식품의약품안전청 고시 제2010-75호

생약 등의 잔류․오염물질 기준 및 시험방법 일부개정고시

1. 개정이유

생약 등의 품질관리 선진화를 위하여 잔류농약 시험대상 및 방법을 일부 조정하는 등 기준규격 운영에 적정을 기하는 한편, 「생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법」을 이 고시에 통합하여 생약(한약)의 잔류·오염물질에 관한 사항을 하나의 고시로 운영함으로써 민원 편의를 도모하고자 함

2. 주요내용

가. 잔류농약 시험대상 중 침향 및 호박을 적용대상에서 제외함(별표 3)

나. 감초에 대하여 6개의 잔류농약 시험항목을 추가하는 등 총7개 품목에 대하여 23개의 잔류농약 시험기준 및 방법 추가(별표 4, 별표 5)

다. 자근, 지황, 한인진 등 3품목에 대하여 잔류농약 시험대상 및 시험기준 신설(별표 4)

라. 생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법 신설(제15조 부터 제17조까지)

3. 기타 참고사항

가. 관계법령 : 「약사법」 제52조제1항

나. 예산조치 : 별도조치 필요 없음

다. 합 의 : 해당사항 없음

라. 기 타 : (1) 신․구조문대비표

(2)행정예고 : 2010. 1. 27 ～ 2. 16

(3) 규제심사 : 규제개혁위원회 규제심사 통과

식품의약품안전청 고시 제 2010-75호

「약사법」제52조제1항에 따른 「생약 등의 잔류․오염물질 기준 및 시험방법(식품의약품안전청 고시 제2009-104호, 2009. 8. 24)」을 다음과 같이 개정 고시합니다.

2010년 10 월 29 일

식품의약품안전청장

생약 등의 잔류․오염물질 기준 및 시험방법 일부개정고시

생약 등의 잔류․오염물질 기준 및 시험방법 일부를 다음과 같이 개정한다.

제1장의 제목 “총  칙”을 “총칙”으로 한다.

제1장의 장 번호 및 제목을 다음과 같이 한다.

제1장 총칙

제1조 및 제2조 중 “및 곰팡이독소의”를 각각 “, 곰팡이독소 및 벤조피렌의”로 한다.

제2조 중 “「대한약전」”을 “「대한약전」(식품의약품안전청 고시)”로 한다.

같은 조 다음의 “제2장 생약 등의 잔류·오염물질 기준 및 시험방법”을 삭제하고, 제1절의 절 번호 “제1절”을 “제2장”으로 한다.

제2장의 장 번호 및 제목을 다음과 같이 한다.

제2장 생약 등의 중금속 기준 및 시험방법

제3조제5호 중 “제제”를 “제제(광물성 생약을 함유하는 외용제는 제외)”로 한다.

제4조제5항 단서를 삭제한다.

제2절의 절 번호 “제2절”을 “제3장”으로 한다.

제3장의 장 번호 및 제목을 다음과 같이 한다.

제3장 생약 등의 잔류농약 기준 및 시험방법

제6조 제목 외의 부분을 제1항으로 하고, 같은 조에 제2항을 다음과 같이 신설한다.

② 원료 생약에 대하여 직접 검사한 생약의 추출물의 경우에는 검사를 생략할 수 있다.

제3절의 절 번호 “제3절”을 “제4장”으로 한다.

제4장의 장 번호 및 제목을 다음과 같이 한다.

제4장 생약 등의 잔류이산화황 기준 및 시험방법

제4절의 절 번호 “제4절”을 “제5장”으로 한다.

제5장의 장 번호 및 제목을 다음과 같이 한다.

제5장 생약의 곰팡이독소 기준 및 시험방법

제15조를 제18조로 하고, 제14조 다음에 제6장(제15조부터 제17조까지)을 다음과 같이 신설한다.

제6장 생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법

제15조(적용대상) 생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법은 다음 각 호의 생약에 대하여 적용한다.

1. 지황

2. 숙지황

제16조(기준) 벤조피렌[Benzo(a)pyrene]으로서 5 μg/kg 이하이다.

제17조(시험방법) 생약의 벤조피렌 시험방법은 별표 10을 따른다.

제18조(종전의 제15조)를 다음과 같이 한다.

제18조(재검토기한) 「훈령․예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정」(대통령훈령 제248호)에 따라 이 고시 발령후의 법령이나 현실여건의 변화 등을 검토하여 이 고시의 폐지, 개정 등의 조치를 하여야 하는 기한은 2013년 10월 29일까지로 한다.

별표 2 제1호 중 1) 및 2)를 각각 가목 및 나목으로 하고, 제1호 가목 (1) 및 (2)를 각각 1) 및 2)로 한다.

별표 3을 다음과 같이 한다.

연번	생약명	연번	생약명	연번	생약명	연번	생약명
1	건칠	28	백강잠	55	연단	82	전갈
2	경분	29	백반	56	영사	83	제조
3	계내금	30	백화사	57	영양각	84	주사
4	곤포	31	별갑	58	영와	85	주사수비
5	교이	32	사담	59	오공	86	죽력
6	귀판	33	사세	60	오령지	87	지룡
7	금박	34	사향	61	오배자	88	진주
8	노감석	35	상표초	62	와릉자	89	천산갑
9	노봉방	36	석결명	63	요사	90	천축황
10	노회	37	석고	64	용골	91	청몽석
11	녹각	38	석룡자	65	용뇌	92	침향
12	녹각교	39	석연	66	우담	93	트라가칸타
13	녹반	40	석유황	67	우황	94	한수석
14	녹용	41	석종유	68	운모	95	합개
15	녹용절편	42	선퇴	69	웅담	96	해구신
16	누고	43	섬서	70	웅황	97	해마
17	대자석	44	섬수	71	유향	98	해부석
18	동청	45	소합향	72	은박	99	해분
19	동충하초	46	수은	73	자석	100	해삼
20	등황	47	수질	74	자석영	101	해표초
21	망초	48	아교	75	자연동	102	현정석
22	맹충	49	아선약	76	자충	103	혈갈
23	모려	50	아위	77	자황	104	호동루
24	몰약	51	안식향	78	잠사	105	호박
25	문합	52	야명사	79	장뇌	106	화예석
26	밀타승	53	양기석	80	저담	107	활석
27	반묘	54	어교	81	적석지	108	흑사당

별표 4의 제3호부터 제25호까지를 각각 제4호부터 제26호까지로, 종전의 제26호부터 제35호까지를 각각 제28호부터 제37호까지로, 종전의 제36호부터 제38호까지를 각각 제39호부터 제41호까지로, 종전의 제39호부터 제42호까지를 각각 제43호부터 제46호까지로, 종전의 제43호부터 제47호까지를 각각 제48호부터 제52호까지로 한다.

같은 별표 제2호에 9)부터 14)까지를 각각 다음과 같이 신설한다.

9) 아세타미프리드(Acetamiprid) : 0.1 mg/kg 이하

10) 이미다크로프리드(Imidacloprid) : 0.1 mg/kg 이하

11) 클로로타로닐(Chlorothalonil) : 0.05 mg/kg 이하

12) 티아메톡삼(Thiamethoxam) : 0.1 mg/kg 이하

13) 펜피록시메이트(Fenpyroxymate) : 0.1 mg/kg 이하

14) 피메트로진(Pymetrozine) : 0.5 mg/kg 이하

같은 별표 제3호를 다음과 같이 신설한다.

3. 강활

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔도설판(Endosulfan : α,β-엔도설판 및 엔도설판설페이트의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

7) 옥솔린산(Oxolinic acid) : 7.0 mg/kg 이하

같은 별표 제4호(종전의 제3호) 중 “강활, 결명자”를 “결명자”로 한다.

같은 별표 제12호(종전의 제11호)에 13) 및 14)를 각각 다음과 같이 신설한다.

13) 세톡시딤(Sethoxydim) : 0.2 mg/kg 이하

14) 플루아지포프-부틸(Fluazifop-butyl) : 0.3 mg/kg 이하

같은 별표 제27호를 다음과 같이 신설한다.

27. 산수유

1) 총디디티(DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 메톡시클로르(Methoxychlor) : 1 mg/kg 이하

4) 총비에이치씨(BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

5) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

7) 마이클로부타닐(Myclobutanil) : 2.0 mg/kg 이하

8) 트리포린(Triforine) : 0.2 mg/kg 이하

9) 트리프루미졸(Triflumizole) : 0.2 mg/kg 이하

10) 헥사코나졸(Hexaconazole) : 0.3 mg/kg 이하

같은 별표 제28호(종전의 제26호) 중 “산수유, 산초”를 “산초”로 한다.

같은 별표 제38호를 다음과 같이 신설한다.

38. 자근

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 티플루자마이드(Thifluzamide) : 1.0 mg/kg 이하

7) 펜시쿠론(Pencycuron) : 1.0 mg/kg 이하

8) 헥사코나졸(Hexaconazole) : 0.2 mg/kg 이하

같은 별표 제39호(종전의 제36호)에 18)부터 25)까지를 각각 다음과 같이 신설한다.

18) 디치아논(Dithianon) : 0.3 mg/kg 이하

19) 아족시스트로빈(Azoxystrobin) : 0.1 mg/kg 이하

20) 카두사포스(Cadusafos) : 0.01 mg/kg 이하

21) 터부포스(Tebufos) : 0.05 mg/kg 이하

22) 티람(Thiram) : 0.2 mg/kg 이하

23) 페나리몰(Fenarimol) : 0.1 mg/kg 이하

24) 포스치아제이트(Fosthiazate) : 0.01 mg/kg 이하

25) 프로클로라즈(Prochloraz) : 0.1 mg/kg 이하

같은 별표 제42호를 다음과 같이 신설한다.

42. 지황

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 디페노코나졸(Difenoconazole) : 0.3 mg/kg 이하

7) 이민옥타딘(Iminoctadine) : 0.1 mg/kg 이하

8) 크레속심메칠(Kresoxim-methyl) : 0.1 mg/kg 이하

9) 티람(Thiram) : 0.5 mg/kg 이하

10) 피리메타닐(Pyrimethanil) : 0.2 mg/kg 이하

같은 별표 제44호(종전의 제40호)에 10)을 다음과 같이 신설한다.

10) 터부펜피라드(Tebufenpyrad) : 0.1 mg/kg 이하

같은 별표 제47호를 다음과 같이 신설한다.

47. 한인진

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 이미다크로프리드(Imidacloprid) : 1.0 mg/kg 이하

같은 별표 제53호(종전의 제48호)에 14)를 다음과 같이 신설한다.

14) 펜피록시메이트(Fenpyroxymate) : 0.2 mg/kg 이하

별표 5의 제1호 중 “마이클로부타닐(Myclobutanil)”을 “마이클로부타닐(Myclobutanil), 메칠펜타클로로페닐설파이드(Methyl-pentachlorophenyl sulfide)”로, “치노메치오네이트(Chinomethionat)”를 “치노메치오네이트(Chinomethionat), 카두사포스(Cadusafos)”로, “퀸토젠[Quintozene (PCNB)]”을 “퀸토젠[Quintozene (PCNB)], 크레속심메칠(Kresoxim-methyl)”로, “터부코나졸(Tebuconazole)”을 “터부코나졸(Tebuconazole), 터부펜피라드(Tebufenpyrad), 터부포스(Tebufos)”로, “트리프루미졸(Triflumizole)”을 “트리프루미졸(Triflumizole), 티플루자마이드(Thifluzamide)”로, “펜디메타린(Pendimethalin)”을 “펜디메타린(Pendimethalin), 펜타클로로아날린(Pentachloroaniline)”으로, “프로시미돈(Procymidone)”을 “프로시미돈(Procymidone), 프로클로라즈(Prochloraz), 피리메타닐(Pyrimethanil), 헥사코나졸(Hexaconazole)”로 한다.

같은 별표 제1호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 사)까지를 각각 1)부터 7)까지로, 다목 가) 및 나)를 각각 1) 및 2)로 한다.

같은 호 라목 가)부터 다)를 각각 1)부터 3)까지로 하고, 같은 목 1) (1)부터 (3)까지를 각각 가)부터 다)까지로 하며, 같은 목 1)가)의 (가) 및 (나)를 각각 (1) 및 (2)로, (2) 다음의 (다)를 (3)으로, (3)다음의 (다)를 (4)로, (라)를 (5)로, 1)나)의 (가)부터 (마)까지를 각각 (1)부터 (5)까지로, 1)다)의 (가)부터 (바)까지를 각각 (1)부터 (6)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 별표 제1호 다목 2) 중 “헥산․디클로로메탄․아세톤 (50:48.5:1.5)”을 “헥산․디클로로메탄․아세톤 (50∶48.5∶1.5)(프로클로라즈(Prochloraz) 및 티플루자마이드(Thifluzamide)의 경우에는 아세톤․헥산 (3∶7)으로 한다.)”로 한다.

같은 별표 제1호 라목 2)가) 중 “칼럼충전제 2개 이상을 선정하여 표준용액 및 시험용액을 가스크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진”을 “위의 조건으로 얻어진”으로 한다.

같은 별표 제2호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 마)까지를 각각 1)부터 5)까지로, 다목 가) 및 나)를 각각 1) 및 2)로, 라목 가)부터 다)를 각각 1)부터 3)까지로, 같은 목 1) (1)부터 (4)까지를 각각 가)부터 라)까지로, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 호 나목 3) 및 다목 1), 2) 중 “M”을 “mol/L”로, “EDTA”를 “EDTA(disodium)”로 하고, 같은 호 나목 5) 중 “EDTA(tetra sodium)”를 “EDTA(disodium)”로 하며, 라목 2)나) 중 “확인”을 “각 농약의 성분을 확인”으로 한다.

같은 별표 제3호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 마)까지를 각각 1)부터 5)까지로, 같은 목 사) 및 아)를 각각 6) 및 7)로, 다목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 하며, 같은 목 1) (1)부터 (4)까지를 각각 가)부터 라)까지로, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 호 가목 중 “불꽃광도검출기(FPD): 황용간섭필터”를 “불꽃광도검출기(FPD)”로 하고, 라목 2)가)를 다음과 같이 한다.

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

같은 별표 제4호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 마)까지를 각각 1)부터 5)까지로, 같은 목 사)를 6)으로, 다목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 한다.

같은 호 라목 1) (1)부터 (5)까지를 각각 가)부터 마)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 호 다목 2) 중 “0.1 M”을 “10 %”로 하고, 라목 1)다) 중 “0.01M KH2PO4 용액․물(4∶6)”을 “0.01M KH2PO4 용액․메탄올(6∶4)”로 한다.

같은 별표 제5호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 사)까지를 각각 1)부터 7)까지로, 다목 가) 및 나)를 각각 1) 및 2)로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 한다.

같은 호 라목 1) (1)부터 (4)까지를 각각 가)부터 라)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 호 라목 2)가)를 다음과 같이 한다.

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

같은 별표 제6호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 사)까지를 각각 1)부터 7)까지로, 다목 가) 및 나)를 각각 1) 및 2)로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 한다.

같은 호 라목 1) (1)부터 (5)까지를 각각 가)부터 마)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 별표 제7호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 마)까지를 각각 1)부터 5)까지로, 다목 가)를 1)로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 한다.

같은 호 라목 1) (1)부터 (8)까지를 각각 가)부터 아)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 호 다목 1) 및 라목 1)사) 중 “M”을 “mol/L”로 하고, 라목 다) 중 “pH 2.5/60 % HClO4로”를 “60 % HClO4로 pH 2.5로”으로 한다.

같은 별표 제8호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 사)까지를 각각 1)부터 7)까지로, 다목 가) 및 나)를 각각 1) 및 2)로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 한다.

같은 호 라목 1) (1)부터 (4)까지를 각각 가)부터 라)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 호 나목 3) 중 “ENVI-Carb Sep-Pak 카트리지, 250 mg”를 “흑연화탄소(graphitized carbon) 250 mg이 충전되어 있는 카트리지(용량 6 mL)”로 하고, 다목 2) 중 “(ENVI-Carb Sep-Pak 카트리지, 250 mg)”을 “(250 mg, 6 ml)”로 한다.

같은 별표 제9호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 사)까지를 각각 1)부터 7)까지로, 다목 가) 및 나)를 각각 1) 및 2)로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 한다.

같은 호 라목 1) (1)부터 (5)까지를 각각 가)부터 마)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 호 나목 3) 중 “SPE용 또는 이와 동등한 것(실리카겔(1 g) 고정상이 충전되어 있는 카트리지(Silica sep- pack, 용량 6 mL))”을 “실리카겔(1 g)이 충전되어 있는 카트리지(용량 6 mL)”로 하고, 다목 2) 중 “silica sep-pack 카트리지”를 “실리카카트리지”로 한다.

같은 별표 제10호 1)부터 4)까지를 각각 가목부터 라목까지로 하고, 나목 가)부터 마)까지를 각각 1)부터 5)까지로, 같은 목 사)를 6)으로, 다목 가) 및 나)를 각각 1) 및 2)로, 라목 가)부터 다)까지를 각각 1)부터 3)까지로 한다.

같은 호 라목 1) (1)부터 (5)까지를 각각 가)부터 마)까지로 하고, 같은 목 2) (1) 및 (2)를 각각 가) 및 나)로 한다.

같은 별표에 제11호부터 제16호까지를 각각 다음과 같이 신설한다.

11. 디치아논(Dithianon)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 실리카겔: 칼럼크로마토그래프용 실리카겔(60 ～ 100 mesh)

4) 표준원액: 디치아논을 5 % 아세트산이 함유된 아세톤에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 5 % 아세트산이 함유된 아세톤에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 20 g을 취하여  4 mol/L 염산 5 mL 및 아세톤 100 mL를 넣고 30 분간 진탕추출한다. 추출액을 셀라이트 545를 이용하여 진공펌프와 가지 달린 삼각플라스크 및 부크너깔때기로 감압여과 한다. 여액을 40 ℃ 이하에서 감압농축하여 아세톤을 제거하고 5 % 식염수 50 mL 및 헥산 50 mL를 이용하여 분액깔대기에 옮기고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(물층)을 다른 분액깔때기에 옮기고 헥산 50 mL를 넣어 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 헥산층을 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 디클로로메탄 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 내경 14 mm, 길이 400 mm의 유리컬럼에 실리카겔(60 ～ 100 mesh) 5 g과 무수황산나트륨을 2 g을 충전시켜 헥산 50 ml를 유출시켜 버린 다음 추출액 5 mL을 흡착시킨다. 벤젠 50 mL로 유출하여 유출액을 모아 감압 농축시킨 다음 아세토니트릴 1 ml 에 녹인다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 실온(30 ℃)

다) 이동상: 메탄올․물․아세트산 (7∶3∶0.1)

라) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 254 nm

마) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

12. 펜피록시메이트(Fenpyroximate)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 후로리실: 칼럼크로마토그라피용 후로리실을 130 ℃에서 하룻밤 가열한 다음 데시케이터에서 식힌다.

4) 표준원액: 펜피록시메이트를 아세톤에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 아세톤에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 20 g을 취하여 70 % 아세톤 100 mL를 넣고 30 분간 진탕추출한다. 추출액을 셀라이트 545를 이용하여 진공펌프와 가지 달린 삼각플라스크 및 부크너깔대기로 감압여과 한다. 여액을 40 ℃ 이하에서 감압농축하여 아세톤을 제거하고 5 % 식염수 50 mL 및 헥산 50 mL를 이용하여 분액깔대기에 옮기고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(물층)은 다른 분액깔때기에 옮기고, 여기에 헥산 50 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 헥산층을 모두 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 디클로로메탄 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 내경 14 mm, 길이 400 mm의 유리컬럼에 후로리실 5 g과 무수황산나트륨을 2 g을 충전시켜 디클로로메탄 30 mL를 유출시켜 버린 다음 추출액 5 mL을 흡착시킨다. 디클로로메탄․아세트산에틸(98∶2) 150 mL로 유출하여 유츌액을 모아 감압 농축시킨 다음 아세토니트릴 1 ml 에 녹인다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 실온(30 ℃)

다) 이동상: 아세토니트릴․물(9∶1)

라) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 254 nm

마) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

13. 세톡시딤(Sethoxydim)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 실리카카트리지: 실리카겔(500 mg)이 충전되어 있는 카트리지(용량 6 mL)

4) 표준원액: 세톡시딤을 메탄올에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 메탄올에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 후 약 10 g을 달아 80 % 메탄올 100 mL를 넣고 한 시간 동안 심하게 흔들어 추출한 후 진공펌프와 가지달린 삼각플라스크 및 부크너깔때기로 감압여과 한다. 이 여액을 감압농축하여 메탄올을 제거한 후 분액깔때기에 옮기고 포화식염수 50 mL와 증류수 200 mL를 가한다. 이에 디클로로메탄 70 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄층)은 다른 분액깔때기에 모으고, 물층에 다시 디클로로메탄 50 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 후 정치하여 층을 분리시킨 다음 디클로로메탄층을 모은다. 디클로로메탄층은 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 헥산․에칠아세테이트 (95：5) 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 미리 실리카 카트리지(6 mL, 500 mg)에 헥산 6 mL를 넣고 2분간 멈춘 다음 유출시켜 버리고, 이 카트리지에 헥산․에칠아세테이트 (95：5) 6 mL를 위와 같은 방법으로 유출하여 버린다. 이어서 추출액을 카트리지 상단에 넣고 2분간 컬럼에 머무르게 한 다음 서서히 유출시켜 버린다. 카트리지가 용매에 젖어 있는 상태에서 헥산․아세톤 (9∶1) 5 mL로 유출하여 유출액을 모은다. 유출액은 수욕상(40 ℃ 이하)에서 감압농축시켜 용매를 날려 보낸 다음 메탄올 2 mL에 녹여 시험용액으로 한다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 이동상: 메탄올․물(7∶1)

다) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 280 nm

라) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

14. 플루아지포프-부틸(Fluazifop-butyl)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 후로리실: 칼럼크로마토그래프용 후로리실

4) 표준원액: 플루아지포프-피-부틸을 아세토니트릴에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 10 g을 취하여 아세토니트릴 100 mL를 넣고 약 3분간 고속 균질화한다. 추출액을 셀라이트 545를 이용하여 부크너깔때기로 감압여과 한다. 여액을 포화식염수 100 mL와 증류수 400 mL가 들어있는 분액여두에 옮기고, 디클로로메탄 50 mL를 가하여 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄)을 다른 분액깔때기에 옮기고 물층에 다시 디클로로메탄 50 mL를 넣어 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 디클로로메탄을 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 n-hexane․dichloromethane․acetonitrile (49.65∶50∶0.35) 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 안지름 20 mm, 길이 30 mm 유리칼럼에 후로리실 10 g과 무수황산나트륨 2 g을 헥산으로 충전하고 헥산 50 mL로 컬럼을 세척한다. 추출액을 칼럼에 넣어 흡착시킨 다음 n-hexane․dichloromethane․acetonitrile (48.5∶50∶1.5) 70 mL로 유출하여 유출액을 모은다. 유출액을 수욕상(40 ℃ 이하)에서 감압농축하여 건고시킨 다음 아세토니트릴 2 mL에 녹여 시험용액으로 한다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 40 ℃

다) 이동상: 아세토니트릴․0.1 % 포름산 (70∶30)

라) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 225 nm

마) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

15. 옥솔린산(Oxolinic acid)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector) 또는 형광검출기]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 옥솔린산을 0.25 mol/L 수산화나트륨․메탄올(10:90)에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

4) 표준용액: 표준원액을 메탄올에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

5) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 10 g을 취하여 물 30 mL와 5 mol/L 염산 5 mL를 첨가한 후 30분간 방치한다. 아세톤 100 mL를 가하여 약 5 분간 고속균질화한 후 감압여과한다. 여액을 포화식염수 50 mL와 증류수 450 mL가 들어있는 분액여두에 옮기고, 헥산 100 mL를 가하여 흔들어 섞은 다음 정치하여 헥산층을 버리고, 물 층에 디클로로메탄 70 mL를 가하여 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄)을 다른 분액깔때기에 옮기고 물층에 다시 디클로로메탄 70 mL를 넣어 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 디클로로메탄을 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 0.01 mol/L 옥살산․아세토니트릴․메탄올 (60∶30∶10) 10 mL에 녹인다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 40 ℃

다) 이동상: 0.5 % 아세트산․아세토니트릴․메탄올 (70∶30∶10)

라) 검출기 파장: 형광검출기 여기파장 330 nm, 형광파장 365nm 또는 자외부흡광광도검출기 UV 360 nm

마) 유속: 0.8 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

16. 펜시쿠론(Pencycuron)

가. 장치: 가스크로마토그래프[질소․인 검출기(NPD)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 후로리실(Florisil): 칼럼크로마토그래피용 후로리실(60～100 mesh)을 130 ℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

4) 여과보조제: 셀라이트 545 (celite 545)

5) 표준원액: 펜시쿠론을 아세톤 등에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

6) 표준용액: 표준원액을 각각 아세톤에 녹여 적당한 농도로 혼합․희석한다.

7) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 후 약 20 g을 달아 아세톤 80 mL를 넣고 균질기(homogenizer)로 5 분간 균질화한 후 진공펌프와 가지 달린 삼각플라스크 및 부크너깔때기로 감압여과 한다. 이 여액을 500 mL 분액깔때기에 옮기고 포화 식염수 50 mL와 증류수 450 mL를 가한다. 이에 디클로로메탄 60 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄층)은 다른 분액깔때기에 모은다. 물층에 다시 디클로로메탄 60 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 후 정치하여 층을 분리시킨 다음 아래층(디클로로메탄층)을 모은다. 디클로로메탄층은 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 헥산 10 mL에 녹인다.

2) 정제: 안지름 20 mm, 길이 30 mm 유리칼럼에 후로리실 10 g을 헥산으로 충전하고 헥산 50 mL를 유출시킨 후 농축액을 넣는다. 5 % 아세톤 함유 헥산 50 mL를 유출시켜 버리고, 15 %아세톤 함유 헥산 60 mL로 유출하여 유출액을 모은다. 유출액을 수욕상(40 ℃ 이하)에서 감압농축하여 건고시킨 후 잔류물을 아세톤 1 ml에 녹인다.

3) 유도체화 : 위의 용액에 디메틸설폭사이드 0.5 mL를 넣고 여기에 수소화나트륨 약 0.2 g 및 요오드화메틸 0.5 mL를 넣어 마개를 하여 때때로 흔들면서 30 ℃에서 30 분간 방치한다. 이에 헥산 5 mL를 넣고 약 1 분간 심하게 흔들어 섞은 다음 증류수 10 mL를 서서히 방울로 넣어 수소가스의 발생이 그친 후, 소량의 헥산과 증류수를 이용하여 분액깔때기로 옮기고 5 분간 심하게 흔들어 섞는다. 헥산층을 무수황산나트륨 칼럼에 통과시켜 탈수하고 다시 칼럼을 헥산 약 20 mL로 씻은 다음 이를 40 ℃ 이하의 수욕상에서 감압하에 날려 버린 후 잔류물을 헥산에 녹여서 일정량으로 한 후 시험용액으로 한다.

라. 시험조작

1) 가스크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의 규산유리제 캐필러리 칼럼관에 가스크로마토그래프용 5 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께로 코팅한 것, 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의 규산유리제 캐필러리 칼럼관에 가스크로마토그래프용 50 % 페닐, 50 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께로 코팅한 것 또는 이와 동등한 것

나) 캐리어가스 및 유량: 질소, 1.0 mL/분

다) 칼럼온도: 230 ℃

라) 주입부온도: 250 ℃, split mode (10∶1)

마) 검출기온도: 280 ℃

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름 시간이 일치하여야 한다.

나) GC-MSD 검출기를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 각 농약의 성분을 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

별표 10을 다음과 같이 신설한다.

[별표 10] 생약의 벤조피렌 시험방법(제17조 관련)

이 약 500 ～ 600 g을 분쇄하거나 잘게 잘라 균질하게 혼합하여 약 5.0 g을 정밀하게 달아 물 100 mL를 넣어 90 분간 초음파 추출한다. 여기에 헥산 약 100 mL 및 내부표준액 1 mL을 넣어 호모게나이저로 5 분간 균질하게 섞은 다음 30 분간 초음파 추출한다. 헥산층을 분액깔대기에 옮기고 다시 물층에 헥산 약 50 mL씩을 넣고 2회 반복하여 진탕 추출한 후 헥산층을 취하여 분액깔대기에 합한다. 합한 헥산층에 물 약 50 mL를 넣어 세척하고, 이 헥산층을 무수황산나트륨을 넣은 여과지를 사용하여 탈수 여과한 다음 45 ℃의 수욕상에서 감압 (약 700 mbar)하여 헥산 약 2 mL가 될 때까지 농축한다. 플로리실카트리지는 미리 디클로로메탄 10 mL 및 헥산 20 mL를 순서대로 초당 2 ～ 3 방울의 속도로 유출시켜 활성화시킨 후 사용한다. 활성화된 카트리지에 위의 추출용액을 넣어 헥산․디클로로메탄혼합액(3 : 1) 20 mL를 초당 2 ～ 3방울의 속도로 용출시킨다. 이 용출된 액을 35 ℃이하의 수욕상에서 질소가스 하에 날려 보낸 후 잔류물을 아세토니트릴 1 mL에 녹인 다음 공경 0.45 μm이하의 멤브레인필터로 여과하여 검액으로 한다. 따로 벤조피렌표준품 및 3-메틸콜란트렌표준품 적당량을 정밀하게 달아 각각 아세토니트릴에 녹여 mL당 1 μg을 함유하는 표준원액 및 내부표준원액을 만든다. 이 표준원액 및 내부표준원액은 5 ~ 15 ℃에서 저장하며 30일 이내에 쓴다. 이 표준원액과 내부표준원액 적당량을 정확하게 취하여 아세토니트릴로 mL 당 3, 5, 10, 20 및 40 ng의 벤조피렌과 각각 50 ng의 내부표준물질이 함유되도록 희석하여 표준액으로 한다. 이때 검액의 검출농도가 검량선의 범위를 벗어나면 표준액의 농도가 검량선의 범위에 들어오도록 농도를 조정한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 표준액에서 얻은 내부표준물질 피크면적에 대한 벤조피렌의 피크면적비[AS/AIS]를 Y축으로 하고 벤조피렌의 농도를 X축으로 하여 만든 검량곡선을 작성하고, 검액의 내부표준물질 피크면적에 대한 벤조피렌의 피크면적비[ASAM/ASAMIS]를 Y축에 대입하여 벤조피렌의 농도를 구한다.

AS : 검량곡선표준용액의 표준물질 피크면적

AIS : 검량곡선표준용액의 내부표준물질 피크면적

ASAM : 시험용액의 벤조피렌 피크면적

ASAMIS : 시험용액의 내부표준물질 피크면적

내부표준액	3-메틸콜란트렌 표준품을 정밀하게 달아 아세토니트릴에 녹여 1 mL 중 50 ng을 함유하는 용액을 만든다.

시약 및 시액	본 실험에 사용한 물은 3차 증류수 이상의 것을 사용하고, 시약은 잔류농약시험용 이상의 것을 사용한다.

조작조건

검출기 : 형광검출기(여기파장 : 294 nm, 형광파장 : 404 nm)

칼럼 : Supelcosil LC-PAH (4.6 × 250 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

칼럼온도 : 37 ℃

이동상 : 아세토니트릴․물 혼합액(8 : 2)

유  량 : 1.0 mL/분

부칙<제2010-75호, 2010. 10. 29. >

제1조(시행일) 이 고시는 고시한 날부터 시행한다.

제2조(규제의 존속기한) ① 제15조부터 제17조까지의 신설규정은 2011년 4월 12일까지 효력을 가진다.

② 「행정규제기본법」제8조제3항에 따른 심사요청을 거쳐 제1항에 따른 유효기간이 연장되지 아니하거나 이 고시가 2011년 4월 12일까지 개정되지 아니하는 경우에는 이 고시는 그 효력을 상실한다.

제3조(다른 고시의 폐지) 이 고시 시행과 함께 「생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법」(식품의약품안전청 고시)은 폐지한다.

제4조(경과조치) ① 이 고시 시행 당시 수입되어 검사가 진행 중인 사항에 대하여는 종전의 규정을 적용한다.

② 이 고시 시행 당시 이미 허가나 신고가 완료된 의약품이 개정규정에 맞지 아니하는 경우에는 이 고시 시행일로부터 3개월 이내에 위 개정규정에 적합하도록 하여야 한다.

제5조(다른 고시의 개정) 이 고시 시행과 함께 「수입의약품등 관리규정」(식품의약품안전청 고시) 일부를 다음과 같이 개정한다.

별표 1 제1호 나목 중 “및 「생약의 벤조피렌 허용기준 및 시험방법」(식품의약품안전청 고시)에 규정된”을 “에  규정된”으로 한다.

별표 1 제4호 나목 (2)를 삭제한다.

제6조(다른 고시와의 관계) 이 고시 시행 당시 다른 고시 등의 규정에서 종전의 「생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법」 또는 그 조항을 인용하고 있는 경우, 이 고시 중 그에 해당하는 규정이 있는 때에는 종전의 규정에 갈음하여 이 고시 또는 이 고시의 해당조항을 인용한 것으로 본다.

신·구조문 대비표

현  행

개 정

제1장 총  칙

제1조(목적) 이 규정은 「약사법」 제52조제1항에 따라 생약(한약과 한약재를 포함한다. 이하 같다) 및 그 추출물(엑스제, 유동엑스제, 틴크제를 포함한다. 이하 같다)과 제제(이하 “생약 등”이라 한다)에 대하여 생약 등의 중금속, 잔류농약, 잔류이산화황 및 곰팡이독소의 기준 및 시험방법 등을 정함으로서 생약 등의 품질관리의 적정을 기함을 목적으로 한다.

제2조(일반원칙) 「대한약전」 및 「대한약전외한약(생약)규격집」(식품의약품안전청 고시)의 의약품 각 조에 중금속, 잔류농약, 잔류이산화황 및 곰팡이독소의 기준 및 시험방법을 별도로 정한 품목의 경우에는 그 기준 및 시험방법을 따른다.

제2장 생약 등의 잔류․오염물질 기준 및 시험방법

제1절 생약 등의 중금속 기준 및 시험방법

제3조(적용대상) (생  략)

1. ～ 4. (생  략)

5. 생약만을 주성분으로 하는 제제

제4조(기준) ① ～ ④ (생  략)

⑤ 생약만을 주성분으로 하는 제제는 중금속 30 mg/kg 이하, 납 5 mg/kg 이하, 비소 3 mg/kg 이하이다. 다만, 광물성 생약을 함유하는 외용제는 제외한다.

제5조(시험방법) (생  략)

제2절 생약 등의 잔류농약 기준 및 시험방법

제6조(적용대상) 생약 등의 잔류농약 기준 및 시험방법은 생약 및 그 추출물에 적용한다. 다만, 별표 3에 해당되는 생약은 적용범위에서 제외한다.

<신  설>

제7조·제8조 (생  략)

제3절 생약 등의 잔류이산화황 기준 및 시험방법

제9조 ∼ 제11조 (생  략)

제4절 생약의 곰팡이독소 기준 및 시험방법

제12조 ∼ 제14조 (생  략)

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

제15조(재검토기한) 「훈령․예규 등의 발령 및 관리에 관한 규정」(대통령훈령 제248호)에 따라 이 고시 발령후의 법령이나 현실여건의 변화 등을 검토하여 이 고시의 폐지, 개정 등의 조치를 하여야 하는 기한은 2012년 8월 24일까지로 한다.

[별표 2] 생약 등의 중금속 시험방법(제5조 관련)

1. 납, 비소, 카드뮴

1) (생  략)

(1) (생  략)

(2) (생  략)

2) (생  략)

2 ～ 3. (생  략)

제1장 총칙

제1조(목적) --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------, 곰팡이독소 및 벤조피렌의 -----------------------------------------------------------.

제2조(일반원칙) 「대한약전」(식품의약품안전청 고시)-----------------------------------------------------------------------, 곰팡이독소 및 벤조피렌의 ---------------------------------------------------------.

<삭  제>

제2장 생약 등의 중금속 기준 및 시험방법

제3조(적용대상) (현행과 같음)

1. ～ 4. (현행과 같음)

5. 생약만을 주성분으로 하는 제제(광물성 생약을 함유하는 외용제는 제외)

제4조(기준) ① ～ ④ (현행과 같음)

⑤ ------------------------------------------------------------------------------------ <단서 삭제>

제5조(시험방법) (현행과 같음)

제3장 생약 등의 잔류농약 기준 및 시험방법

제6조(적용대상) ① -------------------------------------------------------------------------------------------------------

② 원료 생약에 대하여 직접 검사한 생약의 추출물의 경우에는 검사를 생략할 수 있다.

제7조·제8조 (현행과 같음)

제4장 생약 등의 잔류이산화황 기준 및 시험방법

제9조 ∼ 제11조 (현행과 같음)

제5장 생약의 곰팡이독소 기준 및 시험방법

제12조 ∼ 제14조 (현행과 같음)

제6장 생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법

제15조(적용대상) 생약의 벤조피렌 기준 및 시험방법은 다음 각 호의 생약에 대하여 적용한다.

1. 지황

2. 숙지황

제16조(기준) 벤조피렌[Benzo(a)pyrene]으로서 5 μg/kg 이하이다.

제17조(시험방법) 생약의 벤조피렌 시험방법은 별표 10을 따른다.

제18조(재검토기한) ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 2013년 10월 29일까지로 한다.

[별표 2] 생약 등의 중금속 시험방법(제5조 관련)

1. 납, 비소, 카드뮴

가. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

2 ～ 3. (현행과 같음)

[별표 3] 생약 등의 잔류농약 기준 및 시험방법의 적용범위에서 제외되는 품목(제6조 관련)

연번	생약명	연번	생약명	연번	생약명	연번	생약명
1	건칠	29	몰약	57	용뇌	85	트라가칸타
2	곤포	30	소합향	58	유향	86	혈갈
3	교이	31	아선약	59	장뇌	87	호동루
4	노회	32	아위	60	죽력	88	흑사당
5	등황	33	안식향	61	천축황	89	저담
6	계내금	34	백화사	62	아교	90	전갈
7	귀판	35	별갑	63	어교	91	제조
8	노봉방	36	사담	64	영양각	92	지룡
9	녹각	37	사세	65	영와	93	진주
10	녹각교	38	사향	66	오공	94	천산갑
11	녹용	39	상표초	67	오령지	95	합개
12	녹용절편	40	석결명	68	오배자	96	해구신
13	누고	41	석룡자	69	와릉자	97	해마
14	동충하초	42	석연	70	용골	98	해분
15	맹충	43	선퇴	71	우담	99	해삼
16	모려	44	섬서	72	우황	100	해표초
17	문합	45	섬수	73	웅담	101	한수석
18	반묘	46	수질	74	자충	102	해부석
19	백강잠	47	야명사	75	잠사	103	현정석
20	경분	48	석고	76	웅황	104	화예석
21	금박	49	석유황	77	은박	105	활석
22	노감석	50	석종유	78	자석	106	주사수비
23	녹반	51	수은	79	자석영
24	대자석	52	양기석	80	자연동
25	동청	53	연단	81	자황
26	망초	54	영사	82	적석지
27	밀타승	55	요사	83	주사
28	백반	56	운모	84	청몽석

[별표 3] 생약 등의 잔류농약 기준 및 시험방법의 적용범위에서 제외되는 품목(제6조 관련)

연번	생약명	연번	생약명	연번	생약명	연번	생약명
1	건칠	28	백강잠	55	연단	82	전갈
2	경분	29	백반	56	영사	83	제조
3	계내금	30	백화사	57	영양각	84	주사
4	곤포	31	별갑	58	영와	85	주사수비
5	교이	32	사담	59	오공	86	죽력
6	귀판	33	사세	60	오령지	87	지룡
7	금박	34	사향	61	오배자	88	진주
8	노감석	35	상표초	62	와릉자	89	천산갑
9	노봉방	36	석결명	63	요사	90	천축황
10	노회	37	석고	64	용골	91	청몽석
11	녹각	38	석룡자	65	용뇌	92	침향
12	녹각교	39	석연	66	우담	93	트라가칸타
13	녹반	40	석유황	67	우황	94	한수석
14	녹용	41	석종유	68	운모	95	합개
15	녹용절편	42	선퇴	69	웅담	96	해구신
16	누고	43	섬서	70	웅황	97	해마
17	대자석	44	섬수	71	유향	98	해부석
18	동청	45	소합향	72	은박	99	해분
19	동충하초	46	수은	73	자석	100	해삼
20	등황	47	수질	74	자석영	101	해표초
21	망초	48	아교	75	자연동	102	현정석
22	맹충	49	아선약	76	자충	103	혈갈
23	모려	50	아위	77	자황	104	호동루
24	몰약	51	안식향	78	잠사	105	호박
25	문합	52	야명사	79	장뇌	106	화예석
26	밀타승	53	양기석	80	저담	107	활석
27	반묘	54	어교	81	적석지	108	흑사당

[별표 4]생약(별표3의 생약 제외) 및 생약의 추출물의 잔류농약 기준(제7조제1항 관련)

1. 갈근 (생  략)

2. 감초

1) ～ 8) (생  략)

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

3. 강활, 결명자, 괄루근, 당삼, 방풍, 사삼, 상지, 석창포, 오수유, 우슬, 원지, 절패모, 지실, 창이자, 향부자, 현초

1) ～ 6) (생  략)

4. ～ 10. (생  략)

11. 당귀

1) ～ 12) (생  략)

<신  설>

<신  설>

12. ～ 25. (생  략)

<신  설>

26. 산수유, 산초, 진피, 차전자

1) ～ 6) (생  략)

27. ～ 35. (생  략)

<신  설>

36. 작약

1) ～ 17) (생  략)

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

37. ～ 38. (생  략)

<신  설>

39. 창출(생  략)

40. 천궁

1) ～ 9) (생  략)

<신  설>

41. ～ 42. (생  략)

<신  설>

43. ～47. (생  략)

48. 홍화자

1) ～ 13) (생  략)

<신  설>

49. ～ 53. (생  략)

[별표 4]생약(별표3의 생약 제외) 및 생약의 추출물의 잔류농약 기준(제7조제1항 관련)

1. 갈근 (현행과 같음)

2. 감초

1) ～ 8) (현행과 같음)

9) 아세타미프리드(Acetamiprid) : 0.1 mg/kg 이하

10) 이미다크로프리드(Imidacloprid) : 0.1 mg/kg 이하

11) 클로로타로닐(Chlorothalonil) : 0.05 mg/kg 이하

12) 티아메톡삼(Thiamethoxam) : 0.1 mg/kg 이하

13) 펜피록시메이트(Fenpyroxymate) : 0.1 mg/kg 이하

14) 피메트로진(Pymetrozine) : 0.5 mg/kg 이하

3. 강활

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔도설판(Endosulfan : α,β-엔도설판 및 엔도설판설페이트의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

7) 옥솔린산(Oxolinic acid) : 7.0 mg/kg 이하

4. 결명자----------------------------------------------------------------------------------

1) ～ 6) (현행과 같음)

5. ～ 11. (현행 4.～10.과 같음)

12. 당귀

1) ～ 12) (현행과 같음)

13) 세톡시딤(Sethoxydim) : 0.2 mg/kg 이하

14) 플루아지포프-부틸(Fluazifop-butyl) : 0.3 mg/kg 이하

13. ～ 26. (현행 12.～25.와 같음)

27. 산수유

1) 총디디티(DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 메톡시클로르(Methoxychlor) : 1 mg/kg 이하

4) 총비에이치씨(BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

5) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

7) 마이클로부타닐(Myclobutanil) : 2.0 mg/kg 이하

8) 트리포린(Triforine) : 0.2 mg/kg 이하

9) 트리프루미졸(Triflumizole) : 0.2 mg/kg 이하

10) 헥사코나졸(Hexaconazole) : 0.3 mg/kg 이하

28. 산초-------------

1) ～ 6) (현행과 같음)

29. ～ 37. (현행 27. ～ 35.와 같음)

38. 자근

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 티플루자마이드(Thifluzamide) : 1.0 mg/kg 이하

7) 펜시쿠론(Pencycuron) : 1.0 mg/kg 이하

8) 헥사코나졸(Hexaconazole) : 0.2 mg/kg 이하

39. 작약

1) ～ 17) (현행과 같음)

18) 디치아논(Dithianon) : 0.3 mg/kg 이하

19) 아족시스트로빈(Azoxystrobin) : 0.1 mg/kg 이하

20) 카두사포스(Cadusafos) : 0.01 mg/kg 이하

21) 터부포스(Tebufos) : 0.05 mg/kg 이하

22) 티람(Thiram) : 0.2 mg/kg 이하

23) 페나리몰(Fenarimol) : 0.1 mg/kg 이하

24) 포스치아제이트(Fosthiazate) : 0.01 mg/kg 이하

25) 프로클로라즈(Prochloraz) : 0.1 mg/kg 이하

40. ～ 41. (현행 37. ～ 38.과 같음)

42. 지황

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 디페노코나졸(Difenoconazole) : 0.3 mg/kg 이하

7) 이민옥타딘(Iminoctadine) : 0.1 mg/kg 이하

8) 크레속심메칠(Kresoxim-methyl) : 0.1 mg/kg 이하

9) 티람(Thiram) : 0.5 mg/kg 이하

10) 피리메타닐(Pyrimethanil) : 0.2 mg/kg 이하

43. 창출(현행과 같음)

44. 천궁

1) ～ 9) (현행과 같음)

10) 터부펜피라드(Tebufenpyrad) : 0.1 mg/kg 이하

45. ～ 46. (현행 41. ～ 42.와 같음)

47. 한인진

1) 총디디티(총DDT : p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT 및 p,p'-DDT의 합계) : 0.1 mg/kg 이하

2) 디엘드린(Dieldrin) : 0.01 mg/kg 이하

3) 총비에이치씨(총BHC : α,β,γ및 δ-BHC의 합계) : 0.2 mg/kg 이하

4) 알드린(Aldrin) : 0.01 mg/kg 이하

5) 엔드린(Endrin) : 0.01 mg/kg 이하

6) 이미다크로프리드(Imidacloprid) : 1.0 mg/kg 이하

48. ～ 52 (현행 43. ～ 47.과 같음)

53. 홍화자

1) ～ 13) (현행과 같음)

14) 펜피록시메이트(Fenpyroxymate) : 0.2 mg/kg 이하

54. ～ 58 (현행 49. ～ 53.과 같음)

[별표 5] 생약 등의 잔류농약 시험방법(제8조 제1항 관련)

1. 나프로파마이드(Napropamide), 디디티(p,p'-DDD, p,p'-DDE, o,p'-DDT, 및p,p'-DDT), 디엘드린(Dieldrin), 마이클로부타닐(Myclobutanil), 메톡시클로르(Methoxychlor), 비에치씨(α, β, γ, 및 δ-BHC), 비펜스린(Bifenthrin), 싸이퍼메쓰린(Cypermethrin), 싸이프로디닐(Cyprodinil), 아세타미프리드(Acetamiprid), 아족시스트로빈(Azoxystrobin), 알드린(Aldrin), 엔도설판(α, β-Endosulfan 및 Endosulfan sulfate), 엔드린(Endrin), 치노메치오네이트(Chinomethionat), 캡탄(Captan), 퀸토젠[Quintozene (PCNB)], 클로로타로닐(Chlorothalonil), 클로르피리포스(Chlorpyrifos), 클로르훼나피르(Chlorfenapyr), 터부코나졸(Tebuconazole), 토릴플루아니드(Tolylfluanid), 트리아디메놀(Triadimenol), 트리아디메폰(Triadimefon), 트리프루미졸(Triflumizole), 페나리몰(Fenarimol), 펜디메타린(Pendimethalin), 펜프로파스린(Fenpropathrin), 포스치아제이트(Fosthiazate), 프로시미돈(Procymidone), 후루디옥소닐(Fludioxonil)

1) (생  략)

2) (생  략)

가) ～ 사) (생  략)

3) 시험용액의 조제

가) 추출 : (생  략)

나) 정제 : 미리 후로리실 카트리지(6 mL, 1 g)에 헥산 6 mL를 넣고 2분간 멈춘 다음 유출시켜 버리고, 이 카트리지에 20 % 아세톤 함유 헥산 6 mL를 위와 같은 방법으로 유출하여 버린다. 이어서 추출액을 카트리지 상단에 넣고 2분간 컬럼에 머무르게 한 다음 서서히 유출액을 받는다. 카트리지가 용매에 젖어 있는 상태에서 헥산․디클로로메탄․아세톤 (50:48.5:1.5) 5 mL로 유출하여 유출액을 모은다. 유출액은 수욕상(40 ℃ 이하)에서 감압농축시켜 용매를 날려 보낸 다음 20 % 아세톤 함유 헥산 2 mL에 녹여 시험용액으로 한다.

4) 시험조작

가) (생  략)

(1) (생  략)

(가) ․ (나) (생  략)

(다) (생  략)

(다) (생  략)

(라) (생  략)

(2) (생  략)

(가) ～ (마) (생  략)

(3) (생  략)

(가) ～ (바) (생  략)

나) 정성시험

(1) 칼럼충전제 2개 이상을 선정하여 표준용액 및 시험용액을 가스크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

(2) (생  략)

다) (생  략)

2. 메티람 (Metiram), 티람 (Thiram) 및 프로피네브 (Propineb)

1) (생  략)

2) 시약 및 시액

가) ․ 나) (생  략)

다) 표준원액: 티람(thiram) 표준품은 메탄올에 녹이고, 메티람(metiram)과 프로피네브(propineb) 표준품은 시료 추출용매(0.25 M EDTA가 함유된 0.45 M NaOH 수용액 100 mL에 L-cysteine․HCl 0.5 g이 첨가된 액/2 M 염산을 사용하여 pH를 7.0으로 조절)로 완전히 용해시켜 100 mg/L 농도로 만들어 즉시 사용한다.

라) (생  략)

마) 기타시약: methyl iodide, tetrabutyl ammonium hydrogen sulfate, EDTA(tetra sodium), L-cysteine․HCl 등 잔류농약시험용 또는 특급시약

3) 시험용액의 조제

가) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 20 g을 정밀히 달아 삼각플라스크에 넣는다. 0.25 M EDTA가 함유된 0.45 M NaOH 수용액(pH를 9.5 ～ 9.6으로 정밀조정) 80 mL에 L- cysteine․HCl 0.5 g을 넣고 마개를 하여 즉시 진탕기에서 10분간 흔들어 추출한다. 이를 유리여과기로 여과하고 삼각플라스크와 잔사를 위 추출용매 10 mL씩으로 수회 씻어 여액과 합친다. 여기에 0.41 M tetrabutyl ammonium hydrogen sulfate 수용액 5 mL 및 NaCl 10 g을 넣어 잘 흔들어 섞고 2 M HCl을 사용하여 pH를 7.0 부근으로 신속히 조절하고 이를 300 mL 분액깔때기에 옮긴다.

※ 주 : (생  략)

나) 유도체화: 위의 분액깔때기에 0.05 M methyl iodide가 함유되어 있는 디클로로메탄 및 헥산의 혼합액(1:1) 40 mL를 넣고 5분간 심하게 흔들어 섞은 다음 방치한다. (이하 생략)

4) (생  략)

가) (생  략)

(1) ～ (4) (생  략)

나) (생  략)

(1) (생  략)

(2) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

다) (생  략)

3. 아조싸이클로틴(Azocyclotin)

1) 장치: 가스크로마토그래프[불꽃광도검출기(FPD): 황용간섭필터]

2) (생  략)

가) ～ 마) (생  략)

사) ～ 아) (생  략)

3) (생  략)

가) ～ 다) (생  략)

4) (생  략)

가) (생  략)

(1) ～ (4) (생  략)

나) (생  략)

(1) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액 피크의 머무름시간과 일치하여야 한다.

(2) (생  략)

다) (생  략)

4. 카벤다짐(Carbendazim)

1) (생  략)

2) (생  략)

가) ～ 마) (생  략)

사) (생  략)

3) 시험용액의 조제

가) (생  략)

나) 추출(2차): 추출액을 분액깔때기에 옮기고 증류수 200 mL, 포화염화나트륨 20 mL,를 가한 후 0.1 M 염산시액으로 pH 2-3으로 조절한다. (이하 생략)

다) (생  략)

4) 시험조작

가) (생  략)

(1) · (2) (생  략)

(3) 이동상: 0.01M KH2PO4 용액․물(4∶6)

(4) ～ (5) (생  략)

나) (생  략)

(1) · (2) (생  략)

다) (생  략)

5. 디페노코나졸(Difenoconazole)

1) (생  략)

2) (생  략)

가) ～ 사) (생  략)

3) (생  략)

가) · 나) (생  략)

4) (생  략)

가) (생  략)

(1) ～ (4) (생  략)

나) (생  략)

(1) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램 상의 피크는 어느 측정조건에서도 표준용액피크의 머무름시간과 일치하여야 한다.

(2) (생  략)

다) (생  략)

6. 이미다크로프리드(Imidacloprid)

1) (생  략)

2) (생  략)

가) ～ 사) (생  략)

3) (생  략)

가) · 나) (생  략)

4) (생  략)

가) (생  략)

(1) ～ (5) (생  략)

나) (생  략)

(1) · (2) (생  략)

다) (생  략)

7. 이민옥타딘(Iminoctadine)

1) (생  략)

2) (생  략)

가) ～ 마) (생  략)

3) 시험용액의 조제

가) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 20 g을 취하여 염산구아니딘 7 g을 넣고 잘 섞는다. 메탄올 100 mL를 정확히 넣어 약 5분간 고속 균질화 한다. 추출액은 감압여과하고, 여액 중 50 mL를 정확하게 취하여 2 M NaOH 50 mL, 물 50 mL 및 클로로포름 100 mL를 넣어 2분간 3회 분배하여 유기용매층을 취한다. 여기에 1 M H2SO4 2 mL 및 물 40 mL로 분배하여 물층을 취하고, 다시 1 M H2SO4 0.5 mL 및 물 20 mL로 분배한다. 물층을 합하여 약 70℃ 수욕상에서 약 2 mL로 농축하고, 농축액에 16% Sodium acetate 수용액을 가하여 5 mL로 한다.

4) (생  략)

가) (생  략)

(1) · (2) (생  략)

(3) 이동상 :  A - 물․28 % 암모니아수(69 : 1)혼합액(pH 2.5/60 % HClO4로 조정)

B - (생  략)

(4) ～ (6) (생  략)

(7) Post Reaction Pump 유량: 0.7 mL/분(0.5 M NaOH 0.7 mL/분, 0.15% Ninhydrin 0.7 mL/분)(또는 기타 최적조건)

(8) (생  략)

나) (생  략)

(1) · (2) (생  략)

다) (생  략)

8. 피메트로진(Pymetrozine)

1) (생  략)

2) 시약 및 시액

가) · 나) (생  략)

다) 카트리지: ENVI-Carb Sep-Pak 카트리지, 250 mg

라) ～ 사) (생  략)

3) 시험용액의 조제

가) (생  략)

나) 정제 : 메탄올 5 mL와 증류수 5 mL로 미리 활성화 시킨 그라파이트카본계카트리지컬럼(ENVI-Carb Sep-Pak 카트리지, 250 mg)에 추출액을 흡착시킨 다음 메탄올․증류수(5∶5) 5 mL와 메탄올․아세토니트릴(7∶3) 5 mL 그리고 에칠아세테이트 5 mL를 유출시켜 불순물을 제거시킨다. (이하 생략)

4) (생  략)

가) (생  략)

(1) ～ (4) (생  략)

나) (생  략)

(1) ～ (2) (생  략)

다) (생  략)

9. 티아메톡삼(Thiamethoxam)

1) (생  략)

2) 시약 및 시액

가) ～ 나) (생  략)

다) 실리카카트리지: SPE용 또는 이와 동등한 것(실리카겔(1 g) 고정상이 충전되어 있는 카트리지(Silica sep- pack, 용량 6 mL))

라) ～ 사) (생  략)

3) 시험용액의 조제

가) (생  략)

나) 정제: silica sep-pack 카트리지에 추출액을 흡착시키고 헥산․아세톤(90∶10) 10 mL를 유출시켜 버린다. (이하 생략)

4) (생  략)

가) (생  략)

(1) ～ (5) (생  략)

나) (생  략)

(1) ․ (2) (생  략)

다) (생  략)

10. 트리포린(Triforine)

1) (생  략)

2) (생  략)

가) ～ 마) (생  략)

사) (생  략)

3) (생략)

가) ～ 나) (생략)

4) (생략)

가) (생략)

(1) ～ (5) (생략)

나) (생략)

(1) ～ (2) (생략)

다) (생략)

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

<신  설>

[별표 5] 생약 등의 잔류농약 시험방법(제8조 제1항 관련)

1. ------------------------------------------------------------------------------- 마이클로부타닐(Myclobutanil), 메칠펜타클로로페닐설파이드(Methyl-pentachlorophenyl sulfide),---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------치노메치오네이트(Chinomethionat), 카두사포스(Cadusafos),------------------퀸토젠[Quintozene (PCNB)], 크레속심메칠(Kresoxim-methyl),---------------------터부코나졸(Tebuconazole), 터부펜피라드(Tebufenpyrad), 터부포스(Tebufos),-----------------------------트리프루미졸(Triflumizole), 티플루자마이드(Thifluzamide),--펜디메타린(Pendimethalin), 펜타클로로아닐린(Pentachloroaniline),-------프로시미돈(Procymidone), 프로클로라즈(Prochloraz), 피리메타닐(Pyrimethanil), 헥사코나졸(Hexaconazole), 후루디옥소닐(Fludioxonil)

가. (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

1) ～ 7) (현행과 같음)

다. 시험용액의 조제

1) 추출 : (현행과 같음)

2) 정제 : --------------------- ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------헥산․디클로로메탄․아세톤 (50∶48.5∶1.5)(프로클로라즈(Prochloraz) 및 티플루자마이드(Thifluzamide)의 경우에는 아세톤․헥산 (3∶7)으로 한다.) -----------------------------------------------------------.

라. 시험조작

1) (현행과 같음)

가) (현행과 같음)

(1) ․ (2) (현행과 같음)

(3) (현행과 같음)

(4) (현행과 같음)

(5) (현행과 같음)

나) (현행과 같음)

(1) ～ (5) (현행과 같음)

다) (현행과 같음)

(1) ～ (6) (현행과 같음)

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 ----------------------------------------------------------------------------------------------------.

나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

2. 메티람 (Metiram), 티람 (Thiram) 및 프로피네브 (Propineb)

가. (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

1) ․ 2) (현행과 같음)

3) ------------------------------------------------------------------------------------------------mol/L EDTA(disodium)------- mol/L-------------------------------------------------- mol/L------------------------------------------------------------------------------.

4) (현행과 같음)

5) -----------------------------------------------------EDTA(disodium),----------------------------------------------

다. (현행과 같음)

1) ----------------------------------------------------------------------------mol/L EDTA(disodium)------mol/L ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------mol/L ---------------------------------------------------------------------------mol/L--------------------------------------------------------------------.

※ 주 : (현행과 같음)

2) ---------------------------mol/L-------------------------------------------------------------------------------------------------. (이하 현행과 같음)

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) ～ 라) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) (현행과 같음)

나) --------------------------------------------- 각 농약의 성분을 확인------------.

3) (현행과 같음)

3. (현행과 같음)

가. --------------------불꽃광도검출기(FPD)-

나. (현행과 같음)

1) ～ 5) (현행과 같음)

6) ～ 7) (현행과 같음)

다. (현행과 같음)

1) ～ 3) (현행과 같음)

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) ～ 라) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

4. 카벤다짐(Carbendazim)

가. (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

1) ～ 5) (현행과 같음)

6) (현행과 같음)

다. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

2) ----------------------------------------------------------------------------- 10 %----------------------------. (이하 현행과 같음)

3) (현행과 같음)

라. 시험조작

1) (현행과 같음)

가) · 나) (현행과 같음)

다) 이동상: 0.01M KH2PO4 용액․메탄올(6∶4)

라) ～ 마) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) · 나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

5. (현행과 같음)

가. (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

1) ～ 7) (현행과 같음)

다. (현행과 같음)

1) · 2) (현행과 같음)

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) ～ 라) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

6. (현행과 같음)

가. (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

1) ～ 7) (현행과 같음)

다. (현행과 같음)

1) · 2) (현행과 같음)

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) ～ 마) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) · 나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

7. 이민옥타딘(Iminoctadine)

가. (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

1) ～ 5) (현행과 같음)

다. 시험용액의 조제

1) ------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- mol/L ------------------------------------------------------------------------------------- mol/L ------------------------------------------------- mol/L---------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------.

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) · 나) (현행과 같음)

다) 이동상: A - -------------------------60 % HClO4로 pH 2.5로 ----

B - (현행과 같음)

라) ～ 바) (현행과 같음)

사) -------------------------------0.5 mol/L NaOH------------------------------------------------

아) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) · 나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

8. 피메트로진(Pymetrozine)

가. (현행과 같음)

나. 시약 및 시액

1) · 2) (현행과 같음)

3) 카트리지: 흑연화탄소(graphitized carbon) 250 mg이 충전되어 있는 카트리지 (용량 6 mL)

4) ～ 7) (현행과 같음)

다. 시험용액의 조제

1) (현행과 같음)

2) 정제 : --------------------- ------------------------------------------(250 mg, 6 ml)------------------------------------- -----------------------------------------------------------------------------------------------------. (이하 현행과 같음)

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) ～ 라) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) ～ 나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

9. 티아메톡삼(Thiamethoxam)

가. (현행과 같음)

나. 시약 및 시액

1) ～ 2) (현행과 같음)

3) 실리카카트리지: 실리카겔(1 g)이 충전되어 있는 카트리지(용량 6 mL)

4) ～ 7) (현행과 같음)

다. 시험용액의 조제

1) (현행과 같음)

2) 정제: 실리카카트리지에 ------- -------------------------------------------------------. (이하 현행과 같음)

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) ～ 마) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) ․ 나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

10. 트리포린(Triforine)

가. (현행과 같음)

나. (현행과 같음)

1) ～ 5) (현행과 같음)

6) (현행과 같음)

다. (현행과 같음)

1) ～ 2) (현행과 같음)

라. (현행과 같음)

1) (현행과 같음)

가) ～ 마) (현행과 같음)

2) (현행과 같음)

가) ～ 나) (현행과 같음)

3) (현행과 같음)

11. 디치아논(Dithianon)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 실리카겔: 칼럼크로마토그래프용 실리카겔(60 ～ 100 mesh)

4) 표준원액: 디치아논을 5 % 아세트산이 함유된 아세톤에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 5 % 아세트산이 함유된 아세톤에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 20 g을 취하여 4 mol/L 염산 5 mL 및 아세톤 100 mL를 넣고 30 분간 진탕추출한다. 추출액을 셀라이트 545를 이용하여 진공펌프와 가지 달린 삼각플라스크 및 부크너깔때기로 감압여과 한다. 여액을 40 ℃ 이하에서 감압농축하여 아세톤을 제거하고 5 % 식염수 50 mL 및 헥산 50 mL를 이용하여 분액깔대기에 옮기고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(물층)을 다른 분액깔때기에 옮기고 헥산 50 mL를 넣어 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 헥산층을 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 디클로로메탄 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 내경 14 mm, 길이 400 mm의 유리컬럼에 실리카겔(60～100 mesh) 5 g과 무수황산나트륨을 2 g을 충전시켜 헥산 50 mL를 유출시켜 버린 다음 추출액 5 mL를 흡착시킨다. 벤젠 50 mL로 유출하여 유츌액을 모아 감압 농축시킨 다음 아세토니트릴 1 ml 에 녹인다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 실온(30 ℃)

다) 이동상: 메탄올․물․아세트산 (7∶3∶0.1)

라) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 254 nm

마) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

12. 펜피록시메이트(Fenpyroximate)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 후로리실: 칼럼크로마토그라피용 후로리실을 130 ℃에서 하룻밤 가열한 다음 데시케이터에서 식힌다.

4) 표준원액: 펜피록시메이트를 아세톤에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 아세톤에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 20 g을 취하여 70 % 아세톤 100 mL를 넣고 30 분간 진탕추출한다. 추출액을 셀라이트 545를 이용하여 진공펌프와 가지 달린 삼각플라스크 및 부크너깔대기로 감압여과 한다.  여액을 40 ℃ 이하에서 감압농축하여 아세톤을 제거하고 5 % 식염수 50 mL 및 헥산 50 mL를 이용하여 분액깔대기에 옮기고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(물층)은 다른 분액깔때기에 옮기고, 여기에 헥산 50 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 헥산층을 모두 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 디클로로메탄 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 내경 14 mm, 길이 400 mm의 유리컬럼에 후로리실 5 g과 무수황산나트륨을 2 g을 충전시켜 디클로로메탄 30 mL를 유출시켜 버린 다음 추출액 5 mL을 흡착시킨다. 디클로로메탄․아세트산에틸(98∶2) 150 mL로 유출하여 유츌액을 모아 감압 농축시킨 다음 아세토니트릴 1 ml 에 녹인다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 실온(30 ℃)

다) 이동상: 아세토니트릴․물(9∶1)

라) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 254 nm

마) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

13. 세톡시딤(Sethoxydim)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 실리카카트리지: 실리카겔(500 mg)이 충전되어 있는 카트리지(용량 6 mL)

4) 표준원액: 세톡시딤을 메탄올에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 메탄올에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 후 약 10 g을 달아 80 % 메탄올 100 mL를 넣고 한 시간 동안 심하게 흔들어 추출한 후 진공펌프와 가지 달린 삼각플라스크 및 부크너깔때기로 감압여과 한다. 이 여액을 감압농축하여 메탄올을 제거한 후 분액깔때기에 옮기고 포화식염수 50 mL와 증류수 200 mL를 가한다. 이에 디클로로메탄 70 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄층)은 다른 분액깔때기에 모으고, 물층에 다시 디클로로메탄 50 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 후 정치하여 층을 분리시킨 다음 디클로로메탄층을 모은다. 디클로로메탄층은 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 헥산․에칠아세테이트 (95：5) 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 미리 실리카 카트리지(6 mL, 500 mg)에 헥산 6 mL를 넣고 2분간 멈춘 다음 유출시켜 버리고, 이 카트리지에 헥산․에칠아세테이트 (95：5) 6 mL를 위와 같은 방법으로 유출하여 버린다. 이어서 추출액을 카트리지 상단에 넣고 2분간 컬럼에 머무르게 한 다음 서서히 유출시켜 버린다. 카트리지가 용매에 젖어 있는 상태에서 헥산․아세톤 (9∶1) 5 mL로 유출하여 유출액을 모은다. 유출액은 수욕상(40 ℃ 이하)에서 감압농축시켜 용매를 날려 보낸 다음 메탄올 2 mL에 녹여 시험용액으로 한다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 이동상: 메탄올․물(7∶1)

다) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 280 nm

라) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

14. 플루아지포프-부틸(Fluazifop-butyl)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 후로리실: 칼럼크로마토그래프용 후로리실

4) 표준원액: 플루아지포프-피-부틸을 아세토니트릴에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

5) 표준용액: 표준원액을 아세토니트릴에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

6) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 10 g을 취하여  아세토니트릴 100 mL를 넣고 약 3 분간 고속 균질화한다. 추출액을 셀라이트 545를 이용하여 부크너깔때기로 감압여과 한다. 여액을 포화식염수 100 mL와 증류수 400 mL가 들어있는 분액여두에 옮기고,  디클로로메탄 50 mL를 가하여 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄)을 다른 분액깔때기에 옮기고 물층에 다시 디클로로메탄 50 mL를 넣어 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 디클로로메탄을 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 n-hexane․dichloromethane․acetonitrile (49.65∶50∶0.35) 5 mL에 녹인다.

2) 정제: 안지름 20 mm, 길이 30 mm 유리칼럼에 후로리실 10 g과 무수황산나트륨 2 g을 헥산으로 충전하고 헥산 50 mL로 컬럼을 세척한다. 추출액을 칼럼에 넣어 흡착시킨 다음 n-hexane․dichloromethane․acetonitrile (48.5∶50∶1.5) 70 mL로 유출하여 유출액을 모은다. 유출액을 수욕상(40 ℃ 이하)에서 감압농축하여 건고시킨 다음 아세토니트릴 2 mL에 녹여 시험용액으로 한다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 40 ℃

다) 이동상: 아세토니트릴․0.1 % 포름산 (70∶30)

라) 검출기 파장: 자외부흡광광도검출기 UV 225 nm

마) 유속: 1.0 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

15. 옥솔린산(Oxolinic acid)

가. 장치: 고속액체크로마토그래프[자외부흡광광도검출기(UV-Detector) 또는 형광검출기]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 표준원액: 옥솔린산을 0.25 mol/L 수산화나트륨․메탄올(10:90)에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

4) 표준용액: 표준원액을 메탄올에 녹여 적당한 농도로 희석한다.

5) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 다음 약 10 g을 취하여 물 30 mL와 5 mol/L 염산 5 mL를 첨가한 후 30분간 방치한다. 아세톤 100 mL를 가하여 약 5분간 고속균질화한 후 감압여과한다. 여액을 포화식염수 50 mL와 증류수 450 mL가 들어있는 분액여두에 옮기고,  헥산 100 mL를 가하여 흔들어 섞은 다음 정치하여 헥산층을 버리고, 물 층에 디클로로메탄 70 mL를 가하여 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄)을 다른 분액깔때기에 옮기고 물층에 다시 디클로로메탄 70 mL를 넣어 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 디클로로메탄을 모아 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 0.01 mol/L 옥살산․아세토니트릴․메탄올 (60∶30∶10) 10 mL에 녹인다.

라. 시험조작

1) 고속액체크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스 강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴화한 실리카겔을 충전한다.

나) 칼럼온도: 40 ℃

다) 이동상: 0.01 mol/L 옥살산․아세토니트릴․메탄올 (60∶30∶10)

라) 검출기 파장: 형광검출기 여기파장 330 nm, 형광파장 365nm 또는 자외부흡광광도검출기 UV 360 nm

마) 유속: 0.8 ml/분

2) 정성시험

가) 위의 조건으로 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) LC/MS/MS를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

16. 펜시쿠론(Pencycuron)

가. 장치: 가스크로마토그래프[질소․인 검출기(NPD)]

나. 시약 및 시액

1) 용매: 잔류농약 시험용 또는 이와 동등한 것

2) 물: 증류수 또는 이와 동등한 것

3) 후로리실(Florisil): 칼럼크로마토그래피용 후로리실(60～100 mesh)을 130 ℃에서 하룻밤 가열한 후 데시케이터에서 식힌다.

4) 여과보조제: 셀라이트 545 (celite 545)

5) 표준원액: 펜시쿠론을 아세톤 등에 녹여 100 mg/kg으로 만든다.

6) 표준용액: 표준원액을 각각 아세톤에 녹여 적당한 농도로 혼합․희석한다.

7) 기타시약: 잔류농약 시험용 또는 특급

다. 시험용액의 조제

1) 추출: 시료(500 ～ 600 g)를 잘 분쇄한 후 약 20 g을 달아 아세톤 80 mL를 넣고 균질기(homogenizer)로 5분간 균질화한 후 진공펌프와 가지 달린 삼각플라스크 및 부크너깔때기로 감압여과 한다. 이 여액을 500 mL 분액깔때기에 옮기고 포화 식염수 50 mL와 증류수 450 mL를 가한다. 이에 디클로로메탄 60 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 다음 정치하여 층을 분리시킨다. 아래층(디클로로메탄층)은 다른 분액깔때기에 모은다. 물층에 다시 디클로로메탄 60 mL를 넣고 심하게 흔들어 섞은 후 정치하여 층을 분리시킨 다음 아래층(디클로로메탄층)을 모은다. 디클로로메탄층은 무수황산나트륨을 통과시켜 탈수하고 감압농축기에 넣어 농축한 다음 헥산 10 mL에 녹인다.

2) 정제: 안지름 20 mm, 길이 30 mm 유리칼럼에 후로리실 10 g을 헥산으로 충전하고 헥산 50 mL를 유출시킨 후 농축액을 넣는다. 5 % 아세톤 함유 헥산 50 mL를 유출시켜 버리고, 15 %아세톤 함유 헥산 60 mL로 유출하여 유출액을 모은다. 유출액을 수욕상(40 ℃ 이하)에서 감압농축하여 건고시킨 후 잔류물을 아세톤 1 mL에 녹인다.

3) 유도체화 : 위의 용액에 디메틸설폭사이드 0.5 mL를 넣고 여기에 수소화나트륨 약 0.2 g 및 요오드화메틸 0.5 mL를 넣어 마개를 하여 때때로 흔들면서 30 ℃에서 30 분간 방치한다. 이에 헥산 5 mL를 넣고 약 1분간 심하게 흔들어 섞은 다음 증류수 10 mL를 서서히 방울로 넣어 수소가스의 발생이 그친 후, 소량의 헥산과 증류수를 이용하여 분액깔때기로 옮기고 5 분간 심하게 흔들어 섞는다. 헥산층을 무수황산나트륨 칼럼에 통과시켜 탈수하고 다시 칼럼을 헥산 약 20 mL로 씻은 다음 이를 40 ℃ 이하의 수욕상에서 감압하에 날려 버린 후 잔류물을 헥산에 녹여서 일정량으로 한 후 시험용액으로 한다.

라. 시험조작

1) 가스크로마토그래프의 측정조건

가) 칼럼: 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의 규산유리제 캐필러리 칼럼관에 가스크로마토그래프용 5 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께로 코팅한 것, 안지름 0.25 mm, 길이 30 m의 규산유리제 캐필러리 칼럼관에 가스크로마토그래프용 50 % 페닐, 50 % 메칠실리콘을 0.25 μm의 두께로 코팅한 것 또는 이와 동등한 것

나) 캐리어가스 및 유량: 질소, 1.0 mL/분

다) 칼럼온도: 230 ℃

라) 주입부온도: 250 ℃, split mode(10∶1)

마) 검출기온도: 280 ℃

2) 정성시험

가) 칼럼충전제 2개 이상을 선정하여 표준용액 및 시험용액을 가스크로마토그래프에 각각 주입한다. 얻어진 크로마토그램상의 각 피크를 표준용액의 피크와 비교할 때 어느 측정조건에서도 그 머무름시간이 일치하여야 한다.

나) GC-MSD 검출기를 이용하여 머무름시간 및 질량스펙트럼으로 각 농약의 성분을 확인할 수도 있다.

3) 정량시험: 정성시험과 동일한 조건에서 얻어진 시험결과에 의해 피크높이법 또는 피크면적법에 따라 정량한다.

[별표 6 ～ 9] (생  략)

[별표 6 ～ 9] (현행과 같음)

<신  설>

[별표 10] 생약의 벤조피렌 시험방법(제17조 관련)

이 약 500 ～ 600 g을 분쇄하거나 잘게 잘라 균질하게 혼합하여 약 5.0 g을 정밀하게 달아 물 100 mL를 넣어 90 분간 초음파 추출한다. 여기에 헥산 약 100 mL 및 내부표준액 1 mL을 넣어 호모게나이저로 5 분간 균질하게 섞은 다음 30 분간 초음파 추출한다. 헥산층을 분액깔대기에 옮기고 다시 물층에 헥산 약 50 mL씩을 넣고 2회 반복하여 진탕 추출한 후 헥산층을 취하여 분액깔대기에 합한다. 합한 헥산층에 물 약 50 mL를 넣어 세척하고, 이 헥산층을 무수황산나트륨을 넣은 여과지를 사용하여 탈수 여과한 다음 45 ℃의 수욕상에서 감압 (약 700 mbar)하여 헥산 약 2 mL가 될 때까지 농축한다. 플로리실카트리지는 미리 디클로로메탄 10 mL 및 헥산 20 mL를 순서대로 초당 2 ～ 3 방울의 속도로 유출시켜 활성화시킨 후 사용한다. 활성화된 카트리지에 위의 추출용액을 넣어 헥산․디클로로메탄혼합액(3 : 1) 20 mL를 초당 2 ～ 3방울의 속도로 용출시킨다. 이 용출된 액을 35 ℃이하의 수욕상에서 질소가스 하에 날려 보낸 후 잔류물을 아세토니트릴 1 mL에 녹인 다음 공경 0.45 μm이하의 멤브레인필터로 여과하여 검액으로 한다. 따로 벤조피렌표준품 및 3-메틸콜란트렌표준품 적당량을 정밀하게 달아 각각 아세토니트릴에 녹여 mL당 1 μg을 함유하는 표준원액 및 내부표준원액을 만든다. 이 표준원액 및 내부표준원액은 5 ~ 15 ℃에서 저장하며 30일 이내에 쓴다. 이 표준원액과 내부표준원액 적당량을 정확하게 취하여 아세토니트릴로 mL 당 3, 5, 10, 20 및 40 ng의 벤조피렌과 각각 50 ng의 내부표준물질이 함유되도록 희석하여 표준액으로 한다. 이때 검액의 검출농도가 검량선의 범위를 벗어나면 표준액의 농도가 검량선의 범위에 들어오도록 농도를 조정한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 표준액에서 얻은 내부표준물질 피크면적에 대한 벤조피렌의 피크면적비[AS/AIS]를 Y축으로 하고 벤조피렌의 농도를 X축으로 하여 만든 검량곡선을 작성하고, 검액의 내부표준물질 피크면적에 대한 벤조피렌의 피크면적비[ASAM/ASAMIS]를 Y축에 대입하여 벤조피렌의 농도를 구한다.

AS : 검량곡선표준용액의 표준물질 피크면적

AIS : 검량곡선표준용액의 내부표준물질 피크면적

ASAM : 시험용액의 벤조피렌 피크면적

ASAMIS : 시험용액의 내부표준물질 피크면적

내부표준액 3-메틸콜란트렌 표준품을 정밀하게 달아 아세토니트릴에 녹여 1 mL 중 50 ng을 함유하는 용액을 만든다.

시약 및 시액 본 실험에 사용한 물은 3차 증류수 이상의 것을 사용하고, 시약은 잔류농약시험용 이상의 것을 사용한다.

조작조건

검출기 : 형광검출기(여기파장 : 294 nm, 형광파장 : 404 nm)

칼럼 : Supelcosil LC-PAH (4.6 × 250 mm, 5 μm) 또는 이와 동등한 것

칼럼온도 : 37 ℃

이동상 : 아세토니트릴․물 혼합액(8 : 2)

유  량 : 1.0 mL/분