란탄(LaCl3)을 첨가하거나 또는 Sr으로서 5,000 ppm이 되도록 염화스트론티움(SrCl2)을 첨가하여 사용한다.

Ⅲ.3.2.2.3 칼슘(제3법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온산의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.21 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량 검출기(Inductively Coupled Plasma mass spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Calcium

분자식 : Ca, 분자량 : 40.08, CAS No. : 7440-70-2

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.2.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 및 공시험용액을 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.건강기능식품 시험법 중 “Ⅲ.3.2.4 철”을 다음과 같이 한다.

Ⅲ.3.2.4 철

Ⅲ.3.2.4.1 철(제1법 올쏘 페난트로린 비색법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 철을 건식 또는 습식으로 분해하여 올쏘 페난트로린 비색법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로
2.1.3 수욕조
2.1.4 부피플라스크
2.1.5 비커
2.1.6 마그네틱바
2.1.7 피펫
2.1.8 여과지(Whatman. 541)
2.1.9 pH 측정기

2.2 분석장비

2.2.1 분광광도계(Spectrophotometer)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Iron

분자식 : Fe, 분자량 : 55.85, CAS No. : 7439-89-6

3.2 일반시약

3.2.1 염산용액(Hydrochloric acid)

3.2.2 증류수(Distilled water)

3.2.3 질산용액(Nitric acid)

3.2.4 페난트로린(1,10-phenanthroline monohydrate)

3.2.5 하이드로퀴논용액(Hydroquinone)

3.2.6 구연산나트륨용액(Sodium citrate)

3.2.7 브롬페놀블루(Bromphenol blue)

3.2.8 수산화나트륨(Sodim chloride)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1 시료 적절량을 회화용기에 취하여 탄화시킨 후 550∼600℃의 온도에서 여러 시간 가열하여 백색∼회백색의 회분이 얻어질 때까지 회화한다.

4.1.1.2 회분을 방냉 후 주의하여 물로 적신 후 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가해 수욕 상에서 완전 증발 건고시킨다.

4.1.1.3 건고물에 염산용액(1→4) 약 8∼10 mL를 가해 수 분 가열 후 100 mL 메스플라스크에 여과한다.

4.1.1.4 불용물은 여지와 같이 사용했던 회화용기에 옮겨 건고한 후 다시 회화한다. 이 회분을 물로 적시어 염산용액(1→4) 약 2 mL를 가해 물 약 5 mL로 희석한 후 수욕 상에서 가온하고, 여과한 액을 앞의 100 mL 메스플라스크에 채워 물을 가하여 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 시료 적절량을 200∼300 mL 분해 플라스크에 취하여 질산 5 mL를 가하여 서서히 약하게 가열하고 최초의 심한 반응이 끝난 후 다시 온도를 올려 가열시킨다.

4.1.2.1.2 질산이 휘산되어 내용물이 거의 건고될 때까지 가열하고 질산용액(1→2) 10 mL와 70% 과염소산 10 mL를 가하여 가열을 조절하면서 서서히 가열시킨다.

4.1.2.1.3 고형물이 완전히 용해되고 액이 거의 무색이 될 때까지 가열을 계속하여 분해한다. 만약, 액이 착색되어 있으면, 70% 과염소산 수 mL를 가하여 가열한다.

4.1.2.1.4 분해 후 냉각하고 소량의 물로 희석한 후 직경이 9 cm의 자제증발접시에 액을 씻어 옮기고 증발 건고하여 과염소산을 증발시킨다.

4.1.2.1.5 잔류물에 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가하고 동량의 물로 희석시켜 수욕 상에서 가온하여 완전히 녹인 후 100 mL 메스플라스크에 옮겨 물을 가하여 전량을 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.1.3 올쏘 페난트로린 비색법 시액제조

4.1.3.1 페난트로린용액

올쏘 페난트로린 염산염(C12H8N2․HCl․H2O) 0.5 g을 물을 가하여 200 mL로 하여 냉소에 보존한다.

4.1.3.2 하이드로퀴논용액

하이드로퀴논(C2H6O2)을 물에 녹여 쓰며 사용할 때마다 새로 만들어야 한다.(희석배수 1%).

4.1.3.3 구연산나트륨용액

특급 구연산나트륨(Na3C6H5O7․H2O) 50 g에 물을 가하여 200 mL로 한다. 필요하면 여과하여 냉소에 보존한다.

4.1.3.4 브롬페놀블루시액

브롬페놀블루 0.1 g을 0.05 N 수산화나트륨액 3 mL로 녹이고 물을 가하여 250 mL로 한다.

4.1.3.5 철 표준액

특급 황산제1철 암모늄[Fe(NH4)2(SO4)2․6H2O] 0.7021 g을 약 1%의 염산에 용해하여 1 L로 한다. 이 액 1 L 중에는 철 0.1 mg을 함유한다.

4.2 시험조작

4.2.1 올쏘 페난트로린 비색법

4.2.1.1 시험용액의 조제에서 얻은 시험용액 중의 10 mL를 피펫으로 25 mL의 메스플라스크에 취하고 같은 10 mL를 시험관(혹은 작은 삼각플라스크)에 취한다. 후자는 pH조절용 대조액으로 쓴다.

4.2.1.2 시험관 쪽에는 브롬페놀블루시액 4방울을 가하고 25 mL 메스플라스크 쪽에는 하이드로퀴논용액 1 mL와 또 페난트로린용액 2 mL를 피펫으로 가한다.

4.2.1.3 구연산나트륨용액을 뷰렛 또는 5 mL 메스피펫으로 취하여 시험관의 액 중에 적가하고 액의 pH가 3.5가 되면 지시액을 가한 액의 색이 황색에서 황록색으로 변하는 점에서 적가를 그치고 이 때까지 소요된 구연산나트륨용액의 mL수를 기록한다.

4.2.1.4 [4.2.1.3] 같은 용량의 구연산나트륨용액을 메스플라스크 쪽에 가하여 물로 25 mL의 표선까지 희석하여 20℃ 이상의 온도에서 1시간 이상 방치한다. 하룻밤 방치해도 무방하다. 완전히 발색된 액은 적어도 48시간은 퇴색하지 않는다.

4.2.1.5 분광광도계(Spectrophotometer)에서는 510 nm의 파장에서, 광전비색계에서는 녹색필터를 이용해서 발색액의 흡광도를 측정하여 비흡광계수를 구한다.

4.2.1.6 [4.2.1.5]를 미리 작성하여 놓은 검량선과 대조하여 철의 양을 구한다. 검량선은 철 표준액을 물로 정확히 10배로 희석하여 1, 2, 5, 10, 15 및 20 mL를 각각 1조씩 25 mL의 메스플라스크와 시험관 또는 작은 삼각플라스크에 취한다. 10 mL 안되는 것은 물을 추가하여 거의 10 mL로 만든다.

4.2.1.7 상기 발색조작과 동일하게 pH 3.5에서 각 메스플라스크에서 발색시켜 흡광도를 측정하며, 농도 흡광곡선을 작성하고 시료 중의 철 함량은 계산식에 따라 산출한다.

5. 분석 및 계산

[eqn: rm철~함량(mg/g)=S×{a}over{시료채취량(g)}]  5.1 철 용량법의 계산

S：시험용액 중의 철의 양(mg/mL)

a：시험용액의 전량(mL)

Ⅲ.3.2.4.2 철(제2법 원자흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 철을 건식 또는 습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Iron

분자식 : Fe, 분자량 : 55.85, CAS No. : 7439-89-6

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.4.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 1 N 염산용액을 사용하여 철 농도 1∼5 μg/mL가 되도록 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

Ⅲ.3.2.4.3 철(제3법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온산의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.21 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량 검출기(Inductively Coupled Plasma mass spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Iron

분자식 : Fe, 분자량 : 55.85, CAS No. : 7439-89-6

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.4.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 및 공시험용액을 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.건강기능식품 시험법 중 “Ⅲ.3.2.5 아연”을 다음과 같이 한다.

Ⅲ.3.2.5 아연

Ⅲ.3.2.5.1 아연(제1법 원장흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 아연을 건식 또는 습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로
2.1.3 수욕조 또는 오븐
2.1.4 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Zinc

분자식 : Zn, 분자량 : 65.39, CAS No. : 7440-66-6

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1 시료 적절량을 회화용기에 취하여 탄화시킨 후 550∼600℃의 온도에서 여러 시간 가열하여 백색∼회백색의 회분이 얻어질 때까지 회화한다.

4.1.1.2 회분을 방냉 후 주의하여 물로 적신 후 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가해 수욕 상에서 완전 증발 건고시킨다.

4.1.1.3 건고물에 염산용액(1→4) 약 8∼10 mL를 가해 수 분 가열 후 100 mL 메스플라스크에 여과한다.

4.1.1.4 불용물은 여지와 같이 사용했던 회화용기에 옮겨 건고한 후 다시 회화한다. 이 회분을 물로 적시어 염산용액(1→4) 약 2 mL를 가해 물 약 5 mL로 희석한 후 수욕 상에서 가온하고, 여과한 액을 앞의 100 mL 메스플라스크에 채워 0.5N 질산용액을 가하여 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 시료 적절량을 200∼300 mL 분해 플라스크에 취하여 질산 5 mL를 가하여 서서히 약하게 가열하고 최초의 심한 반응이 끝난 후 다시 온도를 올려 가열시킨다.

4.1.2.1.2 질산이 휘산되어 내용물이 거의 건고될 때까지 가열하고 질산용액(1→2) 10 mL와 70% 과염소산 10 mL를 가하여 가열을 조절하면서 서서히 가열시킨다.

4.1.2.1.3 고형물이 완전히 용해되고 액이 거의 무색이 될 때까지 가열을 계속하여 분해한다. 만약, 액이 착색되어 있으면, 70% 과염소산 수 mL를 가하여 가열한다.

4.1.2.1.4 분해 후 냉각하고 소량의 물로 희석한 후 직경이 9 cm의 자제증발접시에 액을 씻어 옮기고 증발 건고하여 과염소산을 증발시킨다.

4.1.2.1.5 잔류물에 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가하고 동량의 물로 희석시켜 수욕 상에서 가온하여 완전히 녹인 후 100 mL 메스플라스크에 옮겨 0.5N 질산용액을 가하여 전량을 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

4.2.1 시험용액을 칼륨 농도 1∼10 μg/mL되게 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1 중 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

Ⅲ.3.2.5.2 아연(제2법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온산의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.21 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량 검출기(Inductively Coupled Plasma mass spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Zinc

분자식 : Zn, 분자량 : 65.39, CAS No. : 7440-66-6

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.5.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 및 공시험용액을 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.건강기능식품 시험법 중 “Ⅲ.3.2.6 칼륨”을 다음과 같이 한다.

Ⅲ.3.2.6 칼륨

Ⅲ.3.2.6.1 칼륨(제1법 원장흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 칼륨을 건식 또는 습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Potassium

분자식 : K, 분자량 : 39.10, CAS No. : 7440-09-7

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1 시료 적절량을 회화용기에 취하여 탄화시킨 후 550∼600℃의 온도에서 여러 시간 가열하여 백색∼회백색의 회분이 얻어질 때까지 회화한다.

4.1.1.2 회분을 방냉 후 주의하여 물로 적신 후 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가해 수욕 상에서 완전 증발 건고시킨다.

4.1.1.3 건고물에 염산용액(1→4) 약 8∼10 mL를 가해 수 분 가열 후 100 mL 메스플라스크에 여과한다.

4.1.1.4 불용물은 여지와 같이 사용했던 회화용기에 옮겨 건고한 후 다시 회화한다. 이 회분을 물로 적시어 염산용액(1→4) 약 2 mL를 가해 물 약 5 mL로 희석한 후 수욕 상에서 가온하고, 여과한 액을 앞의 100 mL 메스플라스크에 채워 0.5 N 질산용액을 가하여 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 시료 적절량을 200∼300 mL 분해 플라스크에 취하여 질산 5 mL를 가하여 서서히 약하게 가열하고 최초의 심한 반응이 끝난 후 다시 온도를 올려 가열시킨다.

4.1.2.1.2 질산이 휘산되어 내용물이 거의 건고될 때까지 가열하고 질산용액(1→2) 10 mL와 70% 과염소산 10 mL를 가하여 가열을 조절하면서 서서히 가열시킨다.

4.1.2.1.3 고형물이 완전히 용해되고 액이 거의 무색이 될 때까지 가열을 계속하여 분해한다. 만약, 액이 착색되어 있으면, 70% 과염소산 수 mL를 가하여 가열한다.

4.1.2.1.4 분해 후 냉각하고 소량의 물로 희석한 후 직경이 9 cm의 자제증발접시에 액을 씻어 옮기고 증발 건고하여 과염소산을 증발시킨다.

4.1.2.1.5 잔류물에 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가하고 동량의 물로 희석시켜 수욕 상에서 가온하여 완전히 녹인 후 100 mL 메스플라스크에 옮겨 0.5N 질산용액을 가하여 전량을 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

4.2.1 시험용액을 칼륨 농도 1∼10 μg/mL되게 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1 중 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

Ⅲ.3.2.6.2 칼륨(제2법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온산의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.21 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량 검출기(Inductively Coupled Plasma mass spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Potassium

분자식 : K, 분자량 : 39.10, CAS No. : 7440-09-7

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric Acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.6.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 및 공시험용액을 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.건강기능식품 시험법 중 “Ⅲ.3.5.4. 콜레스테롤”을 다음과 같이 한다.

1. 시험방법의 요약

검체 중 지질을 고온에서 수산화칼륨 에탄올 용액으로 비누화한다. 콜레스테롤을 톨루엔으로 추출하고 트리메틸실릴(TMS) 에테르화하여 유도체화 한 다음 이를 기체크로마토그래피로 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 원심분리관 : 15 mL, Pyrex No. 13.

※ 유도체화를 위해서 원심분리관을 실란화하여 사용한다. 이를 위해 원심분리관에 10% 불산을 채운 후 10분간 정치하고 증류수로 완전히 씻어준 후, 무수 에탄올로 다시 세척한 다음 질소 하에서 시험관을 건조한다. 10% 헥사메틸디실란(HMDS) 톨루엔 용액으로 원심분리관을 채워 1시간 정치한다. 이를 톨루엔으로 완전히 씻어준 후, 무수 에탄올로 다시 세척하고 사용 전에 100℃ 오븐에 건조하여 사용한다. 강 알칼리로 시험관을 세척한 것이 아니라면 실란화를 다시 하지 않고 시험관을 다시 사용할 수 있으나 적어도 6개월에 한번은 실란화하여 사용한다.

2.1.2 감압 농축기

2.1.3 자석교반-가열기

2.1.4 교반기(Vortex mixer)

2.1.5 분석저울 : 0.0001 g까지 측정이 가능한 것

2.1.6 초자기구 : 삼각플라스크(125 mL, 250 mL), 용량 플라스크, 피펫, 매스실린더, 분획여두(500 mL)

2.2 분석장비

2.2.1 기체크로마토그래프/불꽃이온화검출기(GC-FID)

2.2.2 칼럼 : HP-5(25m × 0.32mm × 0.17μm 또는 이와 동등 제품(5%-phenyl-methyl polysiloxane)

2.3 분석장비의 준비

분석시작 전에 주입부 및 검출기 온도, 유량, 칼럼 온도를 분석조건에 맞게 조작하고, 가스크로마토그래프를 충분히 안정화 시킨다.

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 콜레스테롤(Cholesterol)

분자식 : C27H46O, 분자량 : 386.65, CAS No. : 57-88-5

3.2 내부표준물질

3.2.1 5α-콜레스탄(5α-Cholestane)

3.3 일반시약

3.3.1 디메틸포름아미드(Dimethyl formamide, DMF) : 기체크로마토그래피용

3.3.2 헥사메틸디실란(Hexamethyldisilane, HMDS)

3.3.3 수산화칼륨

3.3.4 트리메틸클로로실란(TMCS) : Pierce Chemical사 No. 88531 또는 이와 동등한 것

3.3.5 톨루엔 : 잔류농약급 또는 이와 동등한 것

3.3.6 무수황산나트륨

3.3.7 유리솜

3.4 시액의 조제

3.4.1 5α-콜레스탄 내부표준물질용액

0.1 mg/mL, 5α-콜레스탄 10 mg을 n-헵탄에 녹여 100 mL로 한다.

3.4.2 수산화칼륨 용액

3.4.2.1 50%(w/w) : 500 g 수산화칼륨을 500 g 증류수에 녹여 조제한다.

3.4.2.2 1M : 56 g 수산화칼륨을 증류수 1 L에 녹여 조제한다.

3.4.2.3 0.5M : 1M 수산화칼륨 용액을 증류수로 희석하여 조제한다.

4. 시험과정

4.1 표준용액의 조제

4.1.1 표준물질 콜레스테롤 20 mg을 정밀하게 달아 DMF 10 mL에 녹여 표준원액으로 한다.

4.1.2 표준원액을 DMF로 희석하여 0.0025 ∼ 0.2 mg/mL 범위에서 6개 농도로 표준용액을 조제한다(0.0025, 0.005, 0.01, 0.05, 0.1, 0.2 mg/mL로 조제한다)

4.2 시험용액의 조제

4.2.1 비누화 과정

4.2.1.1 검체 약 2 g을 정밀히 달아 삼각플라스크에 취하여 자석막대를 삼각플라스크에 넣고 95% 에탄올 40 mL과 50% 수산화칼륨용액 8 mL을 가한다(95% 에탄올 40 mL 중 일정량을 50% 수산화칼륨용액 첨가 후 잔류물 세척에 사용하여 플라스크와 콘덴서가 같이 붙어서 떨어지지 않는 것을 방지할 수 있다.)

4.2.1.2 콘덴서를 설치하고 자석교반-가열기를 이용하여 교반하면서 가열하여 70±10분간 환류 시킨다. 비누화를 위해 시료를 지속적으로 관찰하면서 덩어리가 생길 경우 유리봉으로 분산시키거나 교반하면서 50% 수산화칼륨용액을 추가하여 시험용액을 교반한다.

4.2.1.3 환류가 완료되면 가열기를 끄고 교반 중에 콘덴서의 상부를 통해 95% 에탄올 60 mL을 조심하여 첨가하고 15분간 방치한다.

4.2.1.4 콘덴서를 플라스크에서 제거하고 플라스크에 마개를 막아 실온으로 냉각시킨 후 24시간 동안 시험용액을 안정화한다.

4.2.2 추출

4.2.2.1 비누화가 끝난 시험용액을 교반하면서 톨루엔 100 mL을 첨가하고 마개를 하여 30초 이상 교반한다.

4.2.2.2 이를 세척과정 없이 500 mL 분액여두로 옮기고 1M 수산화칼륨용액 110 mL을 넣고 10초간 강렬하게 진탕하여 정치하고 분리된 아래층을 버린다.

4.2.2.3 0.5M 수산화칼륨용액 40 mL을 분액여두에 넣고 분액여두를 뒤집은 후 천천히 내용물이 소용돌이가 생기도록 10초간 섞어준 후 정치하여 분리된 아래층을 버린다.

4.2.2.4 톨루엔 층을 증류수 40 mL로 천천히 분액여두를 돌려주며 수세한 후 정치하여 분리된 아래층을 버리고 수세과정을 3회 이상 반복한다. 이 때 수세과정이 반복될수록 더욱 강렬하게 진탕하며, 만약 에멀젼이 발생하면 소량의 95% 알코올을 첨가하여 분액여두의 내용물이 회오리가 생기도록 섞어준 후 정치하여 층을 분리한다. 톨루엔 층이 맑게 보일 때까지 수세과정을 계속한다.

4.2.2.5 유리솜과 약 20 g의 무수황산나트륨이 채워진 유리깔대기를 통해 수세한 톨루엔을 약 2 g 무수황산나트륨이 채워진 삼각플라스크로 흘려주어 탈수한다.

4.2.2.6 삼각플라스크에 마개를 막고 교반하여 혼합한 후 15분 이상 정치한다. 이 때 마개의 막음상태가 완벽하더라도 24시간 이상 방치하여서는 안된다.

4.2.2.7 추출한 톨루엔 층 25 mL을 바닥이 평평한 125 mL 둥근 플라스크에 취하고 이를 40±3℃에서 감압 농축하여 건고하고 잔류물에 아세톤 약 3 mL을 가한 후 다시 감압 농축하여 완전 건고한다.

4.2.2.8 잔류물을 3 mL DMF에 녹여 시험용액으로 한다. 이 때 시험용액의 농도는 콜레스테롤 표준용액의 농도범위 안에 있어야 한다(만약 검체의 콜레스테롤 함량이 적거나 없는 경우 남아있는 75 mL 톨루엔 추출액을 감압농축하여 건고하고 2 mL DMF에 다시 녹여 시험용액을 다시 조제한다. 이 때 정량한계는 1 mg/100g이다).

4.2.3 유도체화

4.2.3.1 6개 농도의 콜레스테롤 표준용액 및 상기의 시험용액 1.0 mL을 15 mL 원심분리관에 각각 취하고 각 원심분리관에 HMDS 0.2 mL을 가한 후  TMCS 0.1 mL을 가하여 마개를 닫고 이를 강렬하게 30초간 교반하거나 손으로 흔들어 혼합하고 15분간 정치한다.

4.2.3.2 각각의 원심분리관에 5α-콜레스탄 내부표준용액 1.0 mL과 증류수 10 mL을 넣은 후 마개를 닫고 30초간 강렬하게 교반하고 이를 3000 rpm에서 2분간 원심분리한다.

4.2.3.3. 상층의 헵탄 층을 취하여 기체크로마토그래피 측정용 시험용액으로 한다. 이때 유도체화 된 표준용액과 시험용액은 24시간 내에 분석한다.

5. 분석 및 계산

5.1 기기분석

표1. 가스크로마토그래프 조건(예)

항목	조건
주입부 온도	250℃
칼럼 온도	190℃(2분)-20℃/분-230℃(3분)-40℃/분 -255℃(25분)
검출기 온도	300℃
캐리어 가스 및 유량	헬륨, 2.0 mL/분

5.2 결과 분석

5.2.1 검량선의 작성

유도체화한 6개의 콜레스테롤 표준용액을 1 μL 각각 주입하여 얻어진 크로마토그램상의 콜레스테롤 피크면적을 5α-콜레스탄 피크면적으로 나눈 값(Y축)과 콜레스테롤 농도(mg/mL, X축)로 검량선을 작성한다. 이 때 시험용액의 농도에 따라 0.01 ∼ 0.2 mg/mL 범위의 고농도 콜레스테롤 표준용액 4개를 이용하여 검량선을 작성하거나 0.0025 ∼ 0.05 mg/mL 범위의 저농도 콜레스테롤 표준용액 4개를 이용하여 검량선을 작성할 수 있다.

5.2.2 표준품의 크로마토그램

분석에 사용한 칼럼 특성에 따라 5α-콜레스탄과 콜레스테롤이 각각 11 ∼ 13분 및 16 ∼ 18분에 용출되도록 유속 및 오븐온도를 조정한다.

5.2.3 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

5.2.4 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크면적법에 따라 정량한다.

5.3 계산

5.3.1 콜레스테롤 함량(mg/100g) = C × (V3 × 100)/(W × V2/V1)

C : 검량선에서 구한 시험용액의 농도(mg/mL)

W : 검체 채취량(g)

V1 : 추출에 사용한 톨루엔의 양(100 mL)

V2 : 농축에 사용된 톨루엔 추출액의 양(25 mL)

V3 : 유도체화 전 잔사를 녹이는 데 사용한 DMF의 양(3 mL)

부  칙

제1조(시행일) 이 고시는 고시한 날로부터 시행한다. 다만, Ⅱ. 개별기준 및 규격 중 Ⅱ.2.2.6 구아바잎 추출물, Ⅱ.2.2.7 바나바잎 추출물, Ⅱ.2.2.8 은행잎 추출물, Ⅱ.2.2.9 밀크씨슬(카르두스 마리아누스)추출물, Ⅱ.2.2.10 달맞이꽃종자 추출물, Ⅱ.2.3.14 포스파티딜세린, Ⅱ.2.6.2 테아닌, Ⅱ.2.7.1 디메틸설폰(Methyl sulfonylmethane, MSM)은 2013년 1월 1일부터 시행한다.

제2조(적용례) 총칙 5.의 1)중 기능성 원료별 기준 및 규격의 추가 등재를 위한 기한 연장(3년)개정사항은 이 고시 시행일 이후 접수된 것부터 적용한다.

제3조(경과조치) ① 이 고시 시행 이전에 「건강기능식품에 관한 법률」 제15조제2항에 따라 인정받은 기능성 원료 인정서는 고시 시행일 이전까지만 유효하며, 종전의 규정에 따라 수입 또는 제조한 제품(원료 포함)은 해당 제품의 유통기한까지 판매할 수 있다.

② Ⅱ. 개별기준 및 규격의 Ⅱ.2 기능성 원료의 기능성 내용 개정사항은 2012년 12월 31일까지 종전의 규정에 따를 수 있다.

제4조(재검토기한) 「훈령․예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정」(대통령훈령 제248호)에 따라 이 고시 발령 후의 법령이나 현실여건의 변화 등을 검토하여 이 고시를 폐지하거나 개정 등의 조치를 하여야 하는 기한은 2014년 6월 14일까지로 한다.

별  지

[표1] 건강기능식품의 기준 및 규격 절차

						<적용해야할 규격>
1. 공통규격 중 제형별 규격 적용		캡슐, 정제, 환, 과립인 경우1)			→	∘붕해도
		액상인 경우2)			→	∘세균수
↓
2. 비타민․무기질 표시량 규격 적용 ※Ⅱ. 개별 기준 및 규격에서 정한 최소함량기준 이상으로 첨가된 경우					→	∘영양소 함량
↓
3. “Ⅱ. 개별 기준 및 규격” 중 2) 규격 적용 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」에 의해 인정받은 규격 적용(기능성분(또는 지표성분)은 표시량의 80~120%를 적용. 다만, 별도로 인정된 기능성분(또는 지표성분)은 기능성 원료 인정서에 따른다.)					→	∘성상
						∘기능성분(또는 지표성분) 함량
						∘중금속
						∘잔류용매
						∘대장균군
						∘기타(곰팡이독소 등)
↓
4. 기타(보존방법 등)					→	∘세균발육(통․병조림류 및 레토르트류)

1) 씹어먹는 것 또는 녹여 먹는 것, 35호체에 잔류하는 것이 5% 이하인 과립제품은 제외함

2) 프로바이오틱스를 기능성 원료로 사용한 경우에는 제외함

신․구조문대비표

현  행

개 정 안

총칙

1.～3. (생  략)

4. 기능성 원료의 안전성․기능성 평가 및 기준․규격 설정 방법

이 공전에 등재된 기능성 원료의 안전성․기능성 평가와 기준․규격의 설정방법은 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」을 따른다.

5. 기능성 원료별 기준 및 규격의 추가 등재

「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」에 따라 인정된 기능성 원료는 다음 각 호의 어느 하나를 충족하면 이 공전 Ⅱ.개별 기준 및 규격에 추가로 등재할 수 있다. 다만 당해 영업자가 자료의 보호가 필요하다고 요청한 경우 그 타당성을 검토하여 기능성 원료로 인정받은 후 품목제조신고 또는 수입신고한 날로부터 추가등재를 5년 이내에서 유예할 수 있다.

1) 건강기능식품의 기능성 원료로 인정받은 후 품목제조신고 또는 수입신고한 날로부터 2년이 경과하였거나 3개 이상의 영업자가 인정받은 후 품목제조신고 또는 수입신고한 경우

2) (생  략)

6. (생  략)

총칙

1.～3. (현행과 같음)

4. 기능성 원료의 안전성․기능성 평가 및 기준․규격 설정 방법

------------------------------------------------------------------- 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」을 ----------.

5. 기능성 원료별 기준 및 규격의 추가 등재

「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」에 -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

1) ------------------------------------------------------------------- 3년이 ---------------------------------------------------------------------

2) (현행과 같음)

6. (현행과 같음)

Ⅰ.공통기준 및 규격

Ⅰ.1 건강기능식품의 제조에 사용되는 원료는 다음과 같다.

1) 기능성 원료

(1) (생  략)

(2) 기능성 원료의 범위는 다음과 같다.

(가) (생  략)

(나) 「건강기능식품에 관한 법률」 제15조와 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」에 따라 인정된 것. 다만 이 경우는 인정서가 발급된 영업자에 한하여 사용할 수 있음.

2)～4) (생  략)

Ⅰ.공통기준 및 규격

Ⅰ.1 건강기능식품의 제조에 사용되는 원료는 다음과 같다.

1) 기능성 원료

(1) (현행과 같음)

(2) 기능성 원료의 범위는 다음과 같다.

(가) (현행과 같음)

(나) -------------------------------- 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」에 --------------------------------------------------------.

2)～4) (현행과 같음)

Ⅰ.1-1 건강기능식품 제조에 사용할 수 없는 원료는 다음 어느 하나와 같다.

1)～2) (생  략)

Ⅰ.1-1 건강기능식품 제조에 사용할 수 없는 원료는 다음 어느 하나와 같다.

1)～2) (현행과 같음)

Ⅰ.2 공통제조기준

1) 이 규정에 따른 건강기능식품은 ------------------ 추출, 정제, 발효 등의 제조ㆍ가공을 하여서는 아니 된다.

일반 식품 또는 식사를 대신할 수 있는 식품유형은 「건강기능식품 기준 및 규격 인정에 관한 규정」에 따라 식품의약품안전청장의 인정을 받아야 한다.

2) (생  략)

3) 건강기능식품은 기능성 원료를 섭취하기 위한 목적으로 제조되어야 하며 기능성 원료의 사용기준은 다음과 같다.

(1) 기능성 원료는 이 공전 Ⅱ. 개별 기준 및 규격 또는 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」에서 정한 제조기준 및 규격에 적합한 것을 사용하여야 한다.

(2)～(4) (생  략)

4)～5) (생  략)

6) 기능성 원료의 추출에 사용되는 용매는 이 공전 Ⅱ. 개별 기준 및 규격 또는 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」의 사용기준에 따르며, 그 추출용매는 「식품첨가물의 기준 및 규격」에 적합한 것을 사용하여야 한다.

7)～10) (생  략)

Ⅰ.2 공통제조기준

1) ------------------------------------------------------------------------------------------.

--------------------------- ------------ 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」에 ------------ ----------------.

2) (현행과 같음)

3) --------------------------- ---------------------------------------------------------------.

(1) -------------------------- --------------- 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」에서 -------- --------------------------.

(2)～(4) (현행과 같음)

4)～5) (현행과 같음)

6) --------------------------- ---------------------------------- 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」의 ------------------- -------------------------------------------------.

7)～10) (현행과 같음)

Ⅰ.3 공통규격

1) 제품의 형태에 관한 정의 및 이에 따른 규격은 다음과 같다.

(1) (생  략)

<신  설>

(2) (생  략)

(3) (생  략)

2) (생  략)

Ⅰ.3 공통규격

1) 제품의 형태에 관한 정의 및 이에 따른 규격은 다음과 같다.

(1) (현행과 같음)

(2) 붕해 특성에 따른 제품의 정의

(가) 장용성(Delayed release)제품이란 섭취 시 위(胃)의 산성조건에서 붕해되지 않고 장(腸)에서 붕해되는 특성을 가진 제품을 말함.

(3) (현행 (2)와 같음)

(4) (현행 (3)과 같음)

2) (현행과 같음)

Ⅰ.4 건강기능식품의 기준 및 규격 적용

1) 기능성 원료 및 이를 사용하여 제조․가공한 제품의 규격은 Ⅰ. 공통 기준 및 규격과 Ⅱ. 개별 기준 및 규격 또는 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」에 따라 인정된 기준 및 규격을 함께 적용하는 것을 원칙으로 한다. (표 1 참조)

2)～4) (생  략)

[표1] 건강기능식품의 기준 및 규격 적용절차

						<적용해야할 규격>
1. 공통규격 중 제형별 규격 적용		캡슐, 정제, 환, 과립인 경우1)			→	∘붕해도
		액상인 경우2)			→	∘세균수
↓
2. 비타민․무기질 표시량 규격 적용 ※Ⅱ. 개별 기준 및 규격에서 정한 최소함량기준 이상으로 첨가된 경우					→	∘영양소 함량
↓
3. “Ⅱ. 개별 기준 및 규격” 중 2) 규격 적용 「건강기능식품 기능성 원료 인정에 관한 규정」에 의해 인정받은 규격 적용 (기능성분(또는 지표성분)은 표시량의 80～120%를 적용 다만, 별도로 인정된 기능성분(또는 지표성분)은 기능성원료 인정서에 따른다)					→	∘성상
						∘기능성분(또는 지표성분) 함량
						∘중금속
						∘잔류용매
						∘대장균군
						∘기타(곰팡이독소 등)
↓
4. 기타(보존방법 등)					→	∘세균발육(통․병조림류 및 레토르트류)

1) 씹어먹는 것 또는 물에 녹여 먹는 것은 제외함

2) (생  략)

Ⅰ.4 건강기능식품의 기준 및 규격 적용

1) -------------------------------------------------------------------------------------------- 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」에 -----------------------------------------------------

2)～4) (현행과 같음)

[표1] 건강기능식품의 기준 및 규격 적용절차

						<적용해야할 규격>
--------------------------------------		------------------------			→	------
		----------			→	-------
↓
-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------					→	---------------
↓
-------------------------------- 「건강기능식품 기능성 원료 및 기준․규격 인정에 관한 규정」-------- -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------					→	---------
						---------------------------
						-------
						-------
						-------
						-------------------
↓
------------------					→	-----------------------------------------

1) 씹어먹는 것 또는 녹여 먹는 것, 35호체에 잔류하는 것이 5% 이하인 과립제품은 제외함

2) (현행과 같음)

Ⅰ.5～Ⅰ.7 (생  략)

Ⅰ.5～Ⅰ.7 (현행과 같음)

Ⅱ. 개별 기준 및 규격

Ⅱ.1 영양소

Ⅱ.1.1～Ⅱ.1.4 (생  략)

Ⅱ. 개별 기준 및 규격

Ⅱ.1 영양소

Ⅱ.1.1～Ⅱ.1.4 (현행과 같음)

Ⅱ.2 기능성 원료

Ⅱ.2.1 터핀류

Ⅱ.2.1.1 인삼

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 면역력 증진, 피로회복

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2 기능성 원료

Ⅱ.2.1 터핀류

Ⅱ.2.1.1 인삼

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 면역력 증진․피로개선에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.1.2 홍삼

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 면역력 증진, 피로회복, 혈소판 응집억제를 통한 혈액흐름에 도움, 기억력 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 면역력 증진, 피로회복 : 진세노사이드 Rg1과 Rb1의 합계로서 3～80 mg

(나) 혈소판 응집억제를 통한 혈액흐름에 도움, 기억력 개선에 도움을 줄 수 있음 : 진세노사이드 Rg1과 Rb1의 합계로서 2.4～80 mg

4) (생  략)

Ⅱ.2.1.2 홍삼

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 면역력 증진․피로개선․혈소판 응집억제를 통한 혈액흐름․기억력 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 면역력 증진․피로개선에 도움을 줄 수 있음 : ---------------------------------

(나) 혈소판 응집억제를 통한 혈액흐름․기억력 개선에 도움을 줄 수 있음 : -------------------------------------------

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.1.3 엽록소 함유 식물

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 피부건강에 도움, 항산화 작용

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.1.3 엽록소 함유 식물

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 피부건강․항산화에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.1.4 클로렐라

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 피부건강에 도움, 항산화 작용, 면역기능 증진에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 피부건강에 도움, 항산화 작용 : 총 엽록소로서 8～150 mg

(나) 면역기능 증진에 도움을 줄 수 있음 : 총 엽록소로서 125 mg

4) (생  략)

Ⅱ.2.1.4 클로렐라

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 피부건강․항산화․면역력 증진에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 피부건강․항산화에 도움을 줄 수 있음 : --------------------

(나) 면역력 ---------------------- : 총 엽록소로서 125～150 mg

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.1.5 스피루리나

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 피부건강에 도움, 항산화 작용, 혈중 콜레스테롤 수치 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 피부건강에 도움, 항산화 작용 : 총 엽록소로서 8～150 mg

(나) 혈중 콜레스테롤 수치개선에 도움을 줄 수 있음 : 총 엽록소로서 40～80 mg

4) (생  략)

Ⅱ.2.1.5 스피루리나

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 피부건강․항산화․혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 피부건강․항산화에 도움을 줄 수 있음 : --------------------

(나) 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음 : 총 엽록소로서 40～150 mg

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.2 페놀류

Ⅱ.2.2.1 녹차추출물

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 항산화 작용, 체지방 감소에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 항산화 작용 : 카테킨으로서 0.3 ～1 g

(나) 체지방 감소에 도움을 줄 수 있음 : 카테킨으로서 0.3～0.5 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.2 페놀류

Ⅱ.2.2.1 녹차추출물

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 항산화․체지방 감소에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

카테킨으로서 0.3～1 g

<삭  제>

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.2.2 알로에 전잎

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 배변활동 원활

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.2.2 알로에 전잎

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.2.3 프로폴리스추출물

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 항산화 작용, 구강에서의 항균작용

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.2.3 프로폴리스추출물

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ----------- : 항산화․구강에서의 항균작용에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.2.4 코엔자임Q10

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 항산화에 도움을 줄 수 있음, 혈압이 높은 사람에게 도움을 줄 수 있음

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.2.4 코엔자임Q10

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 항산화․높은 혈압 감소에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.2.5 대두이소플라본

1)～4) (생  략)

Ⅱ.2.2.5 대두이소플라본

1)～4) (현행과 같음)

<신  설>

Ⅱ.2.2.6 구아바잎 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 구아바(Psidium gujava)의 잎

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 열수 추출하고 여과, 농축하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 총 폴리페놀이 250～450 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 총 폴리페놀

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 0.5 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

총 폴리페놀로서 120 mg

<신  설>

Ⅱ.2.2.7 바나바잎 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 바나바(Lagerstroemia speciosa)의 잎

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 주정으로 추출하고 여과, 농축하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분) : 코로소린산(Corosolic acid)으로서 9～13 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 코로소린산

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

코로소린산으로서 0.45～1.3 mg

<신  설>

Ⅱ.2.2.8 은행잎 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 은행나무(Ginko biloba)의 잎

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 분쇄 후 주정으로 추출하고 정제, 농축, 여과하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 플라보놀 배당체(flavonol glycoside)가 240～300 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 플라보놀 배당체

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 깅콜릭산(ginkgolic acid)(mg/kg) : 5.0 이하

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 1.0 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 1.0 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 기억력 개선․혈행 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

플라보놀 배당체로서 28～36 mg

(3) 섭취 시 주의사항

임산부, 수유부, 어린이 및 수술전후 환자는 섭취에 주의

의약품(항응고제) 복용 시 섭취에 주의

<신  설>

Ⅱ.2.2.9 밀크씨슬(카르두스 마리아누스) 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 밀크씨슬(Silybum marianum)

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 그대로 주정 추출하거나 압착 또는 헥산으로 탈지하여 주정 추출한 후 여과, 농축, 정제하여 제조하여야 함. 정제과정 중 헥산 또는 초산에틸 사용 가능함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 실리마린(실리빈으로서)이 320～660 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 실리마린(실리빈으로서)

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 잔류용매 (해당 용매를 사용한 경우에 한함)

(가) 헥산(mg/kg) : 5.0 이하

(나) 초산에틸(mg/kg) : 50.0 이하

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 간 건강에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

실리마린으로서 130 mg

(3) 섭취 시 주의사항

알레르기 반응이 나타나는 경우에는 섭취 중단

설사, 위통, 복부팽만 등의 위장관계 장애가 나타나는 경우에는 섭취에 주의

<신  설>

Ⅱ.2.2.10 달맞이꽃종자 추출물

1) 제조기준

(1) 원재료 : 달맞이꽃(Oenothera biennis)의 종자

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 압착 또는 헥산으로 탈지하고 주정으로 추출한 후 여과, 농축하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : PGG(Penta-O-galloyl beta-D-glucose)가 20-28 mg/g 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) PGG

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 헥산(mg/kg) 5.0 이하 (사용한 경우에 한함)

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

PGG로서 4～8.4 mg

Ⅱ.2.3 지방산 및 지질류

Ⅱ.2.3.1 오메가-3 지방산 함유 유지

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 혈중 중성지질 개선, 혈행개선

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3 지방산 및 지질류

Ⅱ.2.3.1 오메가-3 지방산 함유 유지

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 혈중 중성지질 개선․ 혈행개선에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.2 감마리놀렌산 함유 유지

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 혈행개선

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3.2 감마리놀렌산 함유 유지

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선․혈행개선에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.3 레시틴

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3.3 레시틴

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.4 스쿠알렌

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 항산화 작용

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3.4 스쿠알렌

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ----------- : 항산화에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.5 식물스테롤/식물스테롤에스테르

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3.5 식물스테롤/식물스테롤에스테르

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.6 알콕시글리세롤 함유 상어간유

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 면역력 증진

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3.6 알콕시글리세롤 함유 상어간유

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 면역력 증진에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.7 옥타코사놀 함유 유지

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 지구력 증진

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3.7 옥타코사놀 함유 유지

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 지구력 증진에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.8 매실추출물

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 피로개선

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.3.8 매실추출물

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 피로개선에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.3.9～Ⅱ.2.3.13 (생  략)

Ⅱ.2.3.9～Ⅱ.2.3.13 (현행과 같음)

<신  설>

Ⅱ.2.3.14 포스파티딜세린

1) 제조기준

(1) 원재료 : 대두 레시틴

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료를 L-세린(serine)과 효소(phopholiphase)반응하여 물, 주정, 아세톤 또는 헥산으로 추출하고 정제하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 포스파티딜세린이 380 mg/g 이상 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 포스파티딜세린

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 잔류용매 (해당 용매를 사용한 경우에 한함)

(가) 헥산(mg/kg) : 5.0 이하

(나) 아세톤(mg/kg) : 10.0 이하

(4) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 1.0 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 1.0 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(5) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 노화로 인해 저하된 인지력 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

포스파티딜세린으로서 300 mg

(3) 섭취 시 주의사항

임산부와 수유부는 섭취에 주의

과잉섭취 시 위장장애나 불면증을 유발할 수 있음

Ⅱ.2.4 당 및 탄수화물류

Ⅱ.2.4.1 글루코사민

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 관절 및 연골 건강에 도움

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4 당 및 탄수화물류

Ⅱ.2.4.1 글루코사민

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 관절 및 연골 건강에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.2 N-아세틸글루코사민

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 관절 및 연골 건강에 도움, 피부보습에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 관절 및 연골건강에 도움 : N-아세틸글루코사민으로서 0.5～1 g

(나) (생  략)

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.2 N-아세틸글루코사민

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 관절 및 연골 건강․피부보습에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 관절 및 연골건강에 도움을 줄 수 있음 : ---------------------------------

(나) (현행과 같음)

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.3 뮤코다당․단백

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 관절 및 연골건강에 도움

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.3 뮤코다당․단백

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 관절 및 연골건강에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4 식이섬유

Ⅱ.2.4.4.1 구아검/구아검가수분해물

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제, 배변활동 원활, 장내 유익균 증식에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 콜레스테롤 개선 : 구아검/구아검 가수분해물 식이섬유로서 9.9～27 g

(나) 식후혈당상승억제 : 구아검/구아검 가수분해물 식이섬유로서 9.9～27 g

(다) 배변활동 원활 : 구아검/구아검 가수분해물 식이섬유로서 9.9～27 g

(라) 장내 유익균 증식에 도움을 줄 수 있음 : 구아검/구아검가수분해물로서 4.6～21 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4 식이섬유

Ⅱ.2.4.4.1 구아검/구아검가수분해물

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․장내 유익균 증식․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 구아검/구아검가수분해물 식이섬유로서 9.9～27 g

<삭  제>

<삭  제>

(나) -------------------------------------------------------- 4.6～27 g

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.2 글루코만난(곤약, 곤약만난)

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 배변활동 원활

(2) 일일섭취량

(가) 콜레스테롤 개선 : 글루코만난 식이섬유로서 2.7～17 g

(나) 배변활동 원활 : 글루코만난 식이섬유로서 2.7～17 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.2 글루코만난(곤약, 곤약만난)

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ----------- : 혈중 콜레스테롤 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

글루코만난 식이섬유로서 2.7～17 g

<삭  제>

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.3 귀리

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제

(2) 일일섭취량

(가) 콜레스테롤 개선 : 귀리식이섬유로서 3 g 이상

(나) 식후혈당상승억제 : 귀리식이섬유로서 0.8～8 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.3 귀리

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음 : ------------------------

(나) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 : 귀리식이섬유로서 0.8 g 이상

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.4 난소화성말토덱스트린

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후혈당상승억제, 배변활동 원활, 혈중 중성지질 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 식후혈당상승억제 : 난소화성말토덱스트린 식이섬유로서 11.9～29 g (액상원료는 11.6～43 g)

(나) 배변활동 원활 : 난소화성말토텍스트린 식이섬유로서 2.5～29 g (액상원료는 2.3～43 g)

(다) (생  략)

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.4 난소화성말토덱스트린

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후 혈당상승 억제․혈중 중성지질 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 : 난소화성말토덱스트린 식이섬유로서 11.9～30 g (액상원료는 11.6～44 g)

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 난소화성말토덱스트린 식이섬유로서 2.5～30 g (액상원료는 2.3～44 g)

(다) (현행과 같음)

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.5 대두식이섬유

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제, 배변활동 원활

(2) 일일섭취량

(가) 콜레스테롤 개선 : 대두식이섬유로서 20～25 g

(나) 식후혈당상승억제 : 대두식이섬유로서 10～25 g

(다) 배변활동 원활 : 대두식이섬유로서 20～60 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.5 대두식이섬유

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ----------- : 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 대두식이섬유로서 20～60 g

(나) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 : 대두식이섬유로서 10～60 g

<삭  제>

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.6 목이버섯

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 배변활동 원활

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.6 목이버섯

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.7 밀식이섬유

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후혈당상승억제, 배변활동 원활

(2) 일일섭취량

(가) 식후혈당상승억제 : 밀식이섬유로서 6～12 g

(나) 배변활동 원활 : 밀식이섬유로서 36 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.7 밀식이섬유

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음: 밀식이섬유로서 6～36 g

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : ---------------

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.8 보리식이섬유

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 배변활동 원활

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.8 보리식이섬유

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.9 아라비아검(아카시아검)

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 배변활동 원활

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.9 아라비아검(아카시아검)

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.10 옥수수겨

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.10 옥수수겨

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ----------- : 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.11 이눌린/치커리추출물

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 식후혈당상승억제, 배변활동 원활

(2) 일일섭취량

(가) 콜레스테롤 개선 : 이눌린/치커리추출물 식이섬유로서 7.2～10 g

(나) 식후혈당상승억제 : 이눌린/치커리추출물 식이섬유로서 7.2～10 g

(다) 배변활동 원활 : 이눌린/치커리추출물 식이섬유로서 6.4～20 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.11 이눌린/치커리추출물

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선․식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음 :  이눌린/치커리추출물 식이섬유로서 7.2～20 g

<삭  제>

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : --------------------------------

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.12 차전자피

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선, 배변활동 원활

(2) 일일섭취량

(가) 콜레스테롤 개선 : 차전자피 식이섬유로서 5.5 g 이상

(나) 배변활동 원활 : 차전자피 식이섬유로서 3.9～25 g

(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.12 차전자피

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

(가) 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음 : -----------------------

(나) 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음 : 차전자피 식이섬유로서 3.9 g 이상

(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.13 폴리덱스트로스

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 배변활동 원활

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.13 폴리덱스트로스

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.4.14 호로파종자

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 식후혈당상승억제

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.4.14 호로파종자

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 식후 혈당상승 억제에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.5 알로에 겔

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 피부건강에 도움, 장 건강에 도움, 면역력 증진

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.5 알로에 겔

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 피부건강․장 건강․면역력 증진에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.6 영지버섯 자실체 추출물

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 혈행개선

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.6 영지버섯 자실체 추출물

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ----------- : 혈행개선에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.7 키토산/키토올리고당

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.7 키토산/키토올리고당

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.4.8 프락토올리고당

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 유익균 증식, 유해균 억제, 배변활동 원활, 칼슘 흡수에 도움

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.4.8 프락토올리고당

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 유익균 증식 및 유해균 억제․칼슘 흡수․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.5 발효미생물류

Ⅱ.2.5.1 프로바이오틱스

1) 제조기준

(1) 원재료 : 다음의 미생물 또는 이를 혼합한 균과 균 또는 배양체를 배양시키기 위한 배지 및 보호제

	종 류
(생 략)	(생 략)
(생 략)	(생 략)
(생 략)	(생 략)
(생 략)	(생 략)
Bifidobacterium	B.bifidum, B.breve, B.longum, B.animalis spp. lactis

2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 유익한 유산균 증식, 유해균 억제 또는 배변활동 원활

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.5 발효미생물류

Ⅱ.2.5.1 프로바이오틱스

1) 제조기준

(1) ------ : ------------------------------------------------------------------------

	종 류
(현행과 같음)	(현행과 같음)
(현행과 같음)	(현행과 같음)
(현행과 같음)	(현행과 같음)
(현행과 같음)	(현행과 같음)
-------------	---------------- ---------, B.animalis ssp. lactis

2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) --------- : 유산균 증식 및 유해균 억제․배변활동 원활에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.5.2 홍국

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선

(2) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.5.2 홍국

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음

(2) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

Ⅱ.2.6 아미노산 및 단백질류

Ⅱ.2.6.1 대두단백

1)～2) (생  략)

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 콜레스테롤 개선

(2)～(3) (생  략)

4) (생  략)

Ⅱ.2.6 아미노산 및 단백질류

Ⅱ.2.6.1 대두단백

1)～2) (현행과 같음)

3) 최종제품의 요건

(1) ---------- : 혈중 콜레스테롤 개선에 도움을 줄 수 있음

(2)～(3) (현행과 같음)

4) (현행과 같음)

<신  설>

Ⅱ.2.6.2 테아닌

1) 제조기준

(1) 원재료 : L-글루타민, 에칠아민

(2) 제조방법

(가) 상기 (1)의 원재료를 glutaminase 효소반응시켜 정제, 농축 후 주정으로 결정화하여 제조하여야 함

(나) 상기 (1)의 원재료를 화학적으로 합성하는 경우 식품첨가물의 기준 및 규격에 적합하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : L-테아닌이 940 mg/g 이상 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) L-테아닌

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 최종제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 1.0 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.5 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 1.0 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 스트레스로 인한 긴장완화에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

L-테아닌으로서 200～250 mg

(3) 섭취 시 주의사항

카페인 함유음료(커피, 홍차, 녹차 등)와의 병용 섭취에 주의

임산부, 수유부, 어린이 및 수술전후 환자는 섭취에 주의

<신  설>

<신  설>

Ⅱ.2.7 기타류

Ⅱ.2.7.1 디메틸설폰(Methyl sulfonylmethane, MSM)

1) 제조기준

(1) 원재료 : 식품원료로 사용 가능한 식물류의 리그닌

(2) 제조방법 : 상기 (1)의 원재료에서 생성된 DMSO(Dimethyl sulfoxide)를 산화한 후 증류, 정제, 여과, 농축한 후 결정화하여 제조하여야 함

(3) 기능성분(또는 지표성분)의 함량 : 디메틸설폰(MSM)이 980 mg/g 이상 함유되어 있어야 함

2) 규격

(1) 성상 : 고유의 색택과 향미를 가지며 이미․이취가 없어야 함

(2) 디메틸설폰(MSM)

(가) 원료성 제품 : 표시량 이상

(나) 원료제품 : 표시량의 80～120%

(3) 중금속

(가) 납(mg/kg) : 0.1 이하

(나) 카드뮴(mg/kg) : 0.1 이하

(다) 총수은(mg/kg) : 0.5 이하

(라) 총비소(mg/kg) : 0.1 이하

(4) 대장균군 : 음성

3) 최종제품의 요건

(1) 기능성 내용 : 관절 및 연골건강에 도움을 줄 수 있음

(2) 일일섭취량

디메틸설폰(MSM)으로서 1.5～2.0 g

Ⅲ. 건강기능식품 시험법

Ⅲ.1 (생  략)

Ⅲ.2 (생  략)

Ⅲ. 건강기능식품 시험법

Ⅲ.1 (현행과 같음)

Ⅲ.2 (현행과 같음)

Ⅲ.3 개별 성분별 시험법

Ⅲ.3.1 (생  략)

Ⅲ.3 개별 성분별 시험법

Ⅲ.3.1 (현행과 같음)

Ⅲ.3.2 무기질

Ⅲ.3.2.1 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬

Ⅲ.3.2.1.1 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬(제1법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴을 건식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다. 이는 시험용액 중의 금속원소를 적당한 방법으로 해리시켜 원자 증기화하여 생성한 기저상태의 원자가 그 원자증기를 통과하는 빛으로부터 측정파장의 빛을 흡수하는 현상을 이용하여 광전측정 등에 따라 목적원소의 특정파장에 있어서 흡광도를 측정하고 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다. 시료를 원자화하는 일반적인 방법은 화염방식과 무염방식이 있다.

2. (생  략)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 (생  략)

3.2 일반시약

3.2.1～3.2.2 (생  략)

<신  설>

3.2.3 (생  략)

<신  설>

<신  설>

3.2.4 (생  략)

3.2.5 (생  략)

3.2.6 (생  략)

<신  설>

<신  설>

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조(건식분해법)

<신  설>

4.1.1 (생  략)

4.1.2 (생  략)

4.1.3 (생  략)

4.1.4 염산 1～2 mL 또는 각 시험법에서 지정한 용매(원자흡광광도법에 의한 직접법의 경우 Sn은 1 N 염산, 그 밖의 금속은 0.5 N 질산)를 가하여 가온해서 녹이고 불용물이 있으면 석면 또는 유리여과기로 여과한 다음 일정량으로 하여 시험용액으로 한다. 다만, 회화보조제로서 염산, 산화마그네슘, 탄산나트륨 등을 사용해도 좋으나 Sn의 시험에 있어서는 질산염 또는 질산을 사용해서는 아니되며, 그 밖의 금속의 경우에도 시험조작에 영향이 없을 때에만 사용하되 공시험 용액에 대해서도 같은 조작을 하여 시험용액을 보정한다. 여기에 증류수 10 mL을 가하고 10분간 교반 후 원심분리(3,000 rpm, 10min)한다.

<신  설>

4.2 시험조작

4.2.1 제1법 직접법

4.2.1.1～4.2.1.2 (생  략)

4.2.2 제2법 용매추출물

4.2.2.1 시험용액 및 공시험용액을 각각 10～50 mL 취한다.

4.2.2.2～4.2.2.5 (생  략)

Ⅲ3.2 무기질

Ⅲ.3.2.1 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬

Ⅲ.3.2.1.1 ---------------------------------(제1법 원자흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ 특정 파장에서의 ----------------------------------------- 농도를 구하는 방법이다.

2. (현행과 같음)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 (현행과 같음)

3.2 일반시약

3.2.1～3.2.2 (현행과 같음)

3.2.3 황산(Sulfuric acid)

3.2.4 (현행 3.2.3과 같음)

3.2.5 수산화암모늄용액(Ammonium hydroxide liquid)

3.2.6 구연산암모늄용액(Ammonium citrate liquid)

3.2.7 (현행 3.2.4와 같음)

3.2.8 (현행 3.2.5와 같음)

3.2.9 (현행 3.2.6과 같음)

3.2.10 DDTC(Diethyl dithiocarbamic acid)

3.2.11 MIBK(Methyl iso-butyl ketone)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1 (현행 4.1.1과 같음)

4.1.1.2 (현행 4.1.2와 같음)

4.1.1.3 (현행 4.1.3과 같음)

4.1.1.4 염산 1～2 mL 또는 0.5 N 질산을 가하여 가온해서 녹이고 ---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 시험조작에 영향이 없을 때에만 사용하되 공시험용액에 대해서도 같은 조작을 하여 시험용액을 보정한다.

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 황산-질산법

4.1.2.1.1 시료(건조물로서 5～20 g에 상당하는 양)를 분해플라스크에 취하여 물 50～70 mL, 질산 10～40 mL를 넣고 혼합하여 방치한다.

4.1.2.1.2 시험액을 조용히 가열하여 격렬한 반응이 그치면 식힌 다음 황산 5～20 mL를 넣고 다시 서서히 가열한다.

4.1.2.1.3 내용물이 암색이 되기 시작하면 질산 2～3 mL을 추가하면서 가열을 계속하여 내용물이 미황색～무색이 되었을 때 분해가 끝난 것으로 한다.

4.1.2.1.4 분해액을 식힌 후 물 30～50 mL, 포화수산암모늄용액 10～25 mL를 가해서 황산의 흰 연기가 발생할 때가지 가열하고 식힌 다음 물로 일정량으로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.1.5 공시험용액에 대해서도 같은 조작을 하여 시험용액을 보정한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

4.2.1 직접법

4.2.1.1～4.2.1.2 (현행과 같음)

4.2.2 용매추출물

4.2.2.1 --------------------------------- 취한다.(질산으로 pH 4.0 조정)

4.2.2.2～4.2.2.5 (현행과 같음)

Ⅲ.3.2.1.2 구리, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 셀렌, 크롬(제2법)

1. (생  략)

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 (생  략)

<신  설>

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 각 표준물질

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

4. (생  략)

Ⅲ.3.2.1.2 -----------------------------(제2법 유도결합플라즈마법)

1. (현행과 같음)

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 (현행과 같음)

2.1.2 유도결합플라즈마 질량검출기(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Copper

분자식 : Cu, 분자량 : 63.55, CAS No. : 7440-50-8

3.1.2 Magnesium

분자식 : Mg, 분자량 : 24.31, CAS No. : 7439-95-4

3.1.3 Maganese

분자식 : Mn, 분자량 : 54.94, CAS No. : 7439-96-5

3.1.4 Molybdenum

분자식 : Mo, 분자량 : 95.94, CAS No. : 7439-98-7

3.1.5 Selenium

분자식 : Se, 분자량 : 78.96, CAS No. : 7782-49-2

3.1.6 Chromium

분자식 : Cr, 분자량 : 52.00, CAS No. : 7440-47-3

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. (현행과 같음)

Ⅲ.3.2.2 칼슘

<신  설>

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 칼슘을 건식․습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1～2.1.7 (생  략)

<신  설>

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계

3. (생  략)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 제1법 건식분해법

4.1.1.1～4.1.1.4 (생  략)

4.1.2 제2법 습식분해법

<신  설>

4.1.2.1 (생  략)

4.1.2.2 (생  략)

4.1.2.3 (생  략)

4.1.2.4 (생  략)

4.1.2.5 (생  략)

<신  설>

4.2 시험조작

4.2.1 제1법 과망간산칼륨 용량법

4.2.1.1 (생  략)

4.2.1.2 (생  략)

4.2.1.3 (생  략)

4.2.1.4 (생  략)

4.2.1.5 (생  략)

4.2.1.6 (생  략)

4.2.2 제2법 원자흡광광도법

4.2.2.1 시험용액의 조제에 따라 처리한 시료를 물 대신 1 N 염산용액을 사용하여 칼슘 농도 1～5 ㎍/mL가 되도록 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1(제1법)에 따라 측정한다.

4.2.2.2 사용될 1 N 염산용액에는 La으로서 1,000 ppm이 되도록 염화란탄(LaCl3)을 첨가하거나 또는 Sr으로서 5,000 ppm이 되도록 염화스트론티움(SrCl2)을 첨가하여 사용한다.

5. (생  략)

Ⅲ.3.2.2 칼슘

Ⅲ.3.2.2.1 칼슘(제1법 과망간산칼륨 용량법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 칼슘을 함유하는 용액에 수산염을 첨가하여 물에 난용성인 수산칼슘으로 침전시켜 침전물을 황산에 녹여 용액내 수산을 과망간산칼륨 용액으로 적정하여 정량하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1～2.1.7 (현행과 같음)

2.1.8 유리여과기(15AG-4)

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)

3. (현행과 같음)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1～4.1.1.4 (현행과 같음)

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 (현행 4.1.2.1과 같음)

4.1.2.1.2 (현행 4.1.2.2와 같음)

4.1.2.1.3 (현행 4.1.2.3과 같음)

4.1.2.1.4 (현행 4.1.2.4와 같음)

4.1.2.1.5 (현행 4.1.2.5와 같음)

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

<삭  제>

4.2.1 (현행 4.2.1.1과 같음)

4.2.2 (현행 4.2.1.2와 같음)

4.2.3 (현행 4.2.1.3과 같음)

4.2.4 (현행 4.2.1.4와 같음)

4.2.5 (현행 4.2.1.5와 같음)

4.2.6 (현행 4.2.1.6과 같음)

<삭  제>

5. (현행과 같음)

<신  설>

Ⅲ.3.2.2.2 칼슘(제2법 원자흡광광도법)

1. 시험방법

본 시험법은 시료 중 존재하는 칼슘을 건식 또는 습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Calcium

분자식 : Ca, 분자량 : 40.08, CAS No. : 7440-70-2

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

3.2.4 염화란탄(Lanthanum chloride, Lacl3) 또는 염화스트론티움(Strontium chloride, SrCl2)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.2.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 조제하고 1 N 염산용액을 사용하여 칼슘 농도 1～5 ㎍/mL가 되도록 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1원자흡광광도법에 따라 측정한다.

4.2 사용될 1 N 염산용액에는 La으로서 1,000 ppm이 되도록 염화란탄(LaCl3)을 첨가하거나 또는 Sr으로서 5,000 ppm이 되도록 염화스트론티움(SrCl2)을 첨가하여 사용한다.

<신  설>

Ⅲ.3.2.2.3 칼슘(제3법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온선의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량검출기(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Calcium

분자식 : Ca, 분자량 : 40.08, CAS No. : 7440-70-2

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.2.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 공시험용액을 포함하여 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.3.2.3 (생  략)

Ⅲ.3.2.3 (현행과 같음)

Ⅲ.3.2.4 철

<신  설>

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 철을 건식․습식으로 분해하여 올쏘 페난트로닌 비색법 또는 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 (생  략)

2.2 분석장비

2.2.1 흡광광도계

2.2.2 원자흡광광도계

3. (생  략)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 제1법 건식분해법

4.1.1.1～4.1.1.4 (생  략)

4.1.2 제2법 습식분해법

<신  설>

4.1.2.1 (생  략)

4.1.2.2 (생  략)

4.1.2.3 (생  략)

4.1.2.4 (생  략)

4.1.2.5 (생  략)

<신  설>

4.1.3 (생  략)

4.2 시험조작

4.2.1 제1법 올쏘 페난트로닌 비색법

4.2.1.1～4.2.1.7 (생  략)

4.2.2 제2법 원자흡광광도법

4.2.2.1 시험용액의 조제에 따라 처리한 시료를 물 대신 1 N 염산용액을 사용하여 철 농도 1～5 ㎍/mL가 되도록 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1(제1법)에 따라 측정한다.

5. (생  략)

Ⅲ.3.2.4 철

Ⅲ.3.2.4.1 철(제1법 올쏘 페난트로린 비색법)

1. 시험방법의 요약

-----------------------------건식 또는 습식으로 분해하여 올쏘 페난트로닌 비색법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 (현행과 같음)

2.2 분석장비

2.2.1 분광광도계(Spectrophotometer)

<삭  제>

3. (현행과 같음)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1～4.1.1.4 (현행과 같음)

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 (현행 4.1.2.1과 같음)

4.1.2.1.2 (현행 4.1.2.2와 같음)

4.1.2.1.3 (현행 4.1.2.3과 같음)

4.1.2.1.4 (현행 4.1.2.4와 같음)

4.1.2.1.5 (현행 4.1.2.5와 같음)

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.1.3 (현행과 같음)

4.2 시험조작

4.2.1 올쏘 페난트로닌 비색법

4.2.1.1～4.2.1.7 (현행과 같음)

<삭  제>

5. (현행과 같음)

<신  설>

Ⅲ.3.2.4.2 철(제2법 원자흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 철을 건식 또는 습식으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Iron

분자식 : Fe, 분자량 : 55.85, Cas No. : 7439-89-6

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.4.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 1 N 염산용액을 사용하여 철 농도 1～5 ㎍/mL가 되도록 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

<신  설>

Ⅲ.3.2.4.3 철(제3법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온선의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량검출기(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Iron

분자식 : Fe, 분자량 : 55.85, Cas No. : 7439-89-6

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.4.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 공시험용액을 포함하여 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.3.2.5 아연

<신  설>

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 아연을 건식법으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 (생  략)

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계

3. 표준물질 및 시약

3.1 표준물질

3.1.1 (생  략)

3.2 일반시약

3.2.1～3.2.3 (생  략)

3.2.4 BTB시액(Bromothymol blue)

3.2.5 황산암모늄용액(Ammonium sulfate liquid)

3.2.6 암모니아수(Ammonia water)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 (생  략)

<신  설>

4.2 시험조작

4.2.1 시험용액 <제1법 건식분해법>에 따라 처리한 시료를 0.5 N 질산용액으로 아연 농도 1～10 ㎍/mL되게 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1(제1법) 중 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

Ⅲ.3.2.5 아연

Ⅲ.3.2.5.1 아연(제1법 원자흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

----------------------------- --- 건식 또는 습식으로 --------- ----------------------

2. 장비와 재료

2.1 (현행과 같음)

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 시약

3.1 표준물질

3.1.1 (현행과 같음)

3.2 일반시약

3.2.1～3.2.3 (현행과 같음)

<삭  제>

<삭  제>

<삭  제>

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 (현행과 같음)

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 시료 적정량을 200～300 mL 분해플라스크에 취하여 질산 5 mL를 가하여 서서히 약하게 가열하고 최초의 심한 반응이 끝난 후 다시 온도를 올려 가열시킨다.

4.1.2.1.2 질산이 휘산되어 내용물이 거의 건고될 때까지 가열하고 질산용액(1→2) 10 mL와 70% 과염소산 10 mL를 가하여 가열을 조절하면서 서서히 가열시킨다.

4.1.2.1.3 고형물이 완전히 용해되고 액이 거의 무색이 될 때까지 가열을 계속하여 분해한다. 만약, 액이 착색되어 있다면 70% 과염소산 수 mL를 가하여 가열한다.

4.1.2.1.4 분해 후 냉각하고 소량의 물로 희석한 후 직경이 9 cm의 자제증발접시에 액을 씻어 옮기고 증발건고하여 과염소산을 증발시킨다.

4.1.2.1.5 잔류물에 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가하고 동량의 물로 희석시켜 수욕상에서 가온하여 완전히 녹인 후 100 mL 메스플라스크에 옮겨 0.5 N 질산용액을 가하여 전량을 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

4.2.1 시험용액을 아연 농도 1～10 ㎍/mL되게 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1 중 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

<신  설>

Ⅲ.3.2.5.2 아연(제2법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온선의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량검출기(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Zinc

분자식 : Zn, 분자량 : 65.39, CAS No. : 7440-66-6

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.5.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 공시험용액을 포함하여 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다.

Ⅲ.3.2.6 칼륨

<신  설>

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 시료 중 존재하는 칼륨을 건식법으로 분해하여 원자흡광광도법을 적용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1～2.1.3 (생  략)

2.1.4 유리여과기 또는 석면

2.1.5 시험관

2.1.6 (생  략)

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계

3. 표준물질 및 시약

3.1 표준물질

3.1.1 (생  략)

3.2 일반시약

3.2.1～3.2.3 (생  략)

3.2.4 BTB시액(Bromothymol blue)

3.2.5 황산암모늄용액(Ammonium sulfate liquid)

3.2.6 암모니아수(Ammonia water)

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 제1법 건식분해법

4.1.1.1～4.1.1.3 (생  략)

4.1.1.4 불용물은 여지와 같이 사용했던 회화용기에 옮겨 건고한 후 다시 회화한다. 이 회분을 물로 적시어 염산용액(1→4) 약 2 mL를 가해 물 약 5 mL로 희석한 후 수욕상에서 가온하고, 여과한 액을 앞의 100 mL 메스플라스크에 채워 물을 가하여 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

<신  설>

Ⅲ.3.2.6 칼륨

Ⅲ.3.2.6.1 칼륨(제1법 원자흡광광도법)

1. 시험방법의 요약

------------------------------- 건식 또는 습식으로 -----------------------------.

2. 장비와 재료

2.1 험실 장비 및 소모품

2.1.1～2.1.3 (현행과 같음)

<삭  제>

<삭  제>

2.1.4 (현행 2.1.6과 같음)

2.2 분석장비

2.2.1 원자흡광광도계(Atomic Absorption Spectrophotometer, AAS)

3. 표준물질 및 시약

3.1 표준물질

3.1.1 (현행과 같음)

3.2 일반시약

3.2.1～3.2.3 (현행과 같음)

<삭  제>

<삭  제>

<삭  제>

4. 시험과정

4.1 시험용액의 제조

4.1.1 건식분해법

4.1.1.1～4.1.1.3 (현행과 같음)

4.1.1.4 -------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 채워 0.5 N 질산용액을 가하여 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2 습식분해법

4.1.2.1 질산-과염소산법

4.1.2.1.1 시료 적정량을 200～300 mL 분해플라스크에 취하여 질산 5 mL를 가하여 서서히 약하게 가열하고 최초의 심한 반응이 끝난 후 다시 온도를 올려 가열시킨다.

4.1.2.1.2 질산이 휘산되어 내용물이 거의 건고될 때까지 가열하고 질산용액(1→2) 10 mL와 70% 과염소산 10 mL를 가하여 가열을 조절하면서 서서히 가열시킨다.

4.1.2.1.3 고형물이 완전히 용해되고 액이 거의 무색이 될 때까지 가열을 계속하여 분해한다. 만약, 액이 착색되어 있다면 70% 과염소산 수 mL를 가하여 가열한다.

4.1.2.1.4 분해 후 냉각하고 소량의 물로 희석한 후 직경이 9 cm의 자제증발접시에 액을 씻어 옮기고 증발건고하여 과염소산을 증발시킨다.

4.1.2.1.5 잔류물에 염산용액(1→2) 약 10 mL를 가하고 동량의 물로 희석시켜 수욕상에서 가온하여 완전히 녹인 후 100 mL 메스플라스크에 옮겨 0.5 N 질산용액을 가하여 전량을 100 mL로 하여 시험용액으로 한다.

4.1.2.2 마이크로웨이브법

4.1.2.2.1 시료 일정량을 Microwave digestion system에 넣고 질산 등으로 처리하여 분해하고, 부피플라스크에 옮겨 증류수를 가하여 일정량으로 한다.

4.2 시험조작

4.2.1 시험용액을 칼륨 농도 1～10 ㎍/mL되게 조정하여 Ⅲ.3.2.1.1 중 원자흡광광도법에 따라 측정한다.

<신  설>

Ⅲ.3.2.6.2 칼륨(제2법 유도결합플라즈마법)

1. 시험방법의 요약

본 시험법은 아르곤 가스에 고주파를 유도결합방식으로 걸어 방전되어 얻어진 아르곤 플라즈마에 시험용액을 주입하여 목적원소의 원자선 및 이온선의 발광광도 또는 질량값을 측정하여 시험용액 중의 목적원소의 농도를 구하는 방법이다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 도가니 또는 백금접시

2.1.2 회화로

2.1.3 수욕조 또는 오븐

2.1.4 부피플라스크

2.1.5 피펫

2.2 분석장비

2.2.1 유도결합플라즈마검출기(Inductively Coupled Plasma, ICP)

2.2.2 유도결합플라즈마 질량검출기(Inductively Coupled Plasma Mass Spectrometry, ICP/MS)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 표준물질

3.1.1 Potassium

분자식 : K, 분자량 : 39.10, CAS No. : 7440-09-7

3.2 일반시약

3.2.1 질산(Nitric acid)

3.2.2 염산(Hydrochloric acid)

3.2.3 증류수(Distilled water)

4. 시험과정

4.1 Ⅲ.3.2.6.1의 방법에 따라 표준용액과 시험용액을 제조하고 공시험용액을 포함하여 ICP 또는 ICP/MS에 주입하여 시험용액의 농도를 구한다

Ⅲ.3.5.4. 콜레스테롤

1. 시험방법의 요약

시료를 검화시킨 후 콜레스테롤을 추출하여 가스크로마토그래프로 분석하고 내부표준물질의 면적비를 이용하여 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 분액여두

<신  설>

2.1.2 환저플라스크

2.1.3 감압농축기

2.1.4 환류냉각기

<신  설>

<신  설>

2.2 분석장비

2.2.1 가스크로마토그래프

2.2.2 불꽃이온화검출기(Flame Ionization Detector)

2.2.3 칼럼오븐

2.2.4 100% dimethylpolysiloxane (안지름 0.32 mm, 길이 50 m, 필름두께 0.5 μm thickness) 또는 이와 동등한 것

2.3 (생  략)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 (생  략)

3.2 내부표준물질

3.2.1 5α-콜레스탄(5α-Cholestane) 혹은 스쿠알렌(squalene)

3.3 일반시약

3.3.1 클로로포름(Chloroform)

3.3.2 메탄올(Methanol)

3.3.3 에틸에테르(Ethylether)

3.3.4 헥산(n-Hexane)

<신  설>

<신  설>

<신  설>

3.4 시액의 조제

3.4.1 5α-콜레스탄 내부표준물질용액

5α-콜레스탄 20 mg을 헥산에 10 mL로 한다.

3.4.2 2 N 수산화칼륨 에탄올용액

수산화칼륨 13.2 g을 소량의 물로 녹이고 에탄올을 가하여 100 mL로 한다.

<신  설>

<신  설>

<신  설>

4. 시험과정

4.1 표준용액의 조제

4.1.1 표준물질 콜레스테롤 20 mg을 정밀하게 달아 헥산 10 mL에 녹여 표준용액으로 한다.

4.1.2 표준물질 콜레스테롤 0.05, 0.1, 0.2, 0.4, 0.8 및 1.0 mL를 각각의 시험관에 취하여 내부 표준물질 용액 0.5 mL씩 가하여 헥산으로 정확히 2 mL가 되게 한다.

4.2 시험용액의 조제

4.2.1 시료를 약 1～10 g(콜레스테롤 함량 20～1,000 mg/100 g)에 물 약 8 mL과 5α-콜레스탄 0.5 mL를 가하여 혼화 균질화한다.

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

4.2.2 이를 분액여두에 옮겨 클로로포름 : 메탄올(2 : 1) 200 mL를 가하여 약 5분간 진탕혼합 추출하여 방치한 후 클로로포름층을 취한다.

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

4.2.3 검액 잔류물에 다시 클로로포름 : 메탄올(2 : 1) 100 mL씩을 가하여 2회 추출한다.

<신  설>

<신  설>

<신  설>

4.2.4 추출한 클로로포름층을 합하여 0.5% 수산화나트륨용액 100 mL로 세척하고 무수황산나트륨으로 탈수한 후, 여과하여 40℃이하에서 감압 농축한다.

4.2.5 감압 농축한 잔류물에 2 N 수산화칼륨 에탄올용액 20 mL를 가하여 환류냉각기를 붙여 85℃에서 1시간 비누화한 후 냉각하고 물 20 mL 를 가하여 분액여두로 옮긴다.

4.2.6 에틸에테르 20 mL씩 3회 추출하고, 추출액을 모두 합하여 물 20 mL 씩으로 세척한다(약 5회 정도, 페놀프탈레인 지시약으로 홍색이 나타나지 않을 때까지 세척한다).

4.2.7 에틸에테르층을 무수황산나트륨으로 탈수한 후 여과하여 감압 농축한다.

4.2.8 잔류물을 헥산 2 mL에 녹여 시험용액으로 한다.

5. 분석 및 계산

5.1 기기분석

표1. 가스크로마토그래프 조건(예)

항목	조건
(생 략)	(생 략)
컬럼 온도	190℃(2분)-15℃/분-260℃(5분)-15℃/분-300℃(5분)
(생 략)	(생 략)
캐리어 가스 및 유량	질소, 3.0 mL/분
Split ratio	10 : 1

5.2 계산

[내부표준물질을 사용하지 않는 경우]

5.2.1 콜레스테롤 함량(mg/100 g) = C × (V/S) × (100/1,000)

C : 시험용액 중의 콜레스테롤 농도(μg/mL)

V : 최종희석액(mL)

S : 시료 채취량(g)

100/1,000 : 단위 환산 계수

[내부표준물질을 사용한 경우]

5.2.2 콜레스테롤 함량(mg/100 g) = (2 × K × P1)/(S × P2) × 100

K : 환산계수 (피크면적비 또는 높이비가 1.0인 내부표준물질에 대한 표준물질의 중량비)

P1 : 콜레스테롤 피크면적

P2 : 5α-콜레스탄의 피크면적

S : 시료 채취량(g)

100 : 단위 환산 계수

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

Ⅲ.3.5.4. 콜레스테롤

1. 시험방법의 요약

검체 중 지질을 고온에서 수산화칼륨 에탄올 용액으로 비누화한다. 콜레스테롤을 톨루엔으로 추출하고 트리메틸실릴(TMS) 에테르화하여 유도체화 한 다음 이를 기체크로마토그래피로 정량한다.

2. 장비와 재료

2.1 실험실 장비 및 소모품

2.1.1 원심분리관 : 15 mL, Pyrex No. 13.

※ 유도체화를 위해서 원심분리관을 실란화하여 사용한다. 이를 위해 원심분리관에 10% 불산을 채운 후 10분간 정치하고 증류수로 완전히 씻어준 후, 무수 에탄올로 다시 세척한 다음 질소 하에서 시험관을 건조한다. 10% 헥사메틸디실란(HMDS) 톨루엔 용액으로 원심분리관을 채워 1시간 정치한다. 이를 톨루엔으로 완전히 씻어준 후, 무수 에탄올로 다시 세척하고 사용 전에 100℃ 오븐에 건조하여 사용한다. 강 알칼리로 시험관을 세척한 것이 아니라면 실란화를 다시 하지 않고 시험관을 다시 사용할 수 있으나 적어도 6개월에 한번은 실란화하여 사용한다.

2.1.2 감압 농축기

2.1.3 자석교반-가열기

2.1.4 교반기(Vortex mixer)

2.1.5 분석저울 : 0.0001 g까지 측정이 가능한 것

2.1.6 초자기구 : 삼각플라스크(125 mL, 250 mL), 용량 플라스크, 피펫, 매스실린더, 분획여두(500 mL)

2.2 분석장비

2.2.1 기체크로마토그래프/불꽃이온화검출기(GC-FID)

2.2.2 칼럼 : HP-5(25m × 0.32mm × 0.17μm 또는 이와 동등 제품(5%-phenyl-methyl polysiloxane)

<삭  제>

<삭  제>

2.3 (현행과 같음)

3. 표준물질 및 일반시약

3.1 (현행과 같음)

3.2 내부표준물질

3.2.1 5α-콜레스탄(5α-Cholestane)

3.3 일반시약

3.3.1 디메틸포름아미드(Dimethyl formamide, DMF) : 기체크로마토그래피용

3.3.2 헥사메틸디실란(Hexamethyldisilane, HMDS)

3.3.3 수산화칼륨

3.3.4 트리메틸클로로실란(TMCS) : Pierce Chemical사 No. 88531 또는 이와 동등한 것

3.3.5 톨루엔 : 잔류농약급 또는 이와 동등한 것

3.3.6 무수황산나트륨

3.3.7 유리솜

3.4 시액의 조제

3.4.1 5α-콜레스탄 내부표준물질용액

0.1 mg/mL, 5α-콜레스탄 10 mg을 n-헵탄에 녹여 100 mL로 한다.

3.4.2 수산화칼륨 용액

<삭  제>

3.4.2.1 50%(w/w) : 수산화칼륨 500 g 수산화칼륨을 증류수에 녹여 1 L로 한다.

3.4.2.2 1M : 수산화칼륨 56 g을 증류수에 녹여 1 L로 한다.

3.4.2.3 0.5M : 1M 수산화칼륨 용액을 증류수로 희석하여 조제한다.

4. 시험과정

4.1 표준용액의 조제

4.1.1 ------------------------- --------- DMF 10 mL에 ------- --------------.

4.1.2 표준원액을 DMF로 희석하여 0.0025 ∼ 0.2 mg/mL 범위에서 6개 농도로 표준용액을 조제한다(0.0025, 0.005, 0.01, 0.05, 0.1, 0.2 mg/mL로 조제한다.)

4.2 시험용액의 조제

4.2.1 비누화 과정

4.2.1.1 검체 약 2 g을 정밀히 달아 삼각플라스크에 취하여 자석막대를 삼각플라스크에 넣고 95% 에탄올 40 mL과 50% 수산화칼륨용액 8 mL을 가한다(95% 에탄올 40 mL 중 일정량을 50% 수산화칼륨용액 첨가 후 잔류물 세척에 사용하여 플라스크와 콘덴서가 같이 붙어서 떨어지지 않는 것을 방지할 수 있다.)

4.2.1.2 콘덴서를 설치하고 자석교반-가열기를 이용하여 교반하면서 가열하여 70±10분간 환류 시킨다. 비누화를 위해 시료를 지속적으로 관찰하면서 덩어리가 생길 경우 유리봉으로 분산시키거나 교반하면서 50% 수산화칼륨용액을 추가하여 시험용액을 교반한다.

4.2.1.3 환류가 완료되면 가열기를 끄고 교반 중에 콘덴서의 상부를 통해 95% 에탄올 60 mL을 조심하여 첨가하고 15분간 방치한다.

4.2.1.4 콘덴서를 플라스크에서 제거하고 플라스크에 마개를 막아 실온으로 냉각시킨 후 24시간 동안 시험용액을 안정화한다.

4.2.2 추출

4.2.2.1 비누화가 끝난 시험용액을 교반하면서 톨루엔 100 mL을 첨가하고 마개를 하여 30초 이상 교반한다.

4.2.2.2 이를 세척과정 없이 500 mL 분액여두로 옮기고 1M 수산화칼륨용액 110 mL을 넣고 10초간 강렬하게 진탕하여 정치하고 분리된 아래층을 버린다.

4.2.2.3 0.5M 수산화칼륨용액 40 mL을 분액여두에 넣고 분액여두를 뒤집은 후 천천히 내용물이 소용돌이가 생기도록 10초간 섞어준 후 정치하여 분리된 아래층을 버린다.

4.2.2.4 톨루엔 층을 증류수 40 mL로 천천히 분액여두를 돌려주며 수세한 후 정치하여 분리된 아래층을 버리고 수세과정을 3회 이상 반복한다. 이 때 수세과정이 반복될수록 더욱 강렬하게 진탕하며, 만약 에멀젼이 발생하면 소량의 95% 알코올을 첨가하여 분액여두의 내용물이 회오리가 생기도록 섞어준 후 정치하여 층을 분리한다. 톨루엔 층이 맑게 보일 때까지 수세과정을 계속한다.

4.2.2.5 유리솜과 약 20 g의 무수황산나트륨이 채워진 유리깔대기를 통해 수세한 톨루엔을 약 2 g 무수황산나트륨이 채워진 삼각플라스크로 흘려주어 탈수한다.

4.2.2.6 삼각플라스크에 마개를 막고 교반하여 혼합한 후 15분 이상 정치한다. 이 때 마개의 막음상태가 완벽하더라도 24시간 이상 방치하여서는 안된다.

4.2.2.7 추출한 톨루엔 층 25 mL을 바닥이 평평한 125 mL 둥근 플라스크에 취하고 이를 40±3℃에서 감압 농축하여 건고하고 잔류물에 아세톤 약 3 mL을 가한 후 다시 감압 농축하여 완전 건고한다.

4.2.2.8 잔류물을 3 mL DMF에 녹여 시험용액으로 한다. 이 때 시험용액의 농도는 콜레스테롤 표준용액의 농도범위 안에 있어야 한다(만약 검체의 콜레스테롤 함량이 적거나 없는 경우 남아있는 75 mL 톨루엔 추출액을 감압농축하여 건고하고 2 mL DMF에 다시 녹여 시험용액을 다시 조제한다. 이 때 정량한계는 1 mg/100g이다).

4.2.3 유도체화

4.2.3.1 6개 농도의 콜레스테롤 표준용액 및 상기의 시험용액 1.0 mL을 15 mL 원심분리관에 각각 취하고 각 원심분리관에 HMDS 0.2 mL을 가한 후  TMCS 0.1 mL을 가하여 마개를 닫고 이를 강렬하게 30초간 교반하거나 손으로 흔들어 혼합하고 15분간 정치한다.

4.2.3.2 각각의 원심분리관에 5α-콜레스탄 내부표준용액 1.0 mL과 증류수 10 mL을 넣은 후 마개를 닫고 30초간 강렬하게 교반하고 이를 3000 rpm에서 2분간 원심분리한다.

4.2.3.3 상층의 헵탄 층을 취하여 기체크로마토그래피 측정용 시험용액으로 한다. 이때 유도체화 된 표준용액과 시험용액은 24시간 내에 분석한다.

<삭  제>

<삭  제>

<삭  제>

<삭  제>

<삭  제>

5. 분석 및 계산

5.1 기기분석

표1. 가스크로마토그래프 조건(예)

항목	조건
(현행과 같음)	(현행과 같음)
컬럼 온도	190℃(2분)-20℃/분-230℃(3분)-40℃/분-255℃(25분)
(현행과 같음)	(현행과 같음)
캐리어 가스 및 유량	헬륨, 2.0 mL/분
<삭 제>	<삭 제>

5.2 결과 분석

< 삭 제 >

5.2.1 검량선의 작성

유도체화한 6개의 콜레스테롤 표준용액을 1 μL 각각 주입하여 얻어진 크로마토그램상의 콜레스테롤 피크면적을 5α-콜레스탄 피크면적으로 나눈 값(Y축)과 콜레스테롤 농도(mg/mL, X축)로 검량선을 작성한다. 이 때 시험용액의 농도에 따라 0.01 ∼ 0.2 mg/mL 범위의 고농도 콜레스테롤 표준용액 4개를 이용하여 검량선을 작성하거나 0.0025 ∼ 0.05 mg/mL 범위의 저농도 콜레스테롤 표준용액 4개를 이용하여 검량선을 작성할 수 있다.

< 삭 제 >

5.2.2 표준품의 크로마토그램

분석에 사용한 칼럼 특성에 따라 5α-콜레스탄과 콜레스테롤이 각각 11 ∼ 13분 및 16 ∼ 18분에 용출되도록 유속 및 오븐온도를 조정한다.

5.2.3 정성시험

위의 조건에서 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름 시간과 일치하여야 한다.

5.2.4 정량시험

정성시험과 똑같은 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크면적법에 따라 정량한다.

5.3 계산

5.3.1 콜레스테롤 함량(mg/100g) = C × (V3 × 100)/(W × V2/V1)

C : 검량선에서 구한 시험용액의 농도(mg/mL)

W : 검체량(g)

V1 : 추출에 사용한 톨루엔의 량(100 mL)

V2 : 농축에 사용된 톨루엔 추출액의 량(25 mL)

V3 : 유도체화 전 잔사를 녹이는 데 사용한 DMF의 량(3 mL)