식품의약품안전청 고시 제2010 - 호

「약사법」 제51조제1항에 의한 「대한약전」(식품의약품안전청고시 제20  -  호, 20  .  .  .)을 다음과 같이 개정고시합니다.

2010년 월 일

식품의약품안전청장

대한약전 일부개정고시(안)

대한약전 일부를 다음과 같이 개정한다.

통칙 3항을 다음과 같이 개정한다.

3. 이 약전에 수재되어 있는 의약품의 적부는 의약품각조의 규정, 통칙, 제제총칙 및 일반시험법의 규정에 따라 판정한다. 다만, 의약품각조 중 색을 제외한 성상의 시성치 및 저장법에서의 보존조건은 단지 참고로 기재한 것이며 적부의 판정기준은 아니다. 그러나 생약의 경우 성상에서 색, 냄새, 맛은 적부판정의 기준이다.

의약품각조 제1부에 겐타마이신황산염, 겐타마이신황산염 점안액, 그라미시딘, 그리세오풀빈, 그리세오풀빈 정, 네오마이신황산염, 네틸마이신황산염, 니스타틴, 다우노루비신염산염, 독소루비신염산염, 독시사이클린수화물, 독시사이클린하이클레이트수화물, 디리트로마이신, 디클록사실린나트륨수화물, 록시트로마이신, 리팜피신, 리팜피신 캡슐, 린코마이신염산염수화물, 린코마이신염산염 주사액, 주사용 메로페넴, 무피로신, 무피로신칼슘수화물, 미노사이클린염산염 미토마이신 C, 바시트라신, 바시트라신아연, 바캄피실린염산염, 반코마이신염산염, 주사용 반코마이신염산염, 벤자틴페니실린 G 수화물, 블레오마이신황산염, 설박탐나트륨, 세파드록실수화물, 세파만돌나페이트, 세파졸린나트륨, 세파클러수화물, 세파클러 캡슐, 세파트리진프로필렌글리콜, 세파피린나트륨, 세팔렉신수화물, 시럽용 세팔렉신, 세팔렉신 캡슐, 세팔로틴나트륨, 세포탁심나트륨, 세포페라존나트륨, 세폭시틴나트륨, 세푸록심나트륨, 세푸록심악세틸, 세프라딘수화물, 세프타지딤수화물, 세프트리악손나트륨수화물, 세픽심수화물, 스트렙토마이신황산염, 주사용 스트렙토마이신황산염, 스펙티노마이신염산염수화물, 아목시실린수화물, 아목시실린 캡슐, 아미카신, 아미카신황산염, 아지트로마이신수화물, 암포테리신 B, 암피실린수화물, 암피실린나트륨, 에리트로마이신, 에리트로마이신락토비온산염, 에리트로마이신스테아르산염, 에리트로마이신에스톨산염, 에리트로마이신에틸숙시네이트, 에피루비신염산염, 옥시테트라사이클린염산염, 이미페넴수화물, 조사마이신프로피오네이트, 카나마이신일황산염, 카나마이신황산염, 클래리트로마이신, 클로람페니콜, 클로람페니콜숙시네이트나트륨, 클로람페니콜팔미테이트, 클록사실린나트륨수화물, 클린다마이신염산염, 클린다마이신염산염 캡슐, 클린다마이신포스페이트, 테트라사이클린염산염, 토브라마이신, 티카실린나트륨, 페니실린 G 나트륨, 페니실린 G 칼륨, 포스포마이신나트륨, 포스포마이신칼슘수화물, 폴리믹신 B 황산염, 피브메실리남염산염, 피페라실린나트륨, 주사용 피페라실린나트륨을 각각 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 규산마그네슘의 확인시험 1) 중 “아리잘린콤플렉손”을 “알리자린콤플렉손”으로 한다.

의약품각조 제1부 네오마이신황산염 연고의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  이 약 적당량을 달아 분액깔때기에 넣고 에텔 50 mL를 넣어 세게 흔들어 섞은 다음 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0) 적당량으로 추출한 액 5 mL에 닌히드린시액 1 mL 및 피리딘 0.5 mL를 넣고 10 분간 끓일 때 액은 청자색을 나타낸다.

의약품각조 제1부 네틸마이신황산염 주사액의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 니스타틴 정의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  이 약을 가루로 하여 니스타틴 10 mg에 해당하는 양을 달아 물 5 mL를 넣어 잘 흔든 다음 인몰리브덴산․텅스텐산시액 2 방울을 넣고 1 시간 방치할 때 녹색을 나타낸다.

의약품각조 제1부 니스타틴 질정의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  이 약을 가루로 하여 니스타틴 10 mg에 해당하는 양을 달아 물 5 mL를 넣어 잘 흔든 다음 인몰리브덴산․텅스텐산시액 2 방울을 넣고 1 시간 방치할 때 녹색을 나타낸다.

의약품각조 제1부 니코틴산아미드의 정량법 중 내부표준액 “니코틴산용액(1 → 1250)”을 “니코틴산용액(1 → 25000)”으로 한다.

의약품각조 제1부 독시사이클린 캡슐의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 독시사이클린하이클레이트 정의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 독시사이클린하이클레이트 캡슐의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 로키타마이신의 순도시험 2) 유연물질의 시스템적합성 중 검출의 확인에서 “검액”을 “표준액”으로 하고, 시스템의 성능에서 “표준액”을 “검액”으로 한다.

의약품각조 제1부 린코마이신염산염 캡슐의 확인시험 1) 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 메트로니다졸 정의 확인시험 1)을 다음과 같이 한다.

확인시험  1) 이 약을 가루로 하고 표시량에 따라 메트로니다졸 약 0.1 g에 해당하는 양을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액을 때때로 세게 흔들어 섞으면서 30 분간 방치한 다음 원심분리하여 상층액 1 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 275 ∼ 279 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

의약품각조 제1부 모르핀염산염수화물의 성상 및 순도시험 1) 용해상태를 다음과 같이 한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 포름산에 잘 녹으며 물에 녹고 메탄올에 조금 녹으며 에탄올에는 녹기 어렵다.

이 약은 빛에 의하여 서서히 황갈색으로 변화된다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 0.40 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 맑다. 또 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험할 때 파장 420 nm에서의 흡광도는 0.12 이하이다.

의약품각조 제1부 모르핀염산염 주사액의 성상을 다음과 같이 한다.

성    상  이 약은 무색 ∼ 옅은 황갈색의 맑은 액이다.

이 약은 빛에 의하여 서서히 황갈색으로 변화된다.

pH :  2.5 ∼ 5.0

의약품각조 제1부 무피로신 연고의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 바캄피실린염산염 정의 확인시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 반코마이신염산염 캡슐의 확인시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 베타메타손 정의 제제균일성시험 중 “이 액 5 mL를 정확하게 취해 내부표준액 20 mL를 정확하게 넣어 표준액으로 한다.”을 “이 액 5 mL를 정확하게 취해 물 5 mL 및 내부표준액 20 mL를 정확하게 넣어 표준액으로 한다.”로 한다.

의약품각조 제1부 베타메타손디프로피오네이트의 순도시험 1) 플루오르화물 중 “아리잘린콤플렉손시액”을 “알리자린콤플렉손시액”으로 한다.

의약품각조 제1부 주사용 설박탐나트륨․암피실린나트륨의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 세파드록실 정의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 시럽용 세파클러의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  정량법의 검액 및 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간은 같다.

의약품각조 제1부 주사용 세팔로틴나트륨의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 주사용 세포탁심나트륨의 확인시험, 순도시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 주사용 세포테탄나트륨의 확인시험을 별지 1과 같이 하고 “제 1 법”을 “엔도톡신”으로 개정한다.

의약품각조 제1부 주사용 세포티암염산염의 저장법을 다음과 같이 한다.

저 장 법  밀봉용기. 이 약은 플라스틱제수성주사제용기를 쓸 수 있다.

의약품각조 제1부 주사용 세포페라존나트륨의 확인시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 세푸록심악세틸 정의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 세프디토렌피복실 정의 제제균일성시험 중 “다음과 같은 방법으로 함량균일성시험을 할 때 적합하다.”를 “다음과 같은 방법으로 함량균일성시험을 할 때 적합하다. 이 조작은 직사광선을 피하여 차광한 용기를 써서 시험한다.”로 한다.

의약품각조 제1부 시럽용 세프라딘의 정량법을 다음과 같이 한다.

정 량 법  ｢세프라딘수화물｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 이동상을 넣어 흔들어 섞은 다음 정확하게 100 mL로 하고 필요하면 여과 또는 원심분리하여 검액으로 한다.

의약품각조 제1부 주사용 세프라딘의 정량법을 다음과 같이 한다.

정 량 법  ｢세프라딘수화물｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다.

의약품각조 제1부 세프라딘 캡슐의 정량법을 다음과 같이 한다.

정 량 법  ｢세프라딘수화물｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 20 캡슐 이상을 가지고 그 내용물의 질량을 정밀히 달아 표시역가에 따라 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다.

의약품각조 제1부 주사용 세프메녹심염산염의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 세프메타졸나트륨의 성상을 다음과 같이 한다.

성    상  이 약은 흰색 ～ 엷은 황백색 가루 또는 덩어리이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 메탄올에 잘 녹으며 에탄올에 녹기 어렵고 테트라히드로푸란에는 거의 녹지 않는다.

이 약은 흡습성이다.

의약품각조 제1부 주사용 세프트리악손나트륨의 확인시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 주사용 세프티족심나트륨의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 시소마이신황산염 주사액의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  ｢시소마이신황산염｣의 확인시험 2)에 따라 시험한다. 다만, 검액은 원액을 쓴다.

의약품각조 제1부 시클로세린 캡슐의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 시트르산수화물의 순도시험 2) 황산염을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 시럽용 아목시실린의 확인시험을 별지 1과 같이 한다..

의약품각조 제1부 아목시실린 정의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  이 약을 가루로 하여 ｢시럽용 아목시실린｣ 의 확인시험에 따라 시험한다.

의약품각조 제1부 아미카신 주사액의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 시럽용 아지트로마이신의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  1)  정량법의 검액 및 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간은 같다.

2)  ｢아지트로마이신 캡슐｣ 의 확인시험 2)에 따라 시험한다.

의약품각조 제1부 아지트로마이신 캡슐의 확인시험 1) 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 주사용 암포테리신 B의 저장법을 다음과 같이 한다.

저 장 법  차광한 밀봉용기 (냉소보관)

의약품각조 제1부 암피실린 캡슐의 확인시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 주사용 암피실린나트륨의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  ｢암피실린수화물｣의 확인시험에 따라 시험한다.

의약품각조 제1부 에리트로마이신 장용정의 확인시험을 다음과 같이 한다.

확인시험  ｢에리트로마이신｣의 확인시험 2)에 따라 시험한다. 단, 이 약을 가루로 하여 표시역가에 따라 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 메탄올 1 mL를 넣어 잘 흔들어 섞은 다음 여과하여 검액으로 한다.

의약품각조 제1부 주사용 에리트로마이신락토비온산염의 발열성시험을 삭제하고 pH 다음에 순도시험 중금속 및 무균시험 다음에 엔도톡신을 신설하며 확인시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 에리트로마이신스테아르산염 정의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 옥시테트라사이클린염산염 캡슐의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 옥시테트라사이클린염산염․폴리믹신 B황산염 안연고의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 이펜프로딜타르타르산염의 확인시험 1) 중 “메탄올용액(1 → 100000)”을 “메탄올용액(1 → 10000)”으로 한다.

의약품각조 제1부 칼리디노게나제의 확인시험 2) 식

“  ”을  “  ”으로 한다.

의약품각조 제1부 클래리트로마이신 서방정의 확인시험 1)을 다음과 같이 한다.

확인시험  1)  이 약을 가루로 하고 클로로포름으로 추출하여 mL 당 클래리트로마이신 2.5 mg의 농도로 하여 ｢클래리트로마이신｣의 확인시험 4)에 따라 시험한다.

의약품각조 제1부 시럽용 클래리트로마이신의 확인시험 1)을 다음과 같이 한다.

확인시험  1)  ｢클래리트로마이신｣의 확인시험 4)에 따라 시험한다.

의약품각조 제1부 클로람페니콜 점안액의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 클로람페니콜 캡슐의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 주사용 클로람페니콜숙시네이트나트륨의 확인시험 및 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 클록사실린나트륨 캡슐의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 키타사마이신의 성분함량비 조작조건 중 이동상의 “아세트산암모늄용액(77 → 500)”을 “아세트산암모늄용액(77 → 5000)”으로 한다.

의약품각조 제1부 테트라사이클린염산염 연고의 정량법을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 테트라사이클린염산염 캡슐의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 테트라사이클린메틸렌리신의 화학구조를 다음과 같이 한다.

의약품각조 제1부 토브라마이신 안연고의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 토브라마이신 점안액의 확인시험을 별지 1과 같이 한다.

의약품각조 제1부 티몰의 정량법 중 식을 다음과 같이 한다.

0.05 mol/L 브롬액 1 mL = 3.756 mg C10H14O

의약품각조 제1부 주사용 포스포마이신나트륨의 저장법을 다음과 같이 한다.

저 장 법  밀봉용기. 이 약은 플라스틱제수성주사제용기를 쓸 수 있다.

의약품각조 제1부 퓨시드산의 확인시험 1), 2) 및 정량법 중 “퓨시드산표준품”을 “퓨시드산디에탄올아민표준품”으로 한다.

의약품각조 제1부 퓨시드산 점안액의 정량법 중 “퓨시드산표준품”을 “퓨시드산디에탄올아민표준품”으로 한다.

의약품각조 제1부 퓨시드산 크림의 확인시험 1) 및 정량법 중 “퓨시드산표준품”을 “퓨시드산디에탄올아민표준품”으로 한다.

의약품각조 제1부 퓨시드산나트륨의 확인시험 1) 중 “푸시딘산표준품”을 “퓨시드산디에탄올아민표준품”으로 한다.

의약품각조 제1부 퓨시드산나트륨 연고의 정량법 중 “퓨시드산표준품”을 “퓨시드산디에탄올아민표준품”으로 한다.

의약품각조 제1부 프로카인아미드염산염 주사액의 정량법을 다음과 같이 한다.

정 량 법  이 약의 프로카인아미드염산염 (C13H21N3O․HCl) 약 0.5 g에 해당하는 양을 정확하게 취하여 염산 5 mL 및 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액에 브롬화칼륨용액(3 → 10) 10 mL을 정확하게 취하여 넣는다. 이 액을 15 ℃로 식힌 다음 0.1 mol/L 아질산나트륨액으로 적정한다 (적정종말점검출법의 전위차적정법 또는 전류적정법).

0.1 mol/L 과염소산 1 mL = 27.179 mg C13H21N3O·HCl

의약품각조 제1부 플로목세프나트륨의 확인시험 1) 중 “아리잘린콤플렉손시액”을 “알리자린콤플렉손시액”으로 한다.

의약품각조 제1부 주사용 플로목세프나트륨의 저장법을 다음과 같이 한다.

저 장 법  밀봉용기. 이 약은 플라스틱제수성주사제용기를 쓸 수 있다.

의약품각조 제1부 플루오시놀론아세토니드의 순도시험 유연물질의 조작조건 중 컬럼의 “25 cm”를 “15 ∼ 25 cm”로 한다.

의약품각조 제1부 피페미드산수화물의 성상을 다음과 같이 한다.

성    상  이 약은 엷은 황색의 결정성 가루로 냄새는 없고 맛은 쓰다.

이 약은 아세트산무수물에 잘 녹으며 물에 매우 녹기 어렵고 에탄올에는 거의 녹지 않는다.

이 약은 수산화나트륨시액에 녹는다.

이 약은 빛에 의하여 천천히 착색된다.

융점 : 약 250 ℃ (분해)

의약품각조 제1부 할로페리돌의 순도시험 3) 유연물질 조작조건 중 측정범위에서 “2 배”를 “3 배”로 한다.

의약품각조 제2부 벤질알코올의 순도시험 3) 벤즈알데히드 및 기타 유연물질의 “에틸벤젠 피크의 높이가 기록계의 30 % 이하로 한다”를 “에틸벤젠 피크의 높이가 기록계의 30 % 이상으로 한다”로 한다.

일반시험법 제27호 수분측정법의 전량적정법에서 수분측정용양극액 및 수분측정용음극액의 조제법 중 조제법 3의 ② 수분측정용음극액의 “니트로메탄”을 “니트로에탄”으로 한다.

일반시험법 제35호 용출시험법에서 그림 4. 장치 3의 가로 치수 중 “6.5”는 “9.5”로 한다.

일반시험법 제64호 표준품, 시약․시액, 용량분석용표준액, 표준액, 색의 비교액, 파장 및 투과율보정용 광학필터, 계량기․용기, 멸균법 및 무균조작법의 1)표준품에 바시트라신아연표준품, 세파만돌나페이트표준품, 아미카신표준품, 클로람페니콜팔미테이트표준품, 포스포마이신페네틸암모늄표준품을 신설하고 “카나마이신황산염”을 “카나마이신일황산염”으로, “퓨시드산”을 “퓨시드산디에탄올아민”으로, “히드로클로로치아지드”을 “히드로클로로티아지드”로 개정하고 블레오마이신염산염, 카나마이신황산염, 퓨시드산에탄올암모늄을 삭제한다.

일반시험법 제64호 표준품, 시약․시액, 용량분석용표준액, 표준액, 색의 비교액, 파장 및 투과율보정용 광학필터, 계량기․용기, 멸균법 및 무균조작법의 2)시약․시액에 과요오드산나트륨, 기체크로마토그래프용폴리에틸렌글리콜 600, 기체크로마토그래프용폴리에틸렌글리콜 1500, 0.2 % 닌히드린․물포화 1-부탄올 시액, N-데메틸록시트로마이신, N,N-디메틸아세트아미드, N,N-디벤질에틸렌디아민디아세트산, 9,10-디페닐안트라센, 락토비온산, 레소르시놀, 메틸티몰블루염화나트륨지시약, 4,4'-비스(디에틸아미노)벤조페논, 시클로세린반응용시액, 시트르산․인산염․세토니트릴시액, 아세트산시액, 0.25 mol/L, 아세트산암모늄시액 0.5 mol/L, p-아세트아니시니드, β-아포옥시테트라사이클린, 액체크로마토그래프용헥실실릴화한실리카겔, 염산히드록실아민시액, 3-에톡시-4-히드록시벤즈알데히드, 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨시액, 0.4 mol/L, pH8.5, 4-에피옥시테트라사이클린, 이미다졸, 인산수소이나트륨․시트르산완충액, 0.05 mol/L, pH 6.0, 인산염완충액, pH 6.0, 인산이수소나트륨시액, pH 2.5, 인산이수소칼륨시액, 0.33 mol/L, 인산이수소칼륨시액, 0.25 mol/L, pH 3.0, 인산일수소나트륨․시트르산완충액 0.05 mol/L, pH 6.0, 카나마이신황산염, 테트라부틸암모늄히드록시드액, 0.005 mol/L, 2,4,6-트리니트로벤젠설폰산, 핵자기공명스펙트럼측정용중수, 핵자기공명스펙트럼측정용중수소화디메틸설폭시드, 핵자기공명스펙트럼측정용3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨, m-히드록시아세토페논을 별지 3과 같이 각각 신설하고, 니트로에탄, 인산수소이나트륨시액, 0.05 mol/L, 인산수소이나트륨시액, 0.2 mol/L, 인산수소이나트륨시액 0.5 mol/L, 티오아세타미드시액, 티오아세타미드․글리세린염기성시액, N-(3-히드록시페닐)아세트아미드를 별지 2와 같이 각각 개정하고 아리잘린 S, 아리잘린 S 시액, 아리잘린레드 S, 아리잘린레드 S 시액, 아리잘린옐로우 GG, 아리잘린옐로우 GG 시액, 아리잘린옐로우 GG․티몰프탈레인시액, 아리잘린콤플렉손, 아리잘린콤플렉손시액, 지르코닐․아리잘린 S 시액의 “아리잘린”을 “알리자린”으로 한다.

일반시험법 제64호 3)용량분석용 표준액에 0.1 mol/L 염화바륨액, 0.005 mol/L 요오드액을 별지 3과 같이 각각 신설한다.

[별지 1]

겐타마이신황산염

Gentamicin Sulfate

겐타마이신 C1: R1 = CH3     R2 = CH3        R3 = H

겐타마이신 C1a: R1 = H      R2 = H          R3 = H

겐타마이신 C2: R1 = H       R2 = CH3        R3 = H

겐타마이신 C2a: R1 = H      R2 = H        R3 = CH3

겐타마이신 C2b: R1 = CH3    R2 = H          R3 = H

황산겐타마이신

이 약은 Micromonospora purpurea 또는 Micromonospora echinospora을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 아미노글리코사이드계 화합물의 황산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 겐타마이신 C1 (C21H43N5O7 : 477.60) 590 ∼ 775 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 무수에탄올에는 거의 녹지 않는다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  1) 이 약 50 mg에 물 1 mL를 넣어 녹이고 1-나프톨의 에탄올용액(1 → 500) 2 방울을 넣는다. 이 액을 황산 1 mL에 기벽을 따라 천천히 넣을 때 경계면에 자청색을 나타낸다.

2) 이 약 및 겐타마이신황산염표준품 약 50 mg씩을 달아 물 10 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름․강암모니아수․메탄올 혼합액(2 : 1 : 1)을 분액깔때기에 넣고 흔들어 섞은 다음 실온에서 1 시간 이상 방치하고, 이 액의 아래층 20 mL를 취하여 메탄올 0.5 mL를 넣고 이를 전개용매로 하여 20 mm2 구멍이 있는 전개조 덮개로 전개조를 덮은 여과지부분을 제외하고 약 17 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 박층판을 요오드 증기를 쏘일 때 검액에서 얻은 3 개의 반점은 표준액에서 얻은 반점과 같은 Rf 값 및 색상을 나타낸다.

3) 이 약 50 mg에 물 5 mL를 넣어 녹이고 염화바륨시액 5 mL를 넣을 때 흰색 침전이 생긴다.

비선광도  [eqn: [ alpha ] _{D} ^{25}] : +107 ∼ +121° (환산한 건조물로서 0.25 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.20 g을 물 5 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 5.5이다

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 이 액은 무색 ∼ 엷은 황색이고 맑다.

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 50 mg을 물 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하고 물을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 따로 클로로포름․강암모니아수․메탄올혼합액(2 : 1 : 1)을 분액깔때기에 넣고 흔들어 섞은 다음 실온에서 1 시간 이상 방치하고, 이 액의 아래층 20 mL를 취하여 메탄올 0.5 mL를 넣고 이를 전개용매로 하여 전개조 덮개를 약 20 mm2 열어둔 상태로 용기 내 여지를 넣지 않고 약 17 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 박층판을 요오드 증기를 쏘이고 유리판으로 박층판을 덮고 반점을 비교할 때 검액에서 얻은 겐타마이신 C1 (Rf 값 약 0.3), 겐타마이신 C2 (Rf 값 약 0.2) 및 겐타마이신 C1a (Rf 값 약 0.1)의 반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 겐타마이신 C2의 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 겐타마이신 1 mg (역가) 당 0.50 EU 이하이다.

건조감량  18.0 % 이하 (0.15 g, 0.67 kPa 이하, 110 ℃, 3 시간), 검체를 취할 때는 흡습을 피한다.

겐타마이신 성분함량비  이 약 및 겐타마이신황산염표준품 적당량을 정밀하게 달아 각각 물에 녹여 mL 당 0.65 mg (역가)을 함유하는 용액을 만든 다음 이들 액 10 mL 씩을 정확하게 취하여 각각 이소프로판올 5 mL와 o-프탈알데히드용액 4 mL를 넣어 흔들어 섞고 이소프로판올을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 60 ℃의 수욕에서 15 분간 가열하고 식힌다음 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액과 표준액을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 각 피크의 면적을 구한다 (겐타마이신 C1 : 25 ∼ 50 %, 겐타마이신 C1a : 10 ∼ 35 %, 겐타마이신 C2 및 C2a : 25 ∼ 55 %).

AF : 각 겐타마이신의 피크면적

AS : 겐타마이신의 피크면적의 합

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 330 nm)

칼  럼 : 안지름 약 5 mm, 길이 약 100 mm인 스테인레스강관에 5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔 또는 미세 세라믹 입자를 충전한다.

이동상 : 메탄올 700 mL에 물 250 mL 및 아세트산무수물 50 mL를 넣어 섞은 다음 1-헵탄설폰산나트륨 5 g을 넣어 녹인다.

유  량 : 약 1.5 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조작조건으로 시험할 때 겐타마이신 C1 피크에 대한 분배율 k는 2 ∼ 7이고, 겐타마이신 C2 피크의 이론단수는 1200 이상이며, 모든 두 피크 사이의 분리도 R은 1.25 이상이다. 또한 겐타마이신 C1, 겐타마이신 C1a, 겐타마이신 C2a, 겐타마이신 C2의 순서로 유출한다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조작조건으로 시험을 6 회 반복할 때 모든 피크의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

정 량 법	원통평판법  (1) 배지  (가) 종층용 및 기층용한천배지

펩톤	6.0 g	포도당	1.0 g

효모엑스	3.0 g	염화나트륨	10.0 g

육엑스	1.5 g	한천	15.0 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 멸균 후 pH가 7.8 ∼ 8.0이 되도록 한다.

(나) 시험균이식용한천배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(나)②㉯의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균  Staphylococcus epidermidis ATCC 12228을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 25 mg (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 녹여 mL 당 1 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액원액으로 한다. 이 검액원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 4.0 μg 및 1.0 μg (역가)을 함유하도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 겐타마이신황산염표준품을 건조한 다음 약 25 mg (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 녹여 mL 당 1 mg (역가)을 함유하는 표준원액을 만든다. 이 표준원액은 15 ℃ 이하에서 저장하며 30 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 4.0 μg 및 1.0 μg (역가)을 함유하도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

겐타마이신황산염 점안액

Gentamicin Sulfate Ophthalmic Solution

이 약은 수성의 점안제로 정량할 때 표시된 역가의 90.0 ～ 110.0 %에 해당하는 겐타마이신을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢겐타마이신황산염｣을 가지고 점안제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  이 약의 표시량에 따라 ｢겐타마이신황산염｣ 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물을 넣어 5 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 겐타마이신황산염표준품 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물 5 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름․메탄올․강암모니아수 혼합액(2 : 1 : 1)의 아래층을 전개용매로 하여 약 15 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 0.2 % 닌히드린․물포화 1-부탄올시액을 고르게 뿌린 다음 100 ℃에서 5 분간 가열할 때 검액에서 얻은 3 개의 반점은 표준액에서 얻은 각각의 반점과 색상 및 Rf 값이 같다.

pH  5.5 ～ 7.5

무균시험  시험할 때 적합하다.

불용성이물시험  시험할 때 적합하다.

점안제의 불용성미립자시험  시험할 때 적합하다.

정 량 법  ｢겐타마이신황산염｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 겐타마이신 약 12 mg (역가)에 해당하는 양을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 8.0)을 넣어 녹여 1 mL 중 약 1 mg (역가)을 함유하는 용액을 만든다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 8.0)으로 희석하여 1 mL 중 4.0 및 1.0 μg (역가)을 함유하도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다.

저 장 법  기밀용기.

그 라 미 시 딘

Gramicidin

이 약은 Bacillus brevis Dubos를 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 펩타이드계 화합물의 혼합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 그라미시딘 900 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 메탄올에 잘 녹고 무수에탄올에 녹으며 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1) 이 약 10 mg을 달아 6 mol/L 염산시액 2 mL를 넣어 가끔 흔들면서 수욕에서 30 분간 가열한다. 식힌 다음 6 mol/L 수산화나트륨시액으로 중화하고 닌히드린시액 1 mL 및 피리딘 0.5 mL를 넣어 2 분간 가열할 때 액은 청자색 ∼ 적자색을 나타낸다.

2) 이 약 및 그라미시딘표준품의 에탄올용액(1 → 20000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

융    점  229 ℃ 이상 (건조한 다음)

건조감량  3.0 % 이하 (0.1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간).

강열잔분  1.0 % 이하 (1 g).

정 량 법  비탁법  (1) 배지 (가) 시험균이식용한천배지

카제인 펩톤	5.0 g	폴리소르베이트80	0.1 g

인산이수소칼륨	2.0 g	포도당	10.0 g

효모엑스	20.0 g	한천	15.0 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 멸균 후의 pH가 6.7 ∼ 6.8이 되도록 한다.

(나) 시험균부유용액체배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 다)(2)(나)의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균 및 시험용균액의 조제 Enterococcus hirae ATCC 10541을 시험용균으로 한다. 이 시험용균을 고층으로 만든 시험균이식용한천배지에 천자(穿刺)배양하고 36.5 ∼ 37.5 ℃에서 20 ∼ 24 시간, 적어도 3 회 계대배양한 다음 1 ∼ 5 ℃ 에 저장한다. 이 균을 시험균부유용액체배지 10 mL에 이식하고 36.5 ∼ 37.5 ℃에서 20 ∼ 24 시간 배양하여 시험균원액으로 한다. 쓸 때 이 시험균원액에 시험균부유용 액체배지를 넣어 파장 580 nm에서 투과율이 50 ∼ 60 %가 되도록 하고, 이 액 1 mL에 대하여 시험균부유용액체배지 200 mL을 넣어 시험균액으로 한다.

(3) 이 약 약 10 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 무수에탄올에 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액의 적당량을 정확하게 취하여 희석용매를 넣어 1 mL 중에 0.02 μg (역가)을 함유하도록 희석하여 검액으로 한다. 따로 그라미시딘표준품(미리 0.67 kPa이하, 60 °C에서 3 시간 건조한다.) 약 10 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 무수에탄올을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 표준원액으로 한다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 30 일 이내에 쓴다. 쓸 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 희석용매를 넣어 1 mL 중에 0.02 μg (역가)을 함유하도록 희석하여 표준액으로 한다. 표준액 0.155 mL, 0.125mL, 0.100mL, 0.080mL, 0.065mL, 검액 0.100 mL 및 희석용매 0.100 mL를 취하여 시험관에 넣고 각각에 시험용균액 10 mL를 넣은 후 마개를 닫고 37.5 ℃에서 180 ∼ 270 분 배양하고 포름알데히드용액(1 → 3) 0.5 mL를 넣는다. 항생물질의 미생물학적 역가시험법 다)(6)에 따라 시험한다. 단, 파장은 530 nm로 한다.

○ 희석용매  프로필렌글리콜 390 mL에 무수에탄올․아세톤혼합액(9 :1) 210 mL를 넣고 증류수를 넣어 1 L로 한다.

저 장 법	기밀용기

그리세오풀빈

Griseofulvin

C17H17ClO6 : 352.77

이 약은 Penicillium griseofulvum 또는 Penicillium janczewskii을 배양하여 얻은 항진균활성을 가지는 화합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 그리세오풀빈 (C17H17ClO6) 960 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 디메틸포름아미드에 녹고, 아세톤에 조금 녹으며, 메탄올 또는 에탄올 에 녹기 어렵고, 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1) 이 약 및 그리세오풀빈표준품의 에탄올용액(1 → 100000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약 및 그리세오풀빈표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +350 ∼ +364° (환산한 건조물로서 0.25 g, 디메틸포름아미드 25 mL, 100 mm)

융    점  218 ∼ 222 ℃

순도시험  1) 산  이 약 0.25 g을 중화에탄올 20 mL에 녹이고 페놀프탈레인시액 2 방울과 0.02 mol/L 수산화나트륨액 1.0 mL을 넣을 때 액은 적색이다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.5 mL를 넣는다 (25 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 석유에텔가용물  이 약 1.0 g을 석유에텔 20 mL에 넣어 흔들어 섞고 환류냉각기를 달아 10 분간 끓인다. 식힌 다음 건조여과지를 써서 여과하고 여과지를 석유에텔 15 mL씩으로 2 회 씻고 여액 및 씻은 액을 합하여 수욕에서 석유에텔을 증발시키고 잔류물을 105 ℃에서 1 시간 건조할 때 그 잔류물은 0.2 % 이하이다.

5) 유연물질  이 약  0.10 g에 내부표준액 1 mL를 정확하게 넣고 아세톤을 넣어 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 그리세오풀빈표준품 5.0 mg을 정밀하게 달아 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 아세톤을 넣어 녹여 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 2 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 검액의 내부표준물질의 피크면적에 대한 데클로로그리세오풀빈 피크면적비 Q1, 검액의 내부표준물질의 피크면적에 대한 데히드로그리세오풀빈의 피크면적비 Q2 및 표준액의 내부표준물질의 피크면적에 대한 그리세오풀빈의 피크면적비 QS를 구할 때 Q1/QS는 0.6 이하이고 (3.0 % 이하), Q2/QS는 0.15 이하이다 (0.75 % 이하).

내부표준액  9,10-디페닐안트라센의 아세톤 용액(1 → 500)

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 1 m의 유리관에 기체크로마토그래프용 25 % 페닐 - 25 % 시아노프로필메틸실리콘폴리머를 150 ∼ 180 μm의 가스크로마토그래프용규조토에 1 % 비율로 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 250 ℃ 부근의 일정온도

검체도입부온도 : 270 ℃ 부근의 일정온도

검출기온도 : 300 ℃ 부근의 일정온도

운반 기체 : 질소

유  량 : 그리세오풀빈의 유지시간이 약 10 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 내부표준액의 아세톤용액(1 → 10)을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 2 μL에서 얻은 내부표준물질의 피크면적에 대한 그리세오풀빈의 피크면적비가 표준액의 내부표준물질의 피크면적에 대한 그리세오풀빈의 피크면적비의 7 ∼ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 표준액 2 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 내부표준물질, 그리세오풀빈의 순으로 유출되고 그 분리도는 5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 2 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 그리세오풀빈 피크면적비의 상대표준편차는 5.0 % 이하이다.

상대유지시간 : 그리세오풀빈에 대한 데클로로그리세오풀빈과 데히드로그리세오풀빈의 상대유지시간은 각각 약 0.6 및 1.2 이다.

건조감량  1.0 % 이하 (1.0 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간).

강열잔분  0.2 % 이하 (1 g).

이상독성부정시험   이 약 0.1 g을 증류수 0.5 ∼ 1 mL 에 현탁하여 녹여 체중 17 ∼ 22 g 의 건강한 마우스 5 마리에 각각 경구투여 한다. 동물은 시험 전 적어도 5 일 동안 관찰하였을 때 이상이 없는 것을 사용한다. 투여 후 48 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물은 한 마리도 없다. 만약 1 마리가 죽은 경우에는 5 마리를 가지고 다시 시험하여 24 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물이 없다.

정 량 법  이 약 및 그리세오풀빈표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 디메틸포름아미드 50 mL에 녹인 다음 내부표준액 20 mL씩을 정확하게 넣은 다음 물을 넣어 250 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 그리세오풀빈의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

그리세오풀빈 (C17H17ClO6)의 역가 (μg)

= 그리세오풀빈표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  파라옥시벤조산부틸의 아세토니트릴용액(1 → 400)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 물․아세토니트릴혼합액(3 : 2)

유  량 : 그리세오풀빈의 유지시간이 약 6 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 그리세오풀빈, 내부표준물질의 순으로 유출하고 그의 분리도는 4 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 그리세오풀빈의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법	기밀용기

그리세오풀빈 정

Griseofulvin Tablets

이 약은 정량할 때 표시량의 95.0 ～ 105.0 %에 해당하는 그리세오풀빈 (C17H17ClO6 : 352.77)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢그리세오풀빈｣을 가지고 정제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  이 약을 가루로 하여 표시량에 따라 그리세오풀빈 15 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 에탄올 100 mL를 넣어 강하게 흔들어 섞은 다음 여과한다. 여액 1 mL에 에탄올을 넣어 10 mL로 한 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 234 ～ 238 nm, 290 ～ 294 nm, 및 323 ～ 328 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

용출시험  이 약 1 정을 취하여 시험액으로 물 1 mL 당 라우릴황산나트륨 40.0 mg을 함유하는 용액 1000 mL를 써서 제 2 법에 따라 매분 75 회전으로 시험한다. 용출시험 시작 90 분 후에 용출액을 취하여 여과한다. 처음 여액 10 mL는 버리고 다음 여액 V mL를 정확하게 취하여 메탄올·물(4 : 1)용액을 넣어 정확하게 V′ mL로 하여 검액으로 한다. 따로 그리세오풀빈표준품 적당량을 정밀하게 달아 시험액을 넣어 녹여 검액과 같은 농도로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 시험액을 대조로 하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험하여 291 nm 부근의 흡수극대파장에서 흡광도 AT 및 AS를 측정한다. 이 약의 90 분간의 용출률이 75 % (Q) 이상일 때 적합하다.

그리세오풀빈 (C17H17ClO6)의 표시량에 대한 용출률 (%)

= Cs[eqn: ~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~{V~'}over{V~}~times~{1}over{C}~times~{100000}]

Cs : 표준액의 농도 [mg (역가)/mL]

C : 1 정 중 그리세오풀빈 (C17H17ClO6)의 표시량 [mg (역가)]

제제균일성시험  다음과 같은 방법으로 함량균일성시험을 할 때 적합하다. 이 약 1 정을 취하여 물 V/5 mL를 넣어 초음파로 붕해하고 디메틸포름아미드를 넣어 5V/8 mL로 하고 20 분간 강하게 흔들어 섞은 다음 1 mL 중에 그리세오풀빈 1.25 mg (역가)을 함유하도록 디메틸포름아미드를 정확하게 넣어 V mL로 하여 원심분리한다. 상층액 8 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 20 mL를 정확하게 넣은 다음 물을 넣어 100 mL로 하고 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과한다. 처음 여액 5 mL는 버리고 다음 여액을 검액으로 한다. 이하 정량법에 따라 시험한다.

그리세오풀빈 (C17H17ClO6)의 양 [mg (역가)]

= Ws[eqn: ~times~{Q_{T}}over{Q_{S}}~times~{V~}over{32~}]

WS : 그리세오풀빈표준품의 양 [mg (역가)]

내부표준액   파라옥시벤조산부틸의 아세토니트릴용액(1 → 2000)

건조감량  5.0 % 이하 (0.1 g(미세말로 한 것), 0.7 kPa, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  이 약 20정 이상을 가지고 그 질량을 정밀하게 달아 가루로 한다. 표시역가에 따라 그리세오풀빈 약 0.5 g (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 물을 넣고 초음파 진탕한 다음 디메틸포름아미드 100 mL를 넣고 20 분 동안 세게 흔들어 섞은 후 디메틸포름아미드를 넣어 정확하게 250 mL로 하여 여과한다. 이 여액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 20 mL를 정확하게 넣고 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과한다. 처음 여액 5 mL는 버리고 다음 여액을 검액으로 한다. 따로 그리세오풀빈표준품 약 40 mg (역가)을 정밀히 달아 디메틸포름아미드를 넣어 녹여 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 20 mL를 정확하게 넣고 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이하 ｢그리세오풀빈｣의 정량법에 따라 시험한다.

그리세오풀빈 (C17H17ClO6)의 역가 (μg)

= 그리세오풀빈표준품의 역가 (μg)[eqn: ~times~{Q_{T}}over{Q_{S}}~times~ 25 over 2]

내부표준액  파라옥시벤조산부틸의 아세토니트릴용액 (1 → 2000)

저 장 법  기밀용기

네오마이신황산염

Neomycin Sulfate

네오마이신 B : R1 = H	R2 = CH2NH2

네오마이신 C : R1 = CH2NH2	R2 = H

황산네오마이신	C23H46N6O13․3H2SO4 : 908.88

이 약은 Streptomyces fradiae의 배양에서 얻은 항세균 활성을 가지는 아미노글리코시드계 화합물의 혼합물의 황산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 네오마이신 (C23H46N6O13 : 614.64) 623 ∼ 740 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황색의 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 에탄올에는 거의 녹지 않는다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  1) 이 약 및 네오마이신황산염표준품 50 mg씩을 물 1 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이 액들을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 2 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한 다음에 메탄올․강암모니아수․디클로로메탄혼합액(3 : 2 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린아세톤용액(1 → 50)을 골고루 뿌리고 110 ℃에서 15 분간 가열할 때 검액과 표준액에서 얻은 주반점의 Rf 값은 같다.

2) 이 약의 수용액(1 → 20)은 황산염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도   : +53.5 ∼ 59.0° (환산한 건조물로서 1g, 물, 10 mL, 100 nm)

pH  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 1법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하)

3) 유연물질  이 약 0.63 g을 물 5 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL을 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 1 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메탄올․강암모니아수․디클로로메탄혼합액(3 : 2 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린아세톤용액(1 → 50)을 고르게 뿌린 다음 110 ℃에서 15 분간 가열할 때 검액에서 얻은 Rf 값 0.4의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

건조감량  8.0 % 이하 (0.2 g, 감압, 60 ℃, 3 시간).

강열잔분  0.3 % 이하 (1 g).

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  (가) 종층용 및 기층용한천배지

펩톤	6.0 g	염화나트륨	2.5 g

효모엑스	3.0 g	포도당	1.0 g

육엑스	1.5 g	한천	15.0 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 1 mol/L 수산화나트륨시액으로 멸균후의 pH가 7.8 ∼ 8.0이 되도록 한다.

(2) 시험용균 및 시험용균액 Staphylococcus aureus ATCC 6538P를 시험용균으로 한다. 다만, 시험용균액은 흡광광도계를 써서 파장 650 nm에서 투과도를 측정할 때 80 %가 되도록 시험균부유액을 만든다.

(3) 이 약 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 녹여 mL 당 1 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액원액으로 한다. 이 검액원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 80.0 및 20.0 μg (역가) 가 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 네오마이신황산염표준품 적당량을 취하여 건조한 다음 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 녹여 mL 당 1 mg (역가)을 함유하는 표준원액을 만든다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 14 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 80.0 및 20.0 μg (역가)가 함유되도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법	차광한 기밀용기

네틸마이신황산염

Netilmicin Sulfate

황산네틸마이신	(C21H41N5O7)2․5H2SO4 : 1441.55

이 약은 시소마이신 유도체의 황산염이다. 이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 네틸마이신 (C21H41N5O7 : 475.58) 595 ∼ 720 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고, 에탄올에 거의 녹지 않는다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  1) 이 약 30 mg을 물 3 mL에 녹이고 브롬시액 0.2 mL를 넣을 때 액의 색은 곧바로 없어진다.

2) 이 약 및 네틸마이신황산염표준품 각각 5 mg을 달아 물 5 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메탄올․클로로포름․강암모니아수․아세톤혼합액(2 : 2 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 15 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 0.2 % 닌히드린・물포화 1-부탄올시액을 고르게 뿌리고 약 100 ℃에서 약 5 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 주반점은 적자색 ∼ 적갈색을 띠고 Rf 값은 같다.

3) 이 약의 수용액(1 → 100)은 황산염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [alpha]_D^20] : +88 ∼ +96° (환산한 건조물로서 0.1 g, 물, 10 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.5 g을 물 5 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 5.5이다

순도시험  1) 용해상태  이 약 0.5 g을 물 5 mL에 녹일 때 액은 무색 ∼ 밝은 황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약의 환산한 건조물 50 mg에 해당하는 양을 달아 물에 녹여 5 mL로 하여 검액으로 한다. 검액 0.5 mL, 1 mL 및 1.5 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 각각 정확하게 50 mL로 하여 표준액 (1), 표준액 (2), 표준액 (3)으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액, 표준액 (1), 표준액 (2) 및 표준액 (3) 5 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메탄올・클로로포름・강암모니아수・아세톤혼합액(2 : 2 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 0.2 % 닌히드린․물포화 1-부탄올 시액을 뿌리고 약 100 ℃에서 5 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 이외의 반점은 표준액 (3)에서 얻은 반점보다 진하지 않다. 또한, 검액에서 얻은 주반점 이외의 반점의 합계 강도는 6 % 이하이다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 네틸마이신 1 mg (역가) 당 0.50 EU 이하이다.

건조감량  15.0 % 이하 (0.15 g, 0.67 kPa 이하, 110 ℃, 3 시간). 검체를 취할 때는 흡습을 피한다.

강열잔분  1.0 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 및 네틸마이신황산염표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 각각 정확하게 50 mL가 되게 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 네틸마이신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

네틸마이신 (C16H17N3O5S)의 역가 (μg)

= 네틸마이신황산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 205 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 1-헵탄설폰산나트륨 22.02 g에 희석시킨 인산(5 → 1000)을 넣어 1 L 로 한 액․아세토니트릴혼합액(620 : 380)

유  량 : 1 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 네틸마이신황산염표준품 및 시소마이신황산염표준품을 적당량을 정밀하게 달아 1 mL당 각각 1 mg을 함유하는 용액을 만들어 시스템적합성용액으로 한다. 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 시소마이신과 네틸마이신의 분리도는 1 이상이다. 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 이론단수는 3000 이상, 대칭계수는 2 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL씩을 가지고 위의 조작조건에 따라 5 회 반복하여 시험할 때 네틸마이신의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법	차광한 기밀용기에 질소 또는 아르곤 충진(5 ℃ 이하)

네틸마이신황산염 주사액

Netilmicin Sulfate Injection

정 량 법  ｢네틸마이신황산염｣ 의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 0.100 g (역가)에 해당하는 양을 정확하게 취해 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다.

네틸마이신 (C16H17N3O5S)의 역가 (μg)

= 네틸마이신황산염표준품의 역가 (μg)[eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} TIMES 2]

니  스  타  틴

Nystatin

니스타틴 A1	C47H75NO17 : 926.10

이 약은 Streptomyces noursei를 배양하여 얻은 항진균활성을 가지는 폴리엔마크로라이드계 화합물의 혼합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 니스타틴 A1 (C47H75NO17) 4600 단위 (역가) 이상을 함유한다. 1 단위는 니스타틴 0.27 μg에 해당한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황갈색의 가루이다.

이 약은 포름아미드에 녹고 메탄올에 조금 녹으며 에탄올에 녹기 어려우며 물에 매우 녹기 어렵다. 이 약은 수산화나트륨시액에 녹는다.

확인시험  1) 이 약 1 mg을 달아 물 5 mL 및 수산화나트륨시액 1 mL를 넣어 녹이고 2 분간 가열한 다음 식힌다. 이 액에 4-아미노아세토페논의 메탄올용액(1 → 200) 3 mL 및 염산 1 mL를 넣을 때 액은 적자색을 띤다.

2) 이 약 및 니스타틴표준품 10 mg씩을 달아 수산화나트륨시액 0.25 mL 및 희석시킨 메탄올 (4 → 5) 50 mL의 혼합액을 넣어 50 ℃ 이하에서 가온하여 녹이고 희석시킨 메탄올 (4 → 5)을 넣어 500 mL로 하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

pH  이 약 0.3 g을 물 10 mL에 현탁시킨 액의 pH는 6.5 ∼ 8.0이다.

순도시험  중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

이상독성부정시험  피부에 적용하는 제제를 제외한 제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약 600 IU에 해당하는 양을 5 % 아라비아고무액에 현탁하여 녹여 체중 17 ～ 24 g 의 건강한 마우스 5 마리에 각각 복강 주사한다. 동물은 시험 전 적어도 5 일 동안 관찰하였을 때 이상이 없는 것을 사용한다. 투여 후 24 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물이 없다. 만약 1 마리가 죽은 경우에는 5 마리를 가지고 다시 시험하여 24 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물이 없다.

건조감량  5.0 % 이하 (0.3 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

니스타틴  성분함량비  이 약 및 니스타틴표준품 약 20 mg 씩을 정밀하게 달아 디메틸설폭시드에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액은 차광하고 냉장보관시 24시간 이내에 쓴다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 개개의 피크면적을 구한다. 면적백분율에 따라 그들의 양을 구할 때 니스타틴 A1의 함량은 85.0 % 이상, 기타 다른 성분의 함량은 4.0 % 이하이다. 다만, 유지시간 2 분 이내의 피크는 제외한다.

조작조건

검 출 기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 304 nm)

칼    럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 150 mm인 스테인레스강관에 5 μm 액체크로마토그래프용옥타데실실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 30 ℃ 부근의 일정 온도

이 동 상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.

이동상 A : 0.05 mol/L 아세트산암모늄용액․아세토니트릴혼합액(71 : 29)

이동상 B : 0.05 mol/L 아세트산암모늄용액․아세토니트릴혼합액(40 : 60)

시간(분)	이동상 A (%)	이동상 B (%)	유출조건
0 ∼ 25	100	0	일정조성
25 ∼ 35	100 → 0	0 → 100	선형농도기울기
35 ∼ 40	0	100	일정조성
40 ∼ 45	0 → 100	100 → 0	선형농도기울기
45 ∼ 50	100	0	일정조성

유    량 : 1 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 니스타틴 표준품 약 20 mg을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL에 녹이고, 물을 넣어 50 mL가 되게 한다. 이 액 10 mL에 묽은염산 2 mL를 넣고 1시간동안 실온에 방치한다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 두 개의 주피크 사이의 분리도는 3.5 이상이고 니스타틴 A1의 유지시간은 약 14 분이다.

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(가)④㉮의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균 Saccharomyces cerevisiae ATCC 9763을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 60000 단위에 해당하는 양을 정밀하게 달아 디메틸포름아미드를 넣어 녹여 mL 당 3000 단위를 함유하는 용액을 만들어 검액원액으로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 300 및 150 단위가 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 차광한 용기를 사용한다. 따로 니스타틴표준품(미리 0.67 kPa 이하 40 ℃에서 2 시간 감압건조한다.) 약 60000 단위에 해당하는 양을 정밀하게 달아 디메틸포름아미드를 넣어 녹여 mL 당 3000 단위를 함유하는 표준원액을 만든다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 3 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 300 및 150 단위가 함유되도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 차광한 용기를 사용한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법	차광한 기밀용기 (냉소 보관)

다우노루비신염산염

Daunorubicin Hydrochloride

염산다우노루비신	C27H29NO10․HCl : 563.98

이 약은 Streptomyces peucetius를 배양하여 얻은 항종양활성을 가지는 안트라사이클린계 화합물의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 다우노루비신염산염 (C27H29NO10․HCl) 940 ∼ 1050 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 적색의 가루이다.

이 약은 물 또는 메탄올에 녹고 무수에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 및 다우노루비신염산염표준품의 메탄올용액(1 → 100000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약의 수용액(1 → 50)은 염화물의 정성반응 2)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [alpha]_D^20] : +250 ∼ +275° (환산한 건조물로서 15 mg, 메탄올, 10 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.15 g을 물 30 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 6.0이다.

흡 광 도  [eqn: E_{1cm}^{1%}] (495 nm) : 210 ∼ 250 (환산한 건조물로서 10 mg, 메탄올, 500 mL)

순도시험  1) 용해상태  이 약 20 mg을 물 10 mL에 녹일 때 액은 적색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 10 mg을 메탄올 5 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 3 mL을 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한 다음 클로로포름․메탄올․물․아세트산무수물혼합액(15 : 5 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개시킨 다음 박층판을 바람에 말린다. 이것을 육안으로 관찰할 때 검액에서 얻은 주 반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 다우노루비신염산염 1 mg (역가) 당 4.3 EU 미만이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 5.0 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다.

건조감량  7.5 % 이하 (0.1 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  이 약 및 다우노루비신염산염표준품 약 20 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 내부표준액 4 mL를 정확하게 넣고 이동상으로 정확하게 20 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 다우노루비신염산염의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

다우노루비신염산염 (C27H29NO10·HCl)의 역가 (μg)

= 다우노루비신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  2-나프탈렌설폰산 1 g을 달아 이동상을 넣어 녹여 100 mL로 한다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 물․아세토니트릴혼합액(31 : 19)을 인산으로 pH 2.2로 조정한다

유  량 : 다우노루비신의 유지시간이 약 9 분이 되도록 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 2-나프탈렌설폰산, 다우노루비신염산염의 순으로 유출하고 분리도는 2.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 다우노루비신의 피크면적비의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

저 장 법	기밀용기

독소루비신염산염

Doxorubicin Hydrochloride

염산독소루비신	C27H29NO11․HCl : 579.98

이 약은 다우노루비신의 유도체의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 독소루비신염산염 (C27H29NO11․HCl) 980 ∼ 1080 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 적등색의 결정성가루이다.

이 약은 물에 조금 녹고 메탄올에 녹기 어려우며 무수에탄올에 매우 녹기 어렵고 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1) 이 약과 독소루비신염산염표준품의 메탄올용액(1 → 100000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약과 독소루비신염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 염화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3) 이 약의 수용액(1 → 200)은 염화물의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [alpha]_D^20] : +240 ∼ +290° (환산한 무수물로서 20 mg, 메탄올, 20 mL, 100 mm)

pH  이 약 50 mg을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.0 ∼ 5.5이다.

흡 광 도  [eqn: E_1cm^1%] (495 nm) : 200 ∼ 230 (환산한 무수물로서 10 mg, 메탄올, 500 mL)

순도시험  1) 용해상태  이 약 50 mg을 물 10 mL에 녹일 때 액은 붉은 색이고 맑다.

2) 유연물질  이 약 25 mg을 이동상 100 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 2 mL를 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 독소루비신 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 독소루비신 피크면적의 1/4보다 크지 않으며 검액의 독소루비신 이외의 피크면적의 합은 표준액의 독소루비신 피크면적보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 : 254 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 황산라우릴나트륨 3 g을 희석시킨 인산(7 → 5000) 1000 mL로 한 액․아세토니트릴혼합액(1 :1)

유량 : 독소루비신의 유지시간이 약 8 분이 되게 조정한다.

측정범위 : 독소루비신의 유지시간의 약 3배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL을 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 20 mL가 되게 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 독소루비신의 피크면적이 표준액의 독소루비신 피크면적의 3.5 ∼ 6.5 %가 되는지 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 5 mg을 물 20 mL에 녹여 인산 1.5 mL를 넣고 실온에서 30 분간 방치한다. 이 액에 2 mol/L 수산화나트륨시액을 넣어 pH를 2.5가 되게 한 액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 독소루비신에 대한 상대유지시간 약 0.6인 독소루비시논, 독소루비신의 순으로 유출하고 그의 분리도는 5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 독소루비신의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 독소루비신염산염으로서 1 mg (역가) 당 2.50 EU 이하이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 2.0 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 하고 검액의 양은 0.5 mL로 한다.

수    분  3.0 % 이하 (0.3 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약의 표시역가에 따라 약 2.0 mg (역가)을 정확하게 취하여 이동상으로 희석하여 mL 당 0.1 mg (역가)의 농도로 만들어 검액으로 한다. 따로 독소루비신염산염표준품 약 10 mg (역가)을 정밀하게 달아 이동상으로 희석하여 mL 당 0.1 mg (역가)의 농도로 만들어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 독소루비신염산염의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

독소비신염산염 (C27H29NO11·HCl)의 역가 (μg)

= 독소루비신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용트리메틸실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 물․아세토니트릴․에탄올․인산혼합액(540 : 290 : 170 : 2)에 라우릴황산나트륨 1 g을 넣어 녹이고 2 mol/L 수산화나트륨시액으로 pH를 3.6 ± 0.1로 조정한다.

유  량 : 약 1.5 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 분리도시험용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 독소루비신에 대한 독소루비시논의 상대유지시간은 약 0.6이고 분리도는 5.5 이상, 독소루비신의 이론단수는 2250 이상, 독소루비신의 대칭계수는 0.7 ～ 1.2이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조작조건으로 6 회 반복 주입하였을 때 독소루비신 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

◦ 분리도시험용액  독소루비신염산염 약 10 mg (역가)을 물 5 mL에 녹이고 인산 5 mL를 넣어 약 30 분간 방치한 다음 2 mol/L 수산화나트륨시액(약 37 mL)으로 pH를 2.6 ± 0.1로 조정하고 아세토니트릴 15 mL 및 메탄올 10 mL를 넣어 섞은 다음 여과하여 이 용액을 분리도시험용액으로 한다. 이 용액의 일부를 냉동보관하고 쓸 때 녹여서 섞어 쓴다.

저 장 법  기밀용기

독시사이클린수화물

Doxycycline Hydrate

C22H24N2O8․H2O : 462.45

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 독시사이클린 (C22H24N2O8 : 444.44) 880 ～ 980 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 황색의 결정성 가루이다.

이 약은 에탄올에 조금 녹으며 물에 매우 녹기 어렵고 클로로포름 또는 에텔에는 거의 녹지 않는다. 이 약은 묽은 산 또는 알칼리 용액에 녹는다.

확인시험  이 약 및 독시사이클린표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 현탁시킨 액의 pH는 5.0 ∼ 6.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 0.5 g을 달아 황산마그네슘의 묽은 황산용액 (1 → 4) 4 mL를 넣어 섞고 가열한 다음 액체가 되면 수욕에서 증발건고 한다. 잔류물을 800 ℃이하로 강열하여 회화한다. 식힌 다음 잔류물에 묽은 황산 소량으로 적신다. 증발건고하고 다시 2시간 이내로 회화시킨 다음 식힌다. 잔류물을 두 개를 취해 각각 2 mol/ L 염산시액 5 mL를 넣는다. 페놀프탈레인시약 0.1 mL를 넣고 엷은 적색이 될 때까지 강암모니아수를 넣는다. 식힌 다음 색이 사라질 때 까지 아세트산무수물을 넣고 0.5 mL를 더 넣는다. 필요하면 여과하고 씻는다. 물을 넣어 20 mL로 하여 검액으로 한다. 따로, 이 약 대신 납표준액 2.5 mL을 넣은 다음 검액과 같은 방법으로 한다. 이 액 10 mL에 검액 2 mL를 넣어 비교액으로 한다. 따로, 물 10 mL에 검액 2 mL를 넣어 공시험액으로 한다. 검액, 표준액 및 공시험액 각각 12 mL에 아세트산염완충액, pH 3.5 2 mL를 넣고 섞은 후 티오아세타미드시액 1.2 mL를 넣고 즉시 섞는다. 2 분간 방치 후 검액의 갈색은 비교액보다 진하지 않다.

시스템적합성 : 비교액은 공시험액에 비해 약간의 갈색을 나타낸다. 또한 검액에 납표준액 2.5 mL를 넣는다. 이 액 10 mL에 검액 2 mL를 넣은 액을 시스템적합성용액으로 한다. 시스템적합성용액은 비교액보다 진하거나 진하기가 같다.

2) 유연물질  이 약 약 55 mg을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 염산 12 mL에 녹인 후 0.01 mol/L 염산을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 메타사이클린염산염표준품 적당량을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산에 녹여 1 mL 당 1.2 mg을 함유하는 용액을 만들어 메타사이클린 표준원액으로 한다. 따로 독시사이클린표준품 약 12 mg을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 표준액 (1)로 한다. 표준액 (1) 2.0 mL 와 메타사이클린 표준원액 2.0 mL를 정확하게 취하여 0.01 mol/L 염산을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액 (2)로 한다. 검액 및 표준액 (2) 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 표준액 (2)에서 얻은 메타사이클린의 피크면적 AM 및 검액에서 얻은 메타사이클린 피크면적 AU를 구한다. 또 표준액 (2)에서 얻은 독시사이클린의 피크면적 AS 및 검액에서 얻은 메타사이클린을 제외한 개개 유연물질의 피크면적 Ai를 구한다. 메타사이클린의 양은 2.0 % 이하이며, 메타사이클린 이전에 유출되는 개개 유연물질은 0.5 % 이하이고, 6-에피독시사이클린은 2.0 % 이하이며, 독시사이클린 피크 이후에 유출되는 개개 유연물질은 0.5 % 이하이다.

메타사이클린의 양(%) =

메타사이클린을 제외한 개개 유연물질의 양(%) =

CM : 표준액 (2) 중 메타사이클린염산염의 농도 (mg/mL)

W : 이 약의 채취량 (mg)

CS : 표준액 (2) 중 독시사이클린의 농도 (mg/mL)

조작조건

검 출 기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 270 nm)

칼    럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 ~ 10 μm의 액체크로마토그래프용 구형스티렌-디비닐벤젠공중합체를 충전한다.

칼럼온도 : 60 ℃ 부근의 일정 온도

이 동 상 : 인산이수소칼륨 2.72 g과 수산화나트륨 0.74 g, 황산수소테트라부틸암모늄 0.50 g, 에틸렌디아민테트라아세트산디나트륨 0.40 g을 물 850 mL에 녹인다. 이 액에 60 g의 t-부틸알코올을 넣은 다음 물을 넣어 정확하게 1000 mL로 하고 1 mol/L 수산화나트륨액을 넣어 pH를 7.0 ~ 9.0 으로 조정한다.

유    량 : 1 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 4-에피독시사이클린, 메타사이클린, 6-에피독시사이클린 및 독시사이클린의 상대유지시간은 각각 0.4, 0.6, 0.7 및 1.0이며 4-에피독시사이클린과 독시사이클린 사이의 분리도는 3.0 이상이고, 피크의 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 (1) 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 독시사이클린 피크면적의 상대표준편차는 2.0 %이하이다.

측정범위 : 독시사이클린 유지시간의 약 1.7 배 범위

◦ 시스템적합성용액 : 독시사이클린표준품을 0.01 mol/L 염산에 녹여 1 mL 중 6 mg을 함유하는 용액을 만들고 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 수욕 상에서 60 분 동안 가온하고 열판 위에서 타지 않도록 조심하며 증발건고 한다. 잔류물을 0.01 mol/L 염산에 녹여 정확하게 25 mL가 되게 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액에는 4-에피독시사이클린, 6-에피독시사이클린, 독시사이클린이 존재하며, 냉장보관시 14 일 동안 사용이 가능하다.

수    분  3.6 ∼ 4.6 % (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 약 55 mg (역가) 씩을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 염산 12 mL를 넣고 흔들어 녹인 다음 0.01 mol/L 염산을 넣어 정확하게 50 mL로 하고 공경 0.5 μm 이하의 필터로 여과하여 여액을 검액으로 한다. 따로, 독시사이클린표준품 약 11 mg (역가)을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산 6 mL를 넣어 5 분간 초음파 진탕하여 녹인 다음 정확하게 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 독시사이클린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

독시사이클린 (C22H24N2O8)의 역가 (μg)

= 독시사이클린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} TIMES 5]

조작조건

「독시사이클린하이클레이트수화물」정량법의 조작조건을 따른다.

저 장 법  차광한 기밀용기

독시사이클린 캡슐

Doxycycline Capsules

정 량 법  「독시사이클린하이클레이트수화물」의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 20 캡슐 이상을 취하여 내용물을 꺼내어 질량을 정밀하게 단다. 내용물을 섞은 후 이 약의 표시역가에 따라 약 100 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 염산 20 mL를 넣은 다음 5 분간 초음파 진탕하고 15 분간 흔들어 녹인 다음 0.01 mol/L 염산을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액을 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과하여 여액을 검액으로 한다. 따로, 독시사이클린표준품 약 10 mg (역가)을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산 6 mL를 넣어 5 분간 초음파 진탕하여 녹인 다음 정확하게 10 mL로 하여 표준액으로 한다.

독시사이클린하이클레이트수화물

Doxycycline Hyclate Hydrate

독시사이클린하이클레이트	(C22H24N2O8․HCl)2․C2H6O․H2O : 1025.89

이 약은 옥시테트라사이클린유도체의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 및 무에탄올물 1 mg에 대하여 독시사이클린 (C22H24N2O8 : 444.43) 800 ∼ 920 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 황색 ∼ 어두운 황색 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물 또는 메탄올에 잘 녹고 무수에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  이 약 및 독시사이클린표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도	[eqn: [alpha]_D^20] : -105 ∼ -120° (환산한 탈수 및 탈에탄올물로서 0.25 g, 0.01 mol/L 염산·메탄올시액, 25 mL, 100 mm) 검액을 조제한 후 5 분 이내에 측정한다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 2.0 ∼ 3.0이다.

흡광도	[eqn: E_{1cm}^{1%}](249 nm) : 285 ∼ 315 (10 mg, 0.01 mol/L 염산·메탄올시액, 500 mL)

순도시험  1) 에탄올  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 내부표준액에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 무수에탄올 약 0.4 g을 정밀하게 달아 내부표준액을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 내부표준액을 넣어 정확하게 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 1 μL씩을 정확하게 취하여 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 에탄올의 피크면적비 QT 및 QS를 측정한다. 에탄올의 양은 4.3 ～ 6.0 % 이다.

이 약 1.0 g 중의 에탄올의 양(%) =

내부표준액  1-프로판올용액(1 → 2000)

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 3.2 mm, 길이 약 1.5 m인 유리관에 기체크로마토그래프용 다공성에틸비닐벤젠-디비닐벤젠공중합체(평균공경 0.0075 μm, 비표면적 500 ～ 600 m2/g, 입자경 150 ～ 180 μm)

칼럼온도 : 약 135 ℃의 일정온도

운반기체 : 질소

유  량 : 에탄올의 유지시간이 약 5 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 1 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 에탄올과 내부표준물질의 분리도는 2.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 1 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 5 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 에탄올의 피크면적비의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 5.0 mL을 넣는다 (50 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 및 독시사이클린표준품 약 120 mg (역가)씩을 정밀히 달아 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 녹여 각각 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액 (1)로 한다. 따로, 메타사이클린염산염표준품을 적당량 달아 0.01 mol/L 염산시액에 녹여 mL 중 1.2 mg을 함유하는 용액을 만든다. 이 액 2.0 mL 및 표준액 (1) 2.0 mL를 취하여 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 녹여 100 mL로 하여 독시사이클린 및 메타사이클린염산염을 1 mL 중 0.024 mg을 함유하는 용액을 만들어 표준액 (2)로 한다. 검액 및 표준액 (2) 20 μL씩을 정확하게 취하여 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 표준액 (2)에서 얻은 메타사이클린의 피크면적 AM 및 검액에서 얻은 메타사이클린 피크면적 AU를 구한다. 또 표준액 (2)에서 얻은 독시사이클린의 피크면적 AS 및 검액에서 얻은 메타사이클린을 제외한 개개 유연물질의 피크면적 Ai를 구할 때 메타사이클린의 양은 2.0 % 이하, 메타사이클린 피크 이전에 유출되는 개개 유연물질의 양은 0.5 % 이하, 6-에피독시사이클린의 양은 2.0 % 이하, 독시사이클린 피크 이후에 유출되는 개개 유연물질은 0.5 % 이하이다.

메타사이클린의 양(%) =

메타사이클린을 제외한 개개 유연물질의 양(%) =

CM: 표준액 (2) 중 메타사이클린염산염의 농도 (mg/mL)

W: 이 약의 채취량 [mg (역가)]

CS: 표준액 (2) 중 독시사이클린의 농도 [mg (역가)/mL]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 270 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용 구형스티렌-디비닐벤젠공중합체를 충전한다.

칼럼온도 : 60 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 인산이수소칼륨 2.72 g, 수산화나트륨 0.74 g, 황산수소테트라부틸암모늄 0.50 g 및 에틸렌디아민테트라아세트산디나트륨 0.40 g에 물 850 mL를 넣어 녹인다. 이 액에 t-부틸알코올 60 g을 넣고 물을 넣어 1000 mL로 한 후, 1 mol/L 수산화나트륨으로 pH를 8.0 으로 조정한다. 필요하면 t-부틸알코올의 비율을 감소시켜 유연물질과 독시사이클린의 분리도 및 독시사이클린의 유지시간을 증가시킬 수 있다.

유  량 : 약 1.0 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 4-에피독시사이클린, 6-에피독시사이클린 및 독시사이클린의 상대유지시간은 각각 약 0.4, 0.7 및 1.0이고, 4-에피독시사이클린과 독시사이클린의 분리도는 3.0 이상, 독시사이클린의 대칭 계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 독시사이클린표준품 12 mg을 0.01 mol/L 염산 10 mL에 녹인 액을 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

측정범위 : 독시사이클린 유지시간의 1.7 배 범위

◦ 시스템적합성용액 : 독시사이클린표준품을 적당량 달아 0.01 mol/L 염산에 녹여 mL 중 독시사이클린 6 mg을 함유하는 용액을 만든다. 이 액 5 mL를 취하여 60 분 동안 증기욕에서 가열하고 열판위에서 타지 않도록 조심하여 증발 건고한다. 잔류물에 0.01 mol/L 염산을 넣어 녹여 정확하게 25 mL가 되게 한 다음 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액은 냉장 보관할 때 14 일 동안 사용할 수 있다.

수    분  1.4 ∼ 2.8 % (0.3 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분	0.3 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 약 0.120 g (역가)을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 한 다음 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과하여 여액을 검액으로 한다. 따로, 독시사이클린표준품 약 12 mg (역가)을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산 6 mL를 넣어 5 분간 초음파 진탕하여 녹인 다음 정확하게 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 독시사이클린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

독시사이클린 (C22H24N2O8)의 역가 (μg)

= 독시사이클린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} TIMES 10]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 270 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용 구형스티렌-디비닐벤젠공중합체를충전한다.

칼럼온도 : 60 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소칼륨 2.72 g, 수산화나트륨 0.74 g, 황산수소테트라부틸암모늄 0.50 g 및 에틸렌디아민테트라아세트산디나트륨 0.40 g에 물 850 mL을 넣어 녹인다. 이 액에 t-부틸알코올 60 g을 넣고 물을 넣어 1 L로 한 후 1 mol/L 수산화나트륨으로 pH를 8.0 ± 0.1로 조정한다. 필요하면 t-부틸알코올의 비율을 감소시켜 유연물질과 독시사이클린의 분리도 및 독시사이클린의 유지시간을 증가시킬 수 있다.

유  량 : 1.0 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 20 μL을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 4-에피독시사이클린, 6-에피독시사이클린 및 독시사이클린의 상대유지시간은 각각 약 0.4, 0.7 및 1.0이고 4-에피독시사이클린과 독시사이클린의 분리도는 3.0 이상, 독시사이클린 피크의 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 독시사이클린 피크의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦ 시스템적합성용액 : 독시사이클린표준품을 적당량 달아 0.01 mol/L 염산시액에 녹여 1 mL 당 독시사이클린 6 mg을 함유하는 용액을 만든다. 이 액 5 mL를 취하여 증기욕에서 60 분 동안 가열하고 열판 위에서 타지 않도록 조심하여 증발건고 한다. 잔류물에 0.01 mol/L 염산을 넣어 녹여 정확하게 25 mL가 되게 한 다음 공경 0.5 μm의 멤브레인필터로 여과하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액은 냉장 보관할 때 14일 동안 사용할 수 있다.

저 장 법  차광한 기밀용기

독시사이클린하이클레이트 정

Doxycycline Hyclate Tablets

정 량 법  「독시사이클린하이클레이트수화물」의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 20 정 이상을 취하여 가루로 하여 이 약의 표시역가에 따라 약 100 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산 75 mL를 넣은 다음 5 분간 초음파 진탕하고 15 분간 흔들어 녹인 다음 0.01 mol/L 염산을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액을 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과하여 여액을 검액으로 한다. 따로, 독시사이클린표준품 약 10 mg (역가)을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산 6 mL를 넣어 5 분간 초음파 진탕하여 녹인 다음 정확하게 10 mL로 하여 표준액으로 한다.

독시사이클린하이클레이트 캡슐

Doxycycline Hyclate Capsules

정 량 법  「독시사이클린하이클레이트수화물」의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 20 캡슐 이상을 취하여 내용물을 꺼내어 질량을 정밀하게 단다. 내용물을 섞은 후 이 약의 표시역가에 따라 약 100 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산 75 mL를 넣은 다음 5 분간 초음파 진탕하고 15 분간 흔들어 녹인 다음 0.01 mol/L 염산을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액을 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과하여 여액을 검액으로 한다. 따로, 독시사이클린표준품 약 10 mg (역가)을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산 6 mL를 넣어 5 분간 초음파 진탕하여 녹인 다음 정확하게 10 mL로 하여 표준액으로 한다.

디리트로마이신

Dirithromycin

C42H78N2O14 : 835.09

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 디리트로마이신 및 에피디리트로마이신 (C42H78N2O14) 96.0 ∼ 102.0 %를 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 또는 회백색 결정성 가루이다.

이 약은 클로로포름에 잘 녹고 메탄올에 녹으며 프로판올 또는 아세토니트릴에 녹기 어렵고 물 또는 시클로헥산에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 및 디리트로마이신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 정량법의 검액에서 얻은 주피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간과 같다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 유연물질  이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 아세토니트릴․메탄올혼합액(70 : 30)에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 디리트로마이신표준품 적당량을 정밀하게 달아 아세토니트릴․메탄올혼합액(70 : 30)에 녹여 mL 당  0.2 mg을 함유하는 액을 만들어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 다음 식으로 각 유연물질의 양 (%)구할 때 9-(s)-에리트로마이실아민은 1.5 % 이하이며 기타 개개 유연물질 의 양은 1.0 % 이하이고 총 유연물질의 양은 4.0 % 이하이다. 단, 디리트로마이신 16S-에피머는 유연물질로 계산하지 않는다.

9-(S)-에리트로마이실아민 또는 기타유연물질의 함량 (%) =

C : 디리트로마이신표준액의 농도 (mg/mL)

W : 이 약의 채취량 (mg)

Ai : 검액에서 얻은 각 유연물질의 피크면적

AS : 표준액의 디리트로마이신 (16R-에피머)의 피크면적

조작조건

검출기, 칼럼, 이동상 : 정량법에 따른다.

측정범위 : 디리트로마이신(16R-에피머) 유지시간의 3 배

3) 디리트로마이신 16S-에피머  유연물질시험에서 얻은 크로마토그램으로부터 디리트로마이신의 디리트로마이신 16S-에피머의 양(%)을 다음 식에 따라 구한다 (1.5 % 이하).

디리트로마이신 16S-에피머의 양 (%) =

AE : 검액의 디리트로마이신 16S-에피머의 피크면적

C : 디리트로마이신표준액의 농도 (mg/mL)

W : 이 약의 채취량  (mg)

AS : 표준액의 디리트로마이신 (16R-에피머)의 피크면적

수    분  1.0 % 이하 (1.0 g, 용량적정법, 직접적정).

정 량 법  이 약 및 디리트로마이신표준품 약 20 mg씩을 정밀하게 달아 아세토니트릴․메탄올혼합액(70 : 30)에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 디리트로마이신 (16R-에피머)의 피크면적 AT 및 AS를 구한다.

디리트로마이신 (C42H78N2O14)의 양 (%)

= [eqn: 1000 TIMES {C} over {W} TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} +P _{E}]

C : 표준액 중 디리트로마이신의 농도 [역가(mg)/mL]

W : 이 약의 채취량

PE : 순도시험 3)에서 디리트로마이신 16S-에피머의 양(%)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 205 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세토니트릴․인산염완충액(pH 7.5)․메탄올혼합액(44 : 37 : 19)

유  량 : 2 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 10 μL을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 9-(s)-에리트로마이실아민, 디리트로마이신 (16R-에피머) 및 디리트로마이신 16S-에피머의 상대유지시간은 각각 약 0.7, 1.0 및 1.12이다. 그리고 디리트로마이신 (16R-에피머)와 디리트로마이신 16S-에피머의 분리도는 2.0 이상, 디리트로마이신 (16R-에피머)와 9-(s)에리트로마이실아민의 분리도는 5.0 이상이며 디리트로마이신 (16R-에피머) 피크의 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 디리트로마이신(16R-에피머) 피크의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

시스템적합성용액 : 디리트로마이신표준품 적당량을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 1 mL 당 2.5 mg을 함유하는 용액을 만든다. 이 액을 실온에서 24 시간 보존한다. 단, 디리트로마이신(16R-에피머), 디리트로마이신 16S-에피머 및 9-(s)-에리트로마이실아민의 평형혼합물이며 실온에서 1 개월 동안 쓸 수 있다.

저 장 법  밀폐용기

디클록사실린나트륨수화물

Dicloxacillin Sodium Hydrate

C19H16Cl2N3NaO5S․H2O : 510.33

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 디클록사실린 (C19H17Cl2N3O5S : 470.33) 910 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색 결정성 가루이다.

이 약은 물 또는 메탄올에 잘 녹고 에탄올에 녹는다.

확인시험  1) 이 약 및 디클록사실린나트륨표준품의 수용액(1 → 2500)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약 및 디클록사실린나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3) 이 약의 수용액은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 7.5이다.

순도시험  디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐 - 50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

발열성물질  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 mL 당 20 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 단, 시험주사량은 토끼의 체중 Kg 당 검액 1.0 mL로 한다.

수    분  3.0 ∼ 4.5 % (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 적당량을 정밀하게 달아 충분한 양의 1 % 인산염완충액(pH 6.0)을 넣어 녹여 mL 당 1 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 따로 디클록사실린나트륨표준품 적당량을 정밀하게 달아 1 % 인산염완충액(pH 6.0)을 넣어 녹여 mL 당 1 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 표준액으로 한다. 표준액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 7 일 이내에 쓴다. 검액 및 표준액 2 mL를 각각 정확하게 요오드병에 취하고 1 mol/L 수산화나트륨시액 2 mL를 정확하게 넣고 15 분간 방치한 다음 각각 희석시킨 염산(1 → 10) 2 mL 및 0.01 mol/L 요오드액 10.0 mL를 넣은 다음 15 분간 방치하고 필요하면 사염화탄소 5 mL를 넣어 흔들어 섞고 마이크로뷰렛을 써서 각각 0.01 mol/L 티오황산나트륨액으로 적정한다 (지시약 : 필요하면 전분시액 0.2 ∼ 0.5 mL). 따로 검액 및 표준액에 각각 0.01 mol/L 요오드액 10 mL를 정확하게 넣고 이하 같은 방법으로 (다만, 15분간 방치하지 않는다.) 공시험하여 보정한다. 검액 및 표준액에 소비된 0.01 mol/L 요오드액의 양(mL)을 각각 VT 및 VS로 한다.

저 장 법  기밀용기

록시트로마이신

Roxithromycin

C41H76N2O15 : 837.05

이 약은 에리트로마이신의 유도체이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대해서 록시트로마이신 (C41H76N2O15) 970 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 결정성 가루이다.

이 약은 에탄올 또는 아세톤에 잘 녹고 메탄올에 녹으며 아세토니트릴에 조금 녹고 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  이 약 및 록시트로마이신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타

비선광도  [eqn: [alpha]_D^20] :-93 ∼ -96° (환산한 무수물로서 0.5 g, 아세톤, 50 mL, 100 mm)

순도시험  1) 중금속  이 약 2 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

2) 에리트로마이신 및 에리트로마이신옥심  이 약 약 0.2 g (역가)을 달아 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신표준품 40 mg (역가)을 달아 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 에리트로마이신표준액으로 하며, 에리트로마이신옥심표준품 40 mg을 달아 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 에리트로마이신옥심표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액, 에리트로마이신표준액 및 에리트로마이신옥심표준액 각각 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한 후 톨루렌·클로로포름·디에틸아민 혼합액(50 : 40 : 7)을 전개용매로 하여 전개한다. 박층판을 꺼내어 100 ∼ 105 ℃에서 5 분간 건조시킨 다음 인몰리브덴산 2.5 g을 달아 황산 2.5 mL 및 아세트산무수물 50 mL를 넣어 녹인 발색제를 고르게 뿌리고 100 ∼ 105 ℃에서 가온할 때 나타나는 검액의 반점은 에리트로마이신표준액 (Rf 값 약 0.35) 및 에리트로마이신옥심표준액 (Rf 값 약 0.28)에서 나타나는 반점보다 크거나 진하지 않다 (각각 2.0 % 이하).

3) 유연물질  이 약 40 mg을 정밀하게 달아 이동상 A에 녹이고 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 록시트로마이신표준품 20 mg을 정밀하게 달아 이동상 A에 녹이고 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 1 mL을 정확하게 취하여 이동상 A를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 록시트로마이신에 대한 상대유지시간이 약 1.05 피크의 면적은 표준액의 록시트로마이신 피크면적의 2 배보다 크지 않다. 또한 록시트로마이신 및 록시트로마이신에 대한 상대유지시간이 1.05 피크 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 록시트로마이신 피크면적보다 크지 않고 검액의 록시트로마이신 이외의 피크면적의 합은 표준액의 록시트로마이신 피크면적의 6 배보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 205 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm의 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B의 혼합비를 다음과 같이 변화시켜 농도기울기를 제어한다.

이동상 A - 인산이수소암모늄용액(17 → 100) 200 mL에 물 510 mL을 넣어 2 mol/L 수산화나트륨시액으로 pH를 5.3으로 조정한다. 이 액에 아세토니트릴 315 mL를 넣는다.

이동상 B - 아세토니트릴․물 혼합액(7 : 3)

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)	유출 조건
0 ～ 38	100	0	일정 조성
38 ～ 39	100 → 90	0 → 10	선형 농도기울기
39 ～ 80	90	10	일정 조성

유량 : 록시트로마이신의 유지시간이 약 21 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 2 mL을 정확하게 취하여 이동상 A를 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 록시트로마이신 피크면적이 표준액의 록시트로마이신 피크면적의 15 ∼ 25 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 록시트로마이신표준품 및 N-데메틸록시트로마이신 5 mg을 달아 이동상 A에 녹이고 100 mL로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 N-데메틸록시트로마이신, 록시트로마이신의 순으로 유출하고 그의 분리도는 6 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 5 회 반복할 때 록시트로마이신의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

수    분  3.0 % 이하 (0.3 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.1 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 및 록시트로마이신표준품 약 20 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 각각 이동상을 넣어 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 록시트로마이신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

록시트로마이신 (C41H76N2O15)의 역가 (μg)

=록시트로마이신표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 205 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소암모늄용액(17 → 100) 200 mL에 물 510 mL을 넣고 2 mol/L 수산화나트륨시액으로 pH를 5.3이 되도록 조정한다. 이 액에 아세토니트릴 315 mL를 넣는다.

유  량 : 록시트로마이신의 유지시간이 약 11 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 록시트로마이신표준품 및 N-데메틸록시트로마이신 5 mg을 달아 이동상에 녹여 100 mL로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험할 때 N-데메틸록시트로마이신, 록시트로마이신의 순으로 유출하고, 그 분리도는 6 이상이며 록시트로마이신의 피크의 대칭계수는 1.5 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 록시트로마이신 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

리  팜  피  신

Rifampicin

C43H58N4O12 : 822.94

이 약은 Streptomyces mediterranei를 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 화합물의 유도체이다.

이 약은 정량할 때 1 mg에 대하여 리팜피신 (C43H58N4O12) 970 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 등적색 ∼ 적갈색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물, 아세토니트릴, 메탄올 또는 에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약과 리팜피신표준품의 메탄올용액(1 → 5000) 5 mL에 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0) 을 넣어 100 mL로 한다. 이 액들을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약 및 리팜피신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 현탁시킨 액의 pH는 4.0 ∼ 6.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 약 0.10 g을 정밀하게 달아 아세토니트릴을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액원액으로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 희석액을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 검액원액 1 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴을 넣어 정확하게 100 mL로 하고 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 희석액을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 50 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 리팜피신 피크에 대한 상대유지시간이 약 0.7인 유연물질의 피크면적은 표준액의 리팜피신의 피크면적의 1.5 배보다 크지 않고 (1.5 % 이하), 검액의 리팜피신 및 상대유지시간 약 0.7에 유출되는 유연물질 이외의 피크면적은 표준액의 리팜피신 피크면적보다 크지 않으며 (1 % 이하), 그 합은 표준액의 리팜피신 피크면적의 3.5 배보다 크지 않다 (3.5 % 이하).

◦ 희석액 : 시트르산일수화물 2.1 g, 인산수소이칼륨 13.4 g, 인산이수소칼륨 3.1 g을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 1000 mL로 하고 이 액과 아세토니트릴을 3 : 1 로 혼합한다.

조작조건

정량법의 조작조건에 따른다.

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 2 mL를 정확하게 취하여 희석액을 넣어 정확하게 20 mL가 되게 한다. 이 액 50 μL로부터 얻은 리팜피신의 피크면적은 표준액 50 μL로부터 얻은 리팜피신의 피크면적의 7 ∼ 13 %이다.

시스템의 성능 : 리팜피신의 아세토니트릴 용액(1 → 5000) 5 mL에 파라옥시벤조산부틸의 아세토니트릴 용액(1 → 5000) 1 mL를 넣어 섞고 희석액을 넣어 정확하게 50 mL가 되게 한다. 이 액 50 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 파라옥시벤조산부틸, 리팜피신의 순서로 유출하고 분리도는 1.5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 50 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 리팜피신의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

측정범위 : 리팜피신 유지시간의 약 3 배의 범위

건조감량  2.0 % 이하 (1.0 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  0.1% (1 g)

정 량 법  이 약 및 리팜피신표준품 약 40 mg (역가)을 정밀하게 달아 아세토니트릴을 넣어 녹여 정확하게 200 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 시트르산․인산염․아세토니트릴시액을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 50 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 리팜피신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

리팜피신 (C43H58N4O12)의 역가 (μg)

= 리팜피신표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

◦ 희석액 : 시트르산일수화물 2.1 g, 인산수소이칼륨 13.4 g, 인산이수소칼륨 3.1 g을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 1000 mL로 하고 이 액과 아세토니트릴을 3 : 1 로 혼합한다.

조작조건

검 출 기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼    럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 10 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정 온도

이 동 상 : 시트르산일수화물 4.2 g 및 과염소산나트륨 1.4 g을 물을 넣어 녹여 정확하게 1 L로 한 액․아세토니트릴․pH 3.1 인산염완충액 혼합액 (11 : 7 : 2)

◦ pH 3.1 인산염완충액  인산이수소칼륨 136.1 g을 물 500 mL에 녹이고 여기에 인산 6.3 mL 및 물을 넣어 정확하게 1 L로 한다.

유    량 : 리팜피신의 유지시간이 약 8 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 리팜피신의 아세토니트릴용액(1 → 5000) 5 mL에 파라옥시벤조산부틸의 아세토니트릴용액(1 → 5000) 1 mL을 넣고, 시트르산․인산염․아세토니트릴시액을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 50 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 파라옥시벤조산부틸, 리팜피신의 순으로 유출하고 분리도는 1.5 이상이다.

시스템재현성 : 표준액 50 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 5 회 반복할 때 리팜피신의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

리팜피신 캡슐

Rifampicin Capsules

이 약은 정량할 때 표시량의 93.0 ∼ 105.0 %에 해당하는 리팜피신 (C43H58N4O12 : 822.94)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢리팜피신｣을 가지고 캡슐제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  1) 이 약의 내용물을 꺼내어 잘 섞고 필요하면 가루로 한다. 이 약의 표시역가에 따라 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 메탄올 100 mL에 녹여 여과한다. 여액 5 mL에 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)을 넣어 100 mL로 한 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 234 ∼ 238 nm, 252 ∼ 256 nm, 331 ∼ 335 nm 및 472 ∼ 476 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

2) 이 약을 가루로 하여 표시역가에 따라 약 0.1 g을 달아 유리마개플라스크에 넣고 메탄올 10 mL를 넣어 수 분간 세게 흔들어 섞고 여과하여 검액으로 한다. 따로 리팜피신표준품 적당량을 달아 메탄올에 녹여 1 mL 당 5 mg을 함유하는 용액을 만들어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한 다음 아세톤 또는 클로로포름․에탄올혼합액(2 : 1)을 전개용매로 하여 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 검액 및 표준액에서 얻은 홍색반점의 Rf 값은 같다.

순도시험  유연물질  이 시험은 검액 및 표준액을 만든 다음 신속하게 조작한다. 이 약 20 캡슐 이상을 가지고 내용물을 꺼내어 그 질량을 정밀히 달아 가루로 한다. 이 약의 표시역가에 따라 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 아세토니트릴에 녹이고 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 2 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴․메탄올혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 리팜피신표준품 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 아세토니트릴에 녹이고 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 2 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴․메탄올혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴․메탄올 혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 리팜피신에 대한 상대유지시간 약 0.5의 퀴논체 및 약 1.2의 N-옥시드체의 양은 각각 4.0 % 이하 및 1.5 %이하이다. 또한 위의 피크 이외의 각각의 유연물질의 양은 1.0 % 이하이며 유연물질의 총량은 2.0 % 이다. 단, 퀴논체 및 N-옥시드체의 피크면적은 자동적분법에 따라 구한 면적에 각각 감도계수 1.24 및 1.16을 곱한 값으로 한다.

유연물질의 양 (%) [eqn: = {W _{S}} over {W _{T}} ` TIMES `` {A _{i}} over {A _{S}} ` TIMES `2]

WS : 리팜피신표준품의 채취량 [mg (역가)]

WT : 이 약의 채취량 [mg (역가)]

AS : 표준액의 피크면적

Ai : 각 유연물질의 피크면적

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 254 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm의 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 과염소산나트륨 2.1 g, 시트르산일수화물 6.5 g 및 인산이수소칼륨 2.3 g을 물 1100 mL에 녹이고 아세토니트를 900 mL를 넣는다.

유량 : 리팜피신의 유지시간이 약 12 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 리팜피신의 유지시간의 약 2.5 배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴․메탄올혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 리팜피신의 피크면적이 표준액의 리팜피신의 피크면적의 3.5 ∼ 6.5 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 리팜피신의 피크의 이론단수는 2500 이상, 대칭계수는 4.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 리팜피신의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

용출시험  이 약 1 캡슐을 취하여 시험액으로 0.1 mol/L 염산시액 900 mL를 써서 제 1 법에 따라 매분 100 회전으로 시험한다. 용출시험 시작 45 분 후에 용출액을 취하여 여과한다. 처음 여액 10 mL는 버리고 다음 여액 V mL를 정확하게 취하여 시험액을 넣어 정확하게 V' mL로 하여 검액으로 한다. 따로 미리 건조한 리팜피신표준품 적당량을 정밀하게 달아 시험액을 넣어 녹여 검액과 같은 농도로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 시험액을 대조로 하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험하여 475 nm 부근의 흡수극대파장에서 흡광도 AT 및 AS를 측정한다. 이 약의 45분간의 용출률이 75 % (Q) 이상일 때 적합하다.

리팜피신 (C43H58N4O12)의 표시량에 대한 용출률 (%)

= CS[eqn: ~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~{V~'}over{V~}~times~{1}over{C}~times~{90000}]

CS : 표준액의 농도 [mg (역가)/mL]

C : 1 캡슐 중 리팜피신 (C43H58N4O12)의 표시량 [mg (역가)]

제제균일성시험  질량편차시험을 시험할 때 적합하다.

건조감량  3.0 % 이하 (0.1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  이 약 20 캡슐 이상을 취하여 내용물을 꺼내어 질량을 정밀하게 단다. 이 약의 표시역가에 따라 약 75 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 아세토니트릴․메탄올 혼합액(1 : 1)에 녹이고 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 시트르산일수화물 2.1 g, 인산수소이나트륨십이수화물 27.6 g 및 인산이수소칼륨 3.1 g을 물․아세토니트릴 혼합액(3 : 1) 1000 mL에 녹인 액을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 리팜피신표준품 약 30 mg (역가)을 정밀히 달아 아세토니트릴․메탄올 혼합액(1 : 1) 20 mL에 녹이고 아세토니트릴을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 시트르산일수화물 2.1 g, 인산수소이나트륨십이수화물 27.6 g 및 인산이수소칼륨 3.1 g을 물․아세토니트릴 혼합액(3 : 1) 1000 mL에 녹인 액을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 50 μL씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각각의 액의 리팜피신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

리팜피신 (C43H58N4O12)의 역가 (μg)

= 리팜피신표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} TIMES {5} over {2}]

조작조건

｢리팜피신｣의 정량법의 조작조건을 따른다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 리팜피신표준품 30 mg (역가)을 아세토니트릴․메탄올 혼합액(1 : 1) 20 mL에 녹이고 아세토니트릴을 넣어 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 취하고 파라옥시벤조산부틸의 아세토니트릴․메탄올 혼합액(1 : 1) 용액(1 → 5000) 2 mL를 넣은 다음 시트르산일수화물 2.1 g, 인산수소이나트륨십이수화물 27.6 g 및 이산이수소칼륨 3.1 g을 물․아세토니트릴 혼합액(3 : 1) 1000 mL에 녹인 액을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 50 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 파라옥시벤조산부틸, 리팜피신의 순서로 유출하고, 그 분리도는 1.5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 50 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 리팜피신의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

린코마이신염산염수화물

Lincomycin Hydrochloride Hydrate

염산린코마이신	C18H34N2O6S․HCl․H2O : 461.01

이 약은 Streptomyces lincolnensis var. lincolnensis를 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 화합물의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 린코마이신 (C18H34N2O6S : 406.54) 825 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물 또는 메탄올에 잘 녹으며 에탄올에 조금 녹으며, 아세토니트릴에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 및 린코마이신염산염수화물표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 페이스트법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약의 수용액(1 → 100)은 염화물의 정성반응 2)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [alpha]_D^20] : +135 ∼ +150° (0.5 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.1 g을 물 1 mL에 녹인 액의 pH는 3.0 ∼ 5.5이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색이고 맑다.

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 1.0 mL를 넣는다 (5 ppm 이하).

3) 린코마이신 B 함량  정량법의 검액 20 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 린코마이신 및 린코마이신에 대한 상대유지시간이 약 0.5인 린코마이신 B의 피크면적을 측정할 때 린코마이신 B의 피크면적은 린코마이신 및 린코마이신 B 피크면적의 합의 5.0 % 이하이다.

조작조건

정량법의 조작조건에 따른다.

시스템적합성

시스템의 성능 및 시스템의 재현성은 정량법의 시스템적합성을 따른다.

검출의 확인 : 검액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 린코마이신 피크면적이 검액 20 μL에서 얻은 린코마이신 피크면적의 3.5 ∼ 6.5 %가 되는 것을 확인한다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 린코마이신염산염 1 mg (역가) 당 0.5 EU 이하이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 녹여 mL 당 3.0 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다.

수    분  3.0 ∼ 6.0 % (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 린코마이신염산염표준품 약 10 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 린코마이신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

린코마이신 (C18H34N2O6S)의 역가 (μg)

= 린코마이신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 46 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산 13.5 mL에 물을 넣어 1 L로 하고 암모니아시액을 넣어 pH를 6.0으로 조정한다. 이 액 780 mL에 아세토니트릴 150 mL와 메탄올 150 mL을 넣는다.

유량 : 린코마이신의 유지시간이 약 9 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 린코마이신피크의 이론단수는 4000 이상이고 대칭계수는 1.3 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 린코마이신 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

린코마이신염산염 주사액

Lincomycin Hydrochloride Injection

이 약은 수성의 주사제로 정량할 때, 표시량의 93.0 ～ 107.0 %에 해당하는 린코마이신(C18H34N2O6S : 406.54)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢린코마이신염산염수화물｣을 가지고 주사제의 제법에 따라 만든다.

성    상  이 약은 무색의 맑은 액이다.

확인시험  이 약의 표시량에 따라 ｢린코마이신염산염수화물｣ 30 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물 30 mL를 넣어 검액으로 한다. 따로 린코마이신염산염표준품 10 mg (역가)을 물 10 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 아세트산암모늄 150 g을 물 800 mL에 녹이고 강암모니아수를 넣고 pH를 9.6으로 맞춘 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다. 이 액 80 mL에 2-프로판올 40 mL 및 에틸아세테이트 90 mL를 넣어 흔들어 섞고 위 층을 전개용매로 하여 약 15 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 과망간산칼륨용액(1 → 1000)을 고르게 뿌릴 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

pH  3.5 ～ 5.5

무균시험  시험할 때 적합하다.

엔도톡신  이 약은 린코마이신으로서 1 mg (역가) 당 0.5 EU 미만이다.

불용성이물시험  시험할 때 적합하다.

주사제의 불용성미립자시험  시험할 때 적합하다.

주사제의 실용량시험  시험할 때 적합하다.

정 량 법  이 약의 표시역가에 따라 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정확하게 취하여 이동상으로 정확하게 100 mL로 하고 이하 ｢린코마이신염산염수화물｣의 정량법에 따라 시험한다.

린코마이신 (C18H34N2O6S)의 역가 (μg)

= 린코마이신염산염표준품의 역가 (μg)[eqn: ~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~ 10]

저 장 법  밀봉용기.

린코마이신염산염 캡슐

Lincomycin Hydrochloride Capsules

확인시험  1) 이 약 내용물을 가지고 표시량에 따라 린코마이신염산염으로서 50 mg (역가)에 해당하는 양과 린코마이신염산염표준품 약 50 mg (역가)씩을 달아 메탄올 10 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메틸에틸케톤․아세톤․물혼합액(8 : 4 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 정도 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 0.5 % 과망간산칼륨용액을 뿌리고 10 분 후에 0.2 % 브롬페놀블루용액을 뿌릴 때 검액 및 표준액에서 얻은 청색반점의 Rf 값은 같다.

정 량 법  이 약의 표시역가에 따라 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정확하게 취하여 이동상으로 정확하게 100 mL로 하고 이하 ｢린코마이신염산염수화물｣의 정량법에 따라 시험한다.

린코마이신 (C18H34N2O6S)의 역가 (μg)

= 린코마이신염산염표준품의 역가 (μg)[eqn: ~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~ 10]

주사용 메로페넴

Meropenem for injection

이 약은 쓸 때 녹여 쓰는 주사제로 정량할 때 표시량의 93.0 ～ 107.0 %에 해당하는 메로페넴(C17H25N3O5S : 383.47)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢메로페넴수화물｣ 및 탄산나트륨을 가지고 주사제의 제법에 따라 만든다.

성    상  이 약은 흰색 ～ 담황색의 결정성가루이다.

확인시험  이 약을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 파수 3410 ㎝-1, 1750 ㎝-1, 1655 ㎝-1, 1583 ㎝-1, 및 1391 ㎝-1 부근에서 흡수를 나타낸다.

pH  이 약 메로페넴 0.25 g (역가)에 해당하는 양을 물 5 mL에 녹인 액의 pH는 7.3 ～ 8.3이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약의 표시량에 따라 ｢메로페넴수화물｣ 1.0 g (역가)에 해당하는 양을 달아 물 20 mL에 녹일 때 액의 색은 다음의 비교액보다 진하지 않다.

◦ 비교액 : 염화코발트의 색의 비교원액 0.3 mL 및 염화제이철의 색의 비교액 원액 1.2 mL에 희석시킨 염산(1 → 40) 18.5 mL를 넣는다.

2) 유연물질  이 약 약 0.125 g (역가)을 정밀하게 달아 트리에틸아민․인산염완충액(pH 5.0)에 녹여 정확하게 25 mL로 하여 검액으로 한다 (쓸 때 만든다). 따로 메로페넴표준품 약 25 mg (역가)을 정밀하게 달아 트리에틸아민․인산염완충액(pH 5.0)에 녹여 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 트리에틸아민․인산염완충액(pH 5.0)을 넣어 정확하게 200 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 ｢메로페넴｣의 순도시험 2)에 따라 시험한다. 검액의 개환체 및 이량체의 피크면적과 표준액의 메로페넴의 피크면적을 측정하여 다음 식에 따라 개환체 및 이량체의 양을 구한다 (개환체 0.5 % 이하, 이량체 0.5 % 이하).

개환체의 양(%)

[eqn: =~{A_{Ta}}over{A_{S}}~times~{메로페넴표준품의~역가(mg)}over{이~약의~채취량(mg)}~times~{5over4}]

이량체의 양(%)

[eqn: =~{A_{Tb}}over{A_{S}}~times~{메로페넴표준품의~역가(mg)}over{이~약의~채취량(mg)}~times~{5over4}]

ATa : 검액 중 개환체의 피크면적

ATb : 검액 중 이량체의 피크면적

AS : 표준액의 메로페넴의 피크면적

무균시험  시험할 때 적합하다.

엔도톡신  이 약은 메로페넴으로서 1 mg (역가) 당 0.12 EU 미만이다.

불용성이물시험  시험할 때 적합하다.

주사제의 불용성미립자시험  시험할 때 적합하다.

제제균일성시험  시험할 때 적합하다.

건조감량  9.5 ～ 12.0 % (0.1 g, 0.7 kPa, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  ｢메로페넴수화물｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣은 다음 트리에틸아민․인산염완충액(pH 5.0)을 넣어 100 mL로 하여 검액으로 한다.

저 장 법  밀봉용기.

무  피  로  신

Mupirocin

C26H44O9 : 500.62

이 약은 Pseudomonas fluorescens을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 화합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 무피로신 (C26H44O9 : 500.62) 920 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루이다.

이 약은 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 클로로포름에 잘 녹고 에텔에 녹기 어려우며 물에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  이 약 및 무피로신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 페이스트법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

pH  이 약의 포화수용액의 pH는 3.5 ∼ 4.5 이다.

순도시험	총 유연물질  이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 아세트산나트륨완충액(pH 4.0)·메탄올 혼합액(1 : 1)을 넣어 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액 A로 하고 이 검액 A 5 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 아세트산나트륨완충액(pH 4.0)·메탄올 혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 200 mL로 하여 검액 B로 한다. 검액 B 20 μL를 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 무피로신의 피크면적을 구한다. 따로 검액 A 20 μL를 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 용매피크를 제외한 각 유연물질의 피크면적을 구한다 (8.0 % 이하).

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (파장 240 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 300 mm인 스테인레스강관에 6 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.1 mol/L 아세트산암모늄완충액(pH 5.7)·테트라히드로푸란혼합액(75 : 25)

유  량 : 2.0 mL/분

수    분  1.0 % 이하 (1.0 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 무피로신리튬표준품 약 11 mg (역가)씩을 각각 정밀하게 달아 아세토니트릴 25 mL를 넣어 녹이고 인산염완충액(pH 6.3)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 무피로신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (파장 229 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 1.5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 인산염완충액(pH 6.3)․아세토니트릴혼합액(75 : 25)

유  량 : 2.0 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 mL를 정확하게 취하여 6 mol/L 염산으로 pH를 2.0으로 조정하여 2 시간 방치한 다음 5 mol./L 수산화나트륨으로 pH를 6.3 ± 0.2로 조정하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 무피로신산가수분해물 및 무피로신의 상대유지시간은 각각 0.9 및 1.0이며 두 피크 사이의 분리도는 2.0 이상이다. 표준액을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 무피로신 피크의 이론단수는 1500 이상이고 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템재현성 : 표준액을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 무피로신 피크의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦인산염완충액 pH 6.3  0.05 mol/L 인산이수소나트륨용액을 만들고 10 mol/L 수산화나트륨으로 pH를 6.3 ± 0.2로 조정한다.

저 장 법	기밀용기

무피로신 연고

Mupirocin Ointment

정 량 법  ｢무피로신｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 10 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 아세토니트릴 25 mL를 넣어 녹이고 인산염완충액(pH 6.3)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다

무피로신칼슘수화물

Mupirocin Calcium Hydrate

C52H86O18Ca․2H2O : 1075.34

이 약은 Pseudomonas fluorescens을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 화합물의 칼슘염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 무피로신 (C26H44O9 : 500.62) 895 ∼ 970 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루이며 맛은 쓰다.

이 약은 메탄올에 잘 녹고 물 또는 에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약의 메탄올용액(1 → 200) 1 mL에 과염소산히드록실아민․무수에탄올시액 4 mL와 N,N'-디시클로헥실카르보디이미드․무수에탄올시액 1 mL를 넣고 잘 흔들어 섞은 후 미온탕 중에서 20 분간 방치한다. 식힌 후 과염소산철(Ⅲ)․무수에탄올시액 1 mL를 넣어 흔들어 섞을 때, 액은 짙은 자색을 띤다.

2) 이 약의 수용액 (1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 219 ∼ 224 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

3) 이 약을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 페이스트법에 따라 측정할 때 파수 1708 ㎝-1, 1648 ㎝-1, 1558 ㎝-1, 1231 ㎝-1, 1151 ㎝-1 및 894 ㎝-1 부근에서 흡수를 나타낸다.

4) 이 약의 수용액(3 → 1000)은 칼슘염의 정성반응 3)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -16 ∼ -20° (환산한 무수물로 1 g, 메탄올, 20 mL, 100 mm)

순도시험  1) 염화물  이 약 약 50 mg을 정밀하게 달아 2 mol/L 질산 1 mL 및 메탄올 15 mL의 혼합액을 넣어 녹인 액을 검액으로 하여 시험한다. 비교액은 0.02 mol/L 염산 0.7 mL에 2 mol/L 질산 1 mL 및 메탄올 15 mL의 혼합액을 넣는다 (0.5 % 이하).

2) 유연물질  이 약 약 50 mg을 달아 0.1 mol/L 아세트산․아세트산나트륨완충액(pH 4.0)․테트라히드로푸란용액(3 → 4)혼합액(1 : 1)에 녹이고 10 mL로 하여 검액 (1)로 한다. 이 액 2 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 아세트산․아세트산나트륨완충액(pH 4.0)․테트라히드로푸란용액(3 → 4) 혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액(2)로 한다. 만든 검액은 4 ∼ 8 ℃에 보관한다. 검액 (1) 및 검액 (2) 20 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 (1) 및 검액 (2)의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 무피로신에 대한 상대유지시간 약 0.7의 주 유연물질은 4.0 % 이하이며 용매 피크 및 무피로신 피크 이외의 총 유연물질의 합은 6.0 % 이하이다.

주 유연물질의 양 (%)

총 유연물질의 합 (%)

A : 검액 (1)에서 얻은 용매 및 무피로신 피크 이외의 피크면적의 합

Ai : 검액 (1)에서 얻은 무피로신에 대한 상대유지시간 약 0.7인 피크의 면적

Am : 검액 (2)에서 얻은 무피로신 피크면적에 50을 곱한 값

P : 정량법에 따라 구한 이 약 1 mg 당 무피로신 (C26H44O9) 역가 (mg)

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 용매 피크 이후부터 무피로신의 유지시간의 약 3 배 범위

시스템적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

검출의 확인 : 검액 (2) 1 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 아세트산․아세트산나트륨완충액(pH 4.0)․테트라히드로푸란용액(3 → 4) 혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 무피로신 피크면적이 검액 (2) 20 μL에서 얻은 피크면적의 4 ∼ 6 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 재현성 : 검액 (2) 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 무피로신의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦ 0.1 mol/L 아세트산․아세트산나트륨완충액(pH 4.0)  아세트산나트륨삼수화물 13.61 g을 달아 물 약 750 mL를 넣어 녹이고 아세트산무수물로 pH를 4.0으로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

수    분  3.0 ∼ 4.5 % (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 무피로신리튬표준품 약 20 mg (역가)씩을 각각 정밀하게 달아 0.1 mol/L 아세트산·아세트산나트륨완충액(pH 4.0)․테트라히드로푸란용액(3 → 4) 혼합액(1 : 1)에 녹이고 정확하게 200 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액은 4 ∼ 8 ℃에 보존한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 무피로신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

무피로신(C26H44O9)의 역가 (μg)

= 무피로신리튬표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 240 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세트산암모늄 7.71 g을 물 750 mL에 녹이고, 아세트산무수물을 넣어 pH 5.7로 조정한 후 물을 넣어 1 L로 한다. 이 액 300 mL에 테트라히드로푸란 100 mL를 넣는다.

유량 : 무피로신의 유지시간이 약 12.5 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 무피로신리튬표준품 약 20 mg 및 파라옥시벤조산에틸 약 5 mg을 달아 0.1 mol/L 아세트산아세트산나트륨완충액(pH 4.0)․테트라히드로푸란용액(3 → 4) 혼합액(1 : 1)에 녹이고 200 mL로 한다. 이 액 20 μL을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 무피로신, 파라옥시벤조산에틸 순으로 유출하고, 그 분리도는 12 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL을 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 무피로신 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

미노사이클린염산염

Minocycline Hydrochloride

염산미노사이클린	C23H27N3O7․HCl : 493.94

이 약은 테트라사이클린 유도체의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 미노사이클린 (C23H27N3O7 : 457.48) 890 ∼ 950 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 황색의 결정성 가루이다.

이 약은 디메틸포름아미드에 잘 녹고 메탄올에 녹으며, 물에 조금 녹고, 에탄올에는 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 및 미노사이클린염산염표준품을 염산메탄올용액(19 → 20000)에 녹인 용액(1 → 62500)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수 스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약 및 미노사이클린염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 염화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3) 이 약의 수용액(1 → 100)은 염화물의 정성반응 2)를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

pH  이 약 1 g을 물 100 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 4.5이다.

흡 광 도  [eqn: E_{1cm} ^{1%}] (358 nm) : 296 ∼ 328 (8 mg, 0.01 mol/L 염산메탄올시액, 500 mL)

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 100 mL에 녹일 때 액은 맑다. 또한 이 약을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험할 때 파장 560 nm에서 흡광도는 0.06 이하이다. 단, 시험은 용액을 만든 후 1 시간 이내에 실시한다.

2) 중금속  이 약 0.5 g을 달아 제 2법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.5 mL를 넣는다 (50 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 50 mg을 달아 이동상 100 mL에 녹이고 검액으로 한다. 검액을 만든 후 신속하게 시험한다. 검액 20 μL를 가지고 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 면적백분율법으로 각 액의 피크면적을 측정할 때 에피미노사이클린은 1.2 % 이하이며, 미노사이클린 및 에피미노사이클린 이외의 각각의 피크면적은 1.0 % 이하이다. 또한 미노사이클린 및 에피미노사이클린 이외의 각각의 피크들의 면적의 합은 2.0 % 이하이다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도 및 이동상은 정량법의 조작조건에 따른다.

유량 : 미노사이클린의 유지시간이 약 12 분이 되게 한다. 이 조건에서 에피미노사이클린의 유지시간은 약 10 분이다.

측정범위 : 용매 피크 이후부터 미노사이클린의 유지시간의 약 2.5 배 범위

시스템적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

검출의 확인 : 검액 2 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 시스템적합성용액 5 mL를 정확하게 취하고 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 20 μL로부터 얻은 미노사이클린 피크면적이 미노사이클린적합성 검액 20 μL로부터 얻은 미노사이클린 피크면적의 3.5 ∼ 6.5 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 미노사이클린 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

수    분  4.3 ∼ 8.0 % (0.3 g, 용량적정법, 직접적정)

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약 미노사이클린 1 mg (역가) 당 1.25 EU 미만이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 녹여 mL 당 5.0 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 검액의 양은 0.6 mL로 한다.

건조감량  10.0 % 이하 (1.0 g, 감압 이하, 100 ℃, 5 시간)

강열잔분  0.5 % 이하 (1.0 g)

정 량 법  이 약 및 미노사이클린염산염표준품 약 80 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 미노사이클린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

미노사이클린(C23H27N3O7)의 역가 (μg)

= 미노사이클린염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 280 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.1 mol/L 수산암모늄용액․0.01 mol/L 에틸렌디아민테트라아세트산이수소니디나트륨용액․테트라히드로푸란․디메틸포름아미드혼합액(180 : 108 : 96 : 72)을 아세트산으로 pH를 4.5가 되도록 한다.

유  량 : 1.0 mL/분

저 장 법  차광한 기밀용기

미토마이신 C

Mitomycin C

C15H18N4O5 : 334.33

이 약은 Streptomyces caespitosus을 배양하여 얻은 항종양활성을 가지는 화합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 미토마이신 C (C15H18N4O5 : 334.33) 970 ∼ 1030 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 청자색 결정 또는 결정성의 가루이다.

이 약은 N,N-디메틸아세트아미드에 잘 녹고, 물 또는 메탄올에 녹기 어려우며, 무수에탄올에 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 및 미토마이신C 표준품의 수용액(1 → 100000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약 및 미토마이신C 표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 5.5 ∼ 7.5이다.

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (362 nm) : 650 ∼ 750 (1.0 mg, 물, 100 mL)

순도시험  유연물질  이 시험은 검액 및 표준액을 만든 다음 신속하게 한다. 이 약 50 mg을 메탄올 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때  검액의 미토마이신 C 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 미토마이신 C의 피크면적보다 크지 않다. 또한 검액의 미토마이신 C 이외의 피크면적의 합은 표준액의 미토마이신 C의 피크면적의 3 배보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 254 nm)

칼럼 : 안지름 6 mm, 길이 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 30 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B의 혼합비를 아래와 같이 변화시켜 농도구배를 제어한다.

이동상 A - 0.5 mol/L 아세트산암모늄 시액 20 mL에 물을 넣어 1 L로 한다. 이 액 800 mL에 메탄올 200 mL를 넣는다.

이동상 B - 0.5 mol/L 아세트산암모늄시액 20 mL에 물을 넣어 1 L로 한다. 이 액에 메탄올 1 L를 넣는다.

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)	유출 조건
0 ～ 10 10 ～ 30 30 ～ 45	100 100 → 0 0	0 0 → 100 100	유출 조건 선형 농도기울기 유출 조건

유량 : 1.0 mL/분

측정범위 : 용매 피크 이후부터 미토마이신 C의 유지시간의 약 2 배 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 10 mL을 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 미토마이신 C의 피크면적이 표준액 10 μL에서 미토마이신 C의 피크면적의 7 ∼ 13 %가 되는지 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 25 mg 및 3-에톡시-4-히드록시벤즈알데히드 40 mg을 메탄올 50 mL에 녹인다 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 미토마이신 C, 3-에톡시-4-히드록시벤즈알데히드 순으로 유출하고 분리도는 15 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 3 회 반복할 때 미토마이신C의 피크면적의 상대표준편차는 3.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 미토마이신 C 1 mg (역가) 당 50 EU 이하이다.

건조감량  1.0 % 이하 (0.1 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  이 약 및 미토마이신 C 표준품 약 25 mg (역가)을 정밀하게 달아 N,N-디메틸아세트아미드를 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액과 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 미토마이신 C의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

미토마이신 C (C15H18N4O5)의 역가 (μg)

= 미토마이신 C 표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 365 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용페닐실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 0.5 mol/L 아세트산암모늄시액 40 mL에 희석시킨 아세트산무수물(1 → 20) 5 mL를 넣고, 다시 물을 넣어 1 L로 한다. 이 액 600 mL에 메탄올 200 mL를 넣는다.

유  량 : 미토마이신 C의 유지시간이 약 7 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 미토마이신 C 표준품 약 25 mg 및 3-에톡시-4-히드록시벤즈알데히드 0.375 g을 N,N-디메틸아세트아미드 50 mL에 녹인다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 조작할 때 미토마이신 C, 3-에폭시-4-히드록시벤즈알데히드의 순으로 유출하고 두 피크의 분리도는 3 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 미토마이신 C 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

바 시 트 라 신

Bacitracin

R1	R2	R3

바시트라신 A :  CH3	CH3	CH3

바시트라신 B1	:  CH3	CH3	H

바시트라신 B2	:   H	CH3	CH3

바시트라신 B3	:  CH3	H	CH3

이 약은 Bacillus subtilis 또는 Bacillus licheniformis을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 바시트라신 A를 주성분으로 하는 펩타이드계 화합물의 혼합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 바시트라신 A(C66H103N17O16S : 1422.69) 60 단위 (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 갈색의 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹으며 무수에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약의 수용액(1 → 100) 3 mL에 4-디메틸아미노벤즈알데히드시액 3 mL를 넣고 적장미색에서 적자색이 나타날 때 까지 흔든 후 아질산나트륨용액(1 → 100) 몇 방울을 넣고 흔들 때 액은 녹색 ∼ 어두운 녹색을 나타낸다.

2)  이 약 및 바시트라신표준품 60 mg씩을 물 10 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 1 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한 다음 1-부탄올․아세트산무수물․물․피리딘․무수에탄올혼합액(30 : 15 : 10 : 6 : 5)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개시킨 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린시액을 고르게 뿌린 다음 110 ℃에서 5 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

pH  이 약 1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 5.5 ∼ 7.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 유연물질  이 약 0.15 g을 0.05 mol/L 황산시액에 녹이고 100 mL로 한다. 이 액 2 mL에 0.05 mol/L 황산시액을 넣어 10 mL로 하여 검액으로 한다. 검액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 252 nm 및 290 nm에서 흡광도 A1 및 A2를 측정할 때  A2/A1은 0.20 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 시험할 때 적합하다. 이 약은 바시트라신 1 mg (역가) 당 0.01 EU 이하이다.

건조감량  5.0 % 이하 (1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  1.0 % 이하 (1 g)

바시트라신 성분함량비  이 약 적당량을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 mL 당 2.0 mg을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 이동상, 검액 및 측정한도용액 각 100 μL 씩을 가지고 이하「바시트라신아연」의 바시트라신 성분함량비 항에 따라 시험한다. 바시트라신 A의 양은 40.0 % 이상이고, 활성바시트라신 (바시트라신 A, B1, B2 및 B3)의 양은 70.0 % 이상이다. 또 바시트라신 B1 피크 이전에 유출되는 모든 피크(초기 유출 펩티드)의 양은 20.0 % 이하이고, 바시트라신 F는 6.0 % 이하이다. 다만, 검액의 피크 중 측정한도용액에서 얻은 바시트라신 A보다 작은 피크 및 이동상에서 나타나는 피크는 제외한다.

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(가)⑥㉮의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균  Micrococcus luteus ATCC 10240을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 400 단위 (역가)을 정밀하게 달아 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 2.0 및 0.5 단위 (역가)가 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 바시트라신표준품 약 400 단위 (역가)을 정밀하게 달아 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 5 단위(역가)을 함유하는 표준원액을 만든다. 이 표준원액은 10 ℃ 이하에서 저장하며 2 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 2.0 및 0.5 단위 (역가)가 함유되도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기(냉소에 보관)

바시트라신아연

Bacitracin Zinc

R1	R2	R3

바시트라신 A	:  CH3	CH3	CH3

바시트라신 B1	:  CH3	CH3	H

바시트라신 B2	:   H	CH3	CH3

바시트라신 B3	:  CH3	H	CH3

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 바시트라신 A (C66H103N17O16S : 1422.69) 65 단위 (역가) 이상을 함유한다. 또한 이 약은 정량할 때 환산한 건조물에 대하여 4.0 ～ 6.0 %의 아연 (Zn : 65.41)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ～ 엷은 황색의 가루이며 냄새는 없거나 약간 있으며 맛은 쓰다.

이 약은 물 또는 알코올에 녹기 어렵고 에테르에 매우 녹기 어려우며 클로로포름에는 거의 녹지 않는다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  이 약 적당량을 달아 0.1 mol/L 염산시액에 녹여 mL 당 500 단위을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 따로 바시트라신아연표준품 적당량을 달아  mL 당 500 단위을 함유하는 용액을 만들어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 10 μL를 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한 다음 메탄올․이소프로필알코올ㆍ디클로르메탄․수산화암모늄․물혼합액(4 : 2 : 2 : 1 : 5)을 전개용매로 하여 약 15 cm 전개한 다음 박층판을 105 ℃ 에서 10 분간 말린다. 여기에 0.2 % 닌히드린․부탄올용액을 고르게 뿌린 다음 약 105 ℃ 에서 5 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점은 암자색을 띠고, 그 Rf 값은 같다.

pH  이 약의 포화용액의 pH는 6.0 ～ 7.5이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

건조감량  5.0 % 이하 (0.1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

바시트라신아연 성분함량비  이 약 적당량을 정밀하게 달아 희석액을 넣어 녹여 mL 당 2.0 mg을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 희석액, 검액 및 측정한도용액 각 100 μL 씩을 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정한다. 다음 식 (1)에 따라 바시트라신 A의 양을 구할 때  40.0 % 이상이고, 식 (2)에 따라 활성바시트라신 (바시트라신 A, B1, B2 및 B3)의 양을 구할 때 70.0 % 이상이다. 또 다음 식 (3)에 따라 바시트라신 B1 피크 이전에 유출되는 모든 피크(초기 유출 펩티드)의 양을 구할 때 20.0 % 이하이고, 식 (4)에 따라 바시트라신 F의 양을 구할 때 6.0 % 이하이다. 다만, 검액에서 얻은 피크 중 측정한도용액에서 얻은 바시트라신 A 보다 작은 피크 및 희석액에서 나타나는 피크는 제외한다.

바시트라신 A의 양 (%) = ×100  (1)

AA : 검액에서 얻은 바시트라신 A의 피크면적

AT : 검액에서 얻은 모든 피크의 합계면적

활성바시트라신의 양 (%) = ×100  (2)

AA, AB1, AB2, AB3 : 바시트라신 A, B1, B2, B3 각 피크면적

AT : 검액에서 얻은 모든 피크의 합계면적

초기유출펩티드의 양 (%) = ×100  (3)

Ai : 바시트라신 B1 피크 이전에 유출되는 모든 피크의 합계면적

AT : 검액에서 얻은 모든 피크의 합계면적

바시트라신 F의 양 (%) = ×100  (4)

AF : 바시트라신 F의 피크면적

AA : 바시트라신 A의 피크면적

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 메탄올․물․인산염완충액 (pH 6.0)․아세토니트릴혼합액(26 : 15 : 5 : 2)

유  량 : 1.0 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 피크확인용용액 100 μL를 가지고 위의 조건으로 측정파장 300 nm에서 조작하여 상대유지시간 약 2.4인 바시트라신 F의 피크 위치를 확인한다. 측정파장을 254 nm로 바꾸고 시스템적합성용액 100 μL를 가지고 위의 조건으로 조작하여 바시트라신 활성부분(바시트라신 A, B1, B2 및 B3) 및 바시트라신 B1 이전에 유출하는 초기유출펩티드와 바시트라신 F를 상대유지시간을 참고하여 확인한다. 바시트라신 C1, C2, C3, B1, B2, B3 및 F의 상대유지시간은 약 0.5, 0.6, 0.6, 0.7, 0.7, 0.8 및 2.4이다. 또 바시트라신 B1 피크가 바시트라신 B2 피크와 분리되는 밸리의 기저선으로부터의 높이 (Hv)에 대한 바시트라신 B1 피크의 기저선으로부터의 높이 (Hp)로 피크 대 밸리 비 (Hv/Hp)를 구할 때 1.2 이하이다.

측정범위 : 바시트라신 A의 유지시간의 약 3 배 범위

◦ 희석액 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨 40 g을 물 1000 mL에 녹이고 묽은 수산화나트륨시액으로 pH를 7.0으로 조정한다.

◦ 시스템적합성용액  바시트라신아연표준품 적당량을 정밀하게 달아 희석액에 녹여 약 2.0 mg/mL의 농도로 한다.

◦ 측정한도용액  시스템적합성용액을 물로 희석하여 약 0.01 mg/mL의 농도로 한다.

◦ 피크확인용용액  시스템적합성용액을 수욕에서 30 분간 가열하고 실온으로 식힌다.

◦ 인산염완충액 (pH 6.0)  인산수소이칼륨 34.8 g을 물 1000 mL에 녹이고 이 액을 인산이수소칼륨 27.2 g을 물 1000 mL에 녹인 액으로 pH를 6.0으로 조정한다.

정 량 법  1) 바시트라신  표준곡선법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(가)⑥㉮의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균  시험용균  Micrococcus luteus ATCC 10240을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 적당량을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산시액으로 mL 당 100 단위 (역가)를 함유하는 용액을 만든 다음 이 용액 적당량을 정확하게 취하여 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 1.00 단위 (역가)가 함유되도록 희석하여 검액으로 한다. 따로 바시트라신표준품 적당량을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산시액으로 mL 당 100 단위(역가)를 함유하는 표준원액을 만든다. 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 0.64, 0.80, 1.00, 1.25 및 1.56 단위 (역가)가 함유되도록 희석하여 표준액으로 하며 mL 당 1.00 단위 (역가)를 함유하는 용액을 표준중간희석액으로 한다. 검액, 표준액 및 표준중간희석액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 나)(4)에 따라 시험한다.

2) 아연  이 약 약 0.2 g (역가)을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 녹여 100 mL로 한다. 이 액 2 mL를 정확하게 취하여 0.001 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 200 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 산화아연 약 3.11 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 염산시액 80 mL를 넣고 가온하여 녹이고 실온으로 식힌 다음 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 용액 적당량을 정확하게 취하여 0.001 mol/L 염산시액으로 mL 당 0.5, 1.5 및 2.5 μg의 아연이 함유되도록 희석하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 원자흡광광도법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액을 가지고 파장 213.8 nm에서 0.001 mol/L 염산시액을 공시험액으로 흡광도를 측정하여 검량선법에 따라 아연의 농도를 구한다.

아연의 함량 (%)

C : 검액 중 아연의 농도(μg/mL)

W : 이 약의 채취량(mg)

m : 검체의 건조감량(%)

저 장 법  기밀용기

바캄피실린염산염

Bacampicillin Hydrochloride

염산바캄피실린	C21H27N3O7S․HCl : 501.98

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 암피실린 (C16H19N3O4S : 349.40) 626 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황색의 결정성 가루이며 특이한 냄새가 있다.

이 약은 메탄올 또는 무수에탄올에 잘 녹고 물에 녹는다.

확인시험  1)  이 약 및 바캄피실린염산염표준품의 메탄올용액(1 → 1000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 바캄피실린염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 염화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 수용액(1 → 50)은 염화물의 정성반응을 나타낸다.

비선광도   : +140 ∼ +170° (환산한 무수물로 0.1 g, 무수에탄올, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.2 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.0 ∼ 5.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하)

3) 유리암피실린  이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 분액깔대기에 넣고 얼음으로 식힌 물 15 mL를 정확하게 넣어 녹이고 얼음으로 식힌 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0) 10 mL를 넣어 흔들고 얼음으로 식힌 클로로포름 25 mL를 넣어 흔든 다음 클로로포름층을 버린다. 다시 클로로포름 25 mL 씩으로 2 회 동일하게 조작한다. 수층을 원심분리하고 상층액을 여과하여 여액을 검액으로 한다. 따로 암피실린표준품 약 20 mg (역가)을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹이고 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0) 10 mL 및 물을 넣어 정확하게 25 mL로 한다. 검액 및 표준액 각 10 mL씩을 정확하게 취하여 수산화나트륨시액 2 mL 씩을 정확하게 넣고 정확하게 15 분간 방치한 다음 각 액에 1 mol/L 염산시액 2 mL, 0.3 mol/L 프탈산수소칼륨완충액(pH 4.6) 10 mL 및 0.005 mol/L 요오드액 10mL를 정확하게 넣고 차광하여 20 분간 방치한 다음 각 액을 0.01 mol/L 티오황산나트륨액으로 적정한다. 다만 적정의 종말점은 액의 색이 무색으로 변할 때로 한다. 따로 검액 및 표준액 각 10 mL씩을 정확하게 취하여 0.3 mol/L 프탈산수소칼륨완충액(pH 4.6) 10 mL 및 0.005 mol/L 요오드액 10 mL을 정확하게 넣고 같은 방법으로 공시험을 하여 보정한다. 검액 및 표준액의 0.005 mol/L 요오드액의 소비량(mL)을 각각 VT 및 VS라 할 때 암피실린의 양은 1.0 % 이하이다.

유리암피실린 함량 (%)

◦ 0.3 mol/L 프탈산수소칼륨완충액(pH 4.6)  프탈산수소칼륨 61.26 g을 달아   물 약 800 mL를 넣어 녹이고 수산화나트륨시액으로 pH를 4.6로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

4) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀히 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에  질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

수    분  1.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  1.5 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 및 바캄피실린염산염표준품 약 80 mg (역가) 씩을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹이고 각각 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 바캄피실린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

암피실린(C16H19N3O4S)의 역가 (μg)

=바캄피실린염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 3.9 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 0.02 mol/L 인산이수소나트륨용액 500 mL에 0.02 mol/L 인산수소나트륨용액을 넣어 pH를 6.8로 조정한다. 이 액 500 mL에 아세토니트닐 500 mL를 넣는다.

유  량 : 1 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 바캄피실린 피크의 이론단수는 3000 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 바캄피실린 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

바캄피실린염산염 정

Bacampicillin Hydrochloride Tablets

확인시험  이 약 표시량에 따라 바캄피실린염산염으로서 적당량과 바캄마이신염산염표준품 적당량을 달아 에탄올에 녹여 mL 당 2 mg을 함유하도록 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 염화메틸렌․클로로포름․에탄올혼합액(10 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 0.3 % 닌히드린메탄올용액을 고르게 뿌릴 때 검액 및 표준액에서 나타나는 반점의 Rf 값은 같다.

정 량 법  이 약 20 정 이상을 가지고 그 질량을 정밀하게 달아 가루로 한다. 암피실린(C16H19N3O4S) 약 56 mg에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹이고 각각 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 바캄피실린염산염표준품 약 80 mg (역가)씩을 정밀히 달아 물을 넣어 녹이고 각각 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 바캄피실린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

암피실린(C16H19N3O4S)의 역가 (μg)

=바캄피실린염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 3.9 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 0.02 mol/L 인산이수소나트륨용액 500 mL에 0.02 mol/L 인산수소나트륨용액을 넣어 pH를 6.8로 조정한다. 이 액 500 mL에 아세토니트닐 500 mL를 넣는다.

유  량 : 1 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 바캄피실린 피크의 이론단수는 3000 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 바캄피실린 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

반코마이신염산염

Vancomycin Hydrochloride

염산반코마이신	C66H75Cl2N9O24․HCl : 1485.71

이 약은 Streptomyces orientalis을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 글리코펩티드계 화합물의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 반코마이신 (C66H75Cl2N9O24: 1449.25) 1000 ∼ 1200 μg (역가)를 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 포름아미드에 녹으며, 메탄올에 녹기 어렵고 에탄올에 매우 녹기 어려우며 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다. 이 약은 흡습성이다.

확인시험  1)  이 약 및 반코마이신염산염표준품의 수용액(1 → 10000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 반코마이신염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약 20 mg을 달아 물 10 mL를 넣어 녹인 다음 질산은시액 한 방울을 넣을 때 액은 혼탁된다.

비선광도   : -30 ∼ -40° (환산한 무수물로 0.2 g, 물, 20 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.25 g을 물 5 mL에 녹인 액의 pH는 2.5 ∼ 4.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 유연물질  이 약 0.10 g을 이동상 A 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 취하여 이동상 A를 넣어 정확하게 25 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 필요에 따라 이동상 A 20 μL를 가지고 똑같이 시험하여 용매 피크 및 기준선의 변동을 보정한다. 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 반코마이신 피크 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 반코마이신 피크면적보다 크지 않다. 또한 검액의 반코마이신 이외의 피크면적의 합은 표준액의 반코마이신피크면적의 3배보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 280 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25℃ 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B의 혼합비를 아래와 같이 변화시켜 농도구배를 제어한다.

이동상 A - 트리에틸아민완충액(pH 3.2)․아세토니트릴․테트라히드로푸란 혼합액(92 : 7 : 1). 반코마이신의 유지시간이 7.5 ∼ 10.5분이 되도록 아세토니트릴의 비율을 조정한다.

이동상 B - 트리에틸아민완충액(pH 3.2)․아세토니트릴․테트라히드로푸란 혼합액(70 : 29 : 1)

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)
0 ～ 12 12 ～ 20 20 ～ 22	100 100 → 0 0	0 0 → 100 100

유량 : 1.5 mL/분

측정범위 : 용매 피크 이후부터 반코마이신 유지시간의 약 2.5배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 20 μL로부터 얻은 반코마이신 피크면적이 검액의 반코마이신 피크면적의 3 ∼ 5%가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 5 mg을 물 10 mL에 녹여 65 ℃에서 48시간 가온한 다음, 상온으로 식힌다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 유연물질 Ⅰ, 유연물질 Ⅱ의 순으로 유출하고 유연물질 Ⅰ과 반코마이신의 분리도는 3 이상이고, 반코마이신의 피크의 이론단수는 1500 이상이며, 유연물질 Ⅱ는 15 ∼ 18분에 유출된다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 반코마이신의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

○ 트리에틸아민완충액(pH 3.2)  트리에틸아민 4 mL에 물 약 2000 mL를 넣고 인산으로 pH를 3.2로 조정한다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 시험할 때 적합하다. 이 약은 반코마이신 1 mg (역가) 당 0.25 EU 이하이다.

수    분  5.0 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정), 단 수분측정용포름아미드․수분측정용메탄올혼합액(3 : 1)을 사용한다.

강열잔분  1.0 % 이하 (1.0 g)

정 량 법  원통평판법  (1) 배지 (가) 종층용 및 기층용 한천배지

펩톤          5.0 g

육엑스        3.0 g

한천         15.0 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 멸균 후의 pH가 6.2 ∼ 6.4가 되도록 한다.

(2) 시험용 균  Bacillus subtilis ATCC 6633을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 25 mg (역가)을 정밀히 달아 물에 녹이고 정확하게 25 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)을 넣어 mL 당 100.0 μg (역가) 및 25.0 μg (역가)를 함유하도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 반코마이신염산염표준품 약 25 mg (역가)을 정밀히 달아 물에 녹이고 정확하게 25 mL로 하여 표준원액으로 한다. 표준원액은 5 ℃ 이하에서 보관하고 7일 이내에 사용한다. 정량할 때 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염 완충액(pH 4.5)을 넣어 mL 당 100.0 μg (역가) 및 25.0 μg (역가)을 함유하는 액을 만들어 각각 고농도 표준액 및 저농도 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

주사용 반코마이신염산염

Vancomycin Hydrochloride for Injection

이 약은 쓸 때 녹여 쓰는 주사제로 정량할 때 표시량의 90.0 ∼ 115.0 %에 해당하는 반코마이신 (C66H75Cl2N9O24 : 1449.25)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢반코마이신염산염｣을 가지고 주사제의 제법에 따라 만든다.

성    상  이 약은 흰색의 덩어리 또는 가루이다.

확인시험  1) 이 약의 표시량에 따라 ｢반코마이신염산염으로서 5 mg (역가)에 해당하는 양을 물 50 mL에 녹인 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 279 ∼ 283 nm에서 흡수극대를 보인다.

2) 이 약의 표시량에 따라 반코마이신염산염으로서 20 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물 10 mL에 녹인 다음 질산은시액 한 방울을 넣을 때 액은 흰색으로 뿌옇게 된다.

pH  이 약의 표시량에 따라 반코마이신염산염으로서 0.5 g (역가)에 해당하는 양을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 2.5 ∼ 4.5이다.

순도시험  1) 중금속 이 약 0.66 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 3.0 mL를 넣는다 (30 ppm 이하).

2)용해상태  이 약의 표시량에 따라 반코마이신염산염으로서 0.5 g (역가)에 해당하는 양을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색 ∼ 엷은 황색이고 맑다. 또한 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 측정할 때 파장 465 nm에서 흡광도는 0.05 이하이다.

3) 유연물질  이 약의 표시량에 따라 반코마이신염산염으로서 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 이동상 A 10 mL에 녹이고 검액으로 한다. ｢반코마이신염산염｣의 순도시험 2)에 따라 시험한다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 이 약은 반코마이신 1 mg (역가) 당 0.25 EU 이하이다.

불용성이물시험  시험할 때 적합하다.

주사제의 불용성미립자시험  시험할 때 적합하다.

제제균일성시험  시험할 때 적합하다.

수    분  5.0 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정). 칼피셔법의 수분측정용 포름아미드와 칼피셔법의 수분측정용 메탄올 (3:1)혼합액을 사용한다.

정 량 법  원통평판법  ｢반코마이신염산염｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 10 개 이상을 취하여 내용물의 질량을 정밀히 단다. 표시역가에 따라 ｢반코마이신염산염｣ 약 25 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 물에 녹여 정확하게 25 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)을 넣어 mL 당 100 μg (역가) 및 25 μg (역가)를 함유하는 액을 만들어 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다.

저 장 법	밀봉용기

반코마이신염산염 캡슐

Vancomycin Hydrochloride Capsules

확인시험  이 약 내용물을 가지고 반코마이신염산염 10 mg 해당량을 달아 물을 넣어 녹여 100 mL로 한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 279 ～ 284 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

정 량 법  원통평판법  「반코마이신염산염」의 정량법에 따라 시험한다. 다만 이 약 20 캡슐 이상을 가지고 내용물의 질량을 정밀히 단다. 표시역가에 따라 「반코마이신염산염」약 25 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 물에 녹여 정확하게 25 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)을 넣어 mL당 100 μg (역가) 및 25 μg (역가)를 함유하는 액을 만들어 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다.

벤자틴페니실린 G 수화물

Benzathine Penicillin G Hydrate

벤자친페니실린 G                     (C16H18N2O4S)2․C16H20N2․4H2O : 981.18

이 약은 Penicillium 속을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 페니실린계 화합물의 N,N'-디벤질에틸렌디아민의 염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 페니실린 G 나트륨 (C16H17N2NaO4S : 356.37) 1213 ∼ 1333 단위 (역가)를 함유한다. 1단위는 페니실린 G 나트륨 0.6 μg에 해당한다. 이 약은 정량할 때 환산한 무수물에 대하여 N,N'-디벤질에틸렌디아민(C16H20N2 : 240.34) 24.0 ～ 27.0 %를 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정성 가루이다.

이 약은 메탄올 또는 무수에탄올에 녹기 어렵고, 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 벤자틴페니실린 G 표준품의 메탄올용액(1 → 2000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 벤자틴페니실린 G 표준품 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

벤자틴페니실린 G  이 약 약 50 mg을 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 녹이고 정확하게 100 mL로 한다. 이 액을 가지고 메탄올을 대조액으로 하여 파장 263 nm에서 흡광도를 측정하여 [eqn: E_{1 cm}^{1 %}]을 구한다.

벤자틴페니실린 G 함량 (%)

비선광도   : +217 ～ +233°(환산한 무수물로 0.1 g, 메탄올, 20 mL, 100 mm)

pH  이 약의 포화수용액의 pH는 5.0 ～ 7.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL을 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 70 mg을 메탄올 25 mL에 녹이고 무수인산수소이나트륨 1.02 g 및 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹여 1000 mL로 한 액을 넣어 50 mL로 하여 검액으로 한다. 검액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상 A를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 정확하게 취하여 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각각의 액의 개개 피크면적을 측정할 때 검액의 페니실린 G에 대한 상대유지시간 약 2.4인 피크의 면적은 표준액의 페니실린 G 및 N,N'-디벤질에틸렌디아민의 피크의 합계면적의 2배보다 크지 않다. 또한 검액의 페니실린 G, N,N'-디벤질에틸렌디아민 및 벤질페니실린에 대한 상대 유지시간 약 2.4의 피크 이외의 개개 피크면적은 표준액의 페니실린 G 및 N,N'-디벤질에틸렌디아민의 피크의 합계면적보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 220 nm)

칼럼 : 안지름 4.0 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B의 혼합비를 아래와 같이 변화시켜 농도구배를 제어한다.

이동상 A - 물․메탄올․0.25 mol/L 인산이수소칼륨시액(pH 3.5) 혼합액(6 : 3 : 1)

이동상 B - 메탄올․물․0.25 mol/L 인산이수소칼륨시액(pH 3.5) 혼합액(6 : 3 : 1)

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)
0 ～ 10 10 ～ 20 20 ～ 55	75 75 → 0 0	25 25 → 100 100

유량 : 1.0 mL/분

측정범위 : 용매 피크 이후부터 페니실린 G의 유지시간의 약 3 배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상 A를 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 20 μL로부터 얻은 페니실린 G의 피크면적이 표준액의 페니실린 G의 피크면적의 3.5 ～ 6.5 %가 되는 것을 확인 한다.

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 N,N'-디벤질에틸렌디아민, 페니실린 G의 순서로 유출하고 분리도는 25 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 3회 반복할 때 페니실린 G 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 이 약은 페니실린 G 100 단위(역가) 당 0.01 EU 이하이다.

수    분  5.0 ～ 8.0 %  (1 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  1) 페니실린 G  이 약 약 85000 단위에 해당하는 양을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL에 녹인 다음 무수인산수소이나트륨 1.02 g과 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 무수인산수소이나트륨 1.02 g 및 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액 · 메탄올혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 페니실린 G 칼륨표준품 약 85000 단위에 해당하는 양 및 N,N'-디벤질에티렌디아민디아세트산 약 25 mg을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL에 녹이고 무수인산수소이나트륨 1.02 g 및 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 무수인산수소이나트륨 1.02 g 및 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액 50 mL에 메탄올 50 mL을 넣은 액을 넣어 정확히 20 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 페니실린 G 피크면적 AT 및 AS를 구한다.

페니실린 G 나트륨의 양 (단위)

= 페니실린 G 칼륨표준품의 역가(단위)[eqn: ~times~{{A_T}}over{A_S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 : 220 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 물․메탄올․0.25 mol/L 인산이수소칼륨시액(pH 3.5) (11 :17 : 2)

유량 : 페니실린 G의 유지시간이 약 18 분이 되게 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 N,N'-디벤질에틸렌디아민, 페니실린 G 순으로 유출하고 분리도는 20 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6회 반복할 때 N,N'-디벤질에틸렌디아민 및 페니실린 G의 피크면적의 상대표준편차는 각각 2.0 % 이하이다.

2) N,N'-디벤질에틸렌디아민  1)에 얻은 검액 및 표준액의 크로마토그램에서 N,N'-디벤질에틸렌디아민에 해당하는 피크면적 AT 및 AS를 구한다.

N,N-디벤질에틸렌디아민(C16H20N2)의 양 (%)

0.667 : N,N'-디벤질에틸렌디아민디아세트산(C16H20N2․2CH3COOH)로부터 N,N'-디벤질에틸렌디아민(벤자틴, C16H20N2)로의 환산계수

저 장 법  차광한 기밀용기

블레오마이신황산염

Bleomycin Sulfate

블레오마이신산 : R = OH

블레오마이신 A1 : R = NHCH2CH2CH2SOCH3

블레오마이신디메틸 A2 R = NHCH2CH2CH2SCH3

CH3

블레오마이신 A2 R = NHCH2CH2CH2S+〈       ․X-

CH3

블레오마이신 A2'-a : R = NHCH2CH2CH2CH2NH2

블레오마이신 A2'-b : R = NHCH2CH2CH2NH2

블레오마이신 A5 : R = NH(CH2)3NH(CH2)4NH2

블레오마이신 B1 : R = NH2

블레오마이신 B2 : R = NH(CH2)4NHC(NH)NH2

블레오마이신 B4: R=

NH(CH2)4NHC(NH)NH(CH2)4NHC(NH)NH2

황산블레오마이신

이 약은 Streptomyces verticillus을 양하여 얻은 항종양활성을 가지는 화합물의 혼합물의 황산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 블레오마이신 A2 (C55H84ClN17O21S3 : 1451.01) 1400 ∼ 2000 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 에탄올에는 녹기 어렵다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  1)  이 약 및 블레오마이신황산염표준품 4 mg을 달아 황산구리시액 5 μL 및 물을 넣어 녹여 100 mL 로 한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 블레오마이신황산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 수용액(1 → 200)은 황산염의 정성반응(1) 및 (2)를 나타낸다.

pH  이 약 10 mg을 물 20 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 6.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 80 mg을 물 4 mL에 녹일 때 액은 무색이며 맑다.

2) 구리  이 약 75 mg을 정밀히 달아 희석시킨 질산 (1 → 100) 10 mL을 넣어 녹이고 검액으로 한다. 따로 구리표준액 15 mL을 정확하게 취하여 희석시킨 질산(1 → 100)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 다음의 조건으로 원자흡광광도법에 따라 시험할 때 검액의 흡광도는 표준액의 흡광도보다 크지 않다 (200 ppm 이하).

사용기체

가연성기체 : 아세틸렌

지연성기체 : 공기

램프 : 구리중공음극램프

파장 : 324.8 nm

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 블레오마이신 1 mg (역가)당 10 EU 미만이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 300 μg (역가)을 함유하는 수용액을 만들어 검액으로 한다.

건조감량  3.0 % 이하 (60 mg, 감압, 오산화인, 60 ℃, 3 시간).

블레오마이신 성분함량비  이 약 약 10 mg (역가)을 정밀히 달아 물 20 mL에 녹여 검액으로 한다. 검액 20 μL를 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각각의 피크면적을 구한다. 면적백분율에 따라 그들의 양을 구할 때 블레오마이신 A2 (최초의 주피크성분)는 55 ∼ 70 %, 블레오마이신 B2 (두번째 주피크성분)는 25 ∼ 32 %, 블레오마이신 A2와 B2의 합은 85 % 이상, 디메틸블레오마이신 A2 (블레오마이신 A2에 대한 상대유지시간 1.5 ∼ 2.5)는 5.5 % 이하, 기타 다른 피크의 양의 합계는 9.5 % 이하이다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 7 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.

이동상 A - 이동상원액․메탄올혼합액(9 : 1)

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)
0 ～ 60 65 ～ 75	100 → 0 0	0 → 100 100

이동상 B - 이동상원액․메탄올혼합액(3 : 2)

유  량 : 약 1.2 mL/분

측정범위 : 용해 피크 이후부터 디메틸블레오마이신 A2 유출 후 20 분의 범위

시스템적합성

시스템의 성능 : 검액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 블레오마이신 A2, 블레오마이신 B2의 순으로 유출하고 그 분리도는 5 이상이다.

시스템의 재현성 : 검액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 블레오마이신 A2 면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦ 이동상원액  1-펜탄설폰산나트륨 0.96 g 및 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨이수화물 1.86 g을 물 1000 mL 및 아세트산무수물 5 mL에 녹이고 암모니아시액을 넣어 pH 4.3으로 조정한다.

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  (가) 종층용, 기층용 및 시험균이식용 한천배지

펩톤        10.0 g       글리세린      10.0 g

육엑스      10.0 g       한천          15.0  g

염화나트륨   3.0 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 염화나트륨시액으로 멸균 후의 pH가 6.9 ∼ 7.1이 되도록 조정한다.

(나) 시험균부유용액체배지

펩톤       10.0 g      염화나트륨       3.0 g

육엑스     10.0 g      글리세린        10.0 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 염화나트륨시액으로 멸균 후의 pH가 6.9 ∼ 7.1이 되도록 조정한다.

(2) 시험용균  Mycobacterium smegmatis ATCC 607을 시험용균으로 한다.

(3) 시험용균액  위의 시험용균을 (가)의 배지에 이식하여 27 ℃에서 40 ∼ 48 시간 배양한 다음 이 배지에서 성장한 균을 (나)의 배지 100 mL에 이식하고 25 ∼ 27 ℃에서 5 일간 진탕배양하여 시험균액으로 한다. 시험균액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 14 일 이내에 쓴다. 시험균액 0.5 mL를 미리 녹여 48 ℃로 식힌 (가)의 배지 100 mL에 충분히 섞어 종층한천배지로 한다.

(4) 한천평판  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(5)에 따른다. 다만, 기층용한천배지의 양은 5.0 mL, 종층한천배지의 양은 8.0 mL로 한다.

(5) 이 약 약 5 mg (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 6.8)으로 mL 당 30.0 및 15.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 블레오마이신염산염A2표준품 적당량을 취하여 건조시킨 다음 약 5 mg (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 6.8)으로 녹여 mL 당 150 μg (역가)을 함유하는 표준원액을 만든다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 30 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 6.8)으로 mL 당 30.0 및 15.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

설박탐나트륨

Sulbactam Sodium

C8H10NNaO5S : 255.22

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 설박탐 (C8H11NO5S : 233.24) 875 ∼ 941 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 메탄올에 조금 녹으며 무수에탄올에 매우 녹기 어렵고 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 설박탐나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +219 ∼ +233° (1.0 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 20 mL에 녹인 액의 pH는 5.2 ∼ 7.2이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 20 mL에 녹일 때 액은 무색 ∼ 엷은 황색이고, 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3법에 따라 조작하여 시험한다 (2ppm 이하).

4) 설박탐페니실라민  이 약 약 0.2 g을 정밀히 달아 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 설박탐페니실라민용 설박탐나트륨 약 40 mg을 정밀히 달아 물 2 mL에 녹이고 수산화나트륨시액 0.5 mL를 넣어 실온에서 10분간 방치한 다음 1 mol/L 염산시액 0.5 mL를 넣고 다시 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 한다 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 정확하게 취하여 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각각의 액의 설박탐페니실라민의 피크면적 AT 및 AS를 측정할 때 설박탐페니실라민의 양은 1.0 % 이하이다.

설박탐페니실라민의 양(%)

WS : 설박탐페니실라민용 설박탐나트륨의 채취량(mg)

WT : 이 약의 채취량(mg)

조작조건

칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 230 nm)

시스템적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 설박탐페니실라민의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 설박탐 1 mg (역가) 당 0.17 EU 미만이다.

수    분  1.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 설박탐표준품 약 0.1 g (역가)씩을 정밀히 달아 이동상 용액을 넣어 녹인 다음 내부표준액 10.0 mL씩을 넣고 이동상으로 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 설박탐의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

설박탐(C8H11NO5S)의 역가 (μg)

= 설박탐표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  파라옥시벤조산에틸의 이동상용액(7 → 1000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 220 nm)

칼  럼 : 안지름 약 3.9 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 35 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세토니트릴 250 mL에 0.005 mol/L 테트라부틸암모늄히드록시드액을 넣어 정확하게 1000 mL로 한다.

유  량 : 설박탐의 유지시간이 약 6 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 설박탐, 내부표준물질의 순으로 유출하고 분리도는 1.5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 설박탐피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

◦ 0.005 mol/L 테트라부틸암모늄히드록시드액  테트라부틸암모늄히드록시드시액 10 mL에 물 700 mL을 넣고 희석시킨 인산(1 → 10)으로 pH를 4.0로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

저 장 법  기밀용기

주사용 설박탐나트륨･암피실린나트륨

Sulbactam Sodium･Ampicillin Sodium for Injection

정 량 법  이 약 표시량에 따라 물을 넣어 녹이고 이 액 적당량을 정확하게 취하여 이동상으로 희석하여 1 mL 당 설박탐 0.3 mg (역가) 및 암피실린 0.6 mg (역가)를 함유하도록 하여 검액으로 한다. 따로 암피실린표준품 및 설박탐표준품 적당량을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 1 mL 당 설박탐 0.3 mg (역가) 및 암피실린 0.6 mg (역가)를 함유하도록 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건에 따라 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 설박탐 및 암피실린의 피크면적 AT₁ 및 AS₁, AT₂ 및 AS₂를 구한다.

설박탐 (C8H11NO5S)의 역가(μg)

=표준액 중 설박탐의 농도 [역가(μg)/mL][eqn: ` TIMES ` {A _{rm T _{1} it}} over {A _{rm S _{1} it}} TIMES 검액`희석배수]

암피실린 (C16H19N3O4)의 역가(μg)

=표준액 중 암피실린의 농도 [역가(μg)/mL〕[eqn: ` TIMES ` {A _{rm T _{2} it}} over {A _{rm S _{2} it}} TIMES 검액`희석배수]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스강관에 1.5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.005 mol/L 테트라부틸암모늄히드록시드액․아세토니트릴혼합액(1650 : 350)

유  량 : 2.0 mL/분

◦ 0.005 mol/L 테트라부틸암모늄히드록시드액  40 % 테트라부틸암모늄히드록시드 용액 6.6 mL에 물을 넣어 1800 mL로 하고 1 mol/L 인산으로 pH 5.0 ± 1이 되도록 조정한 후 물을 넣어 2 L로 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 10 μL을 가지고 위의 조건으로 시험할 때 설박탐 알칼리 분해물에 대한 암피실린의 상대유지시간은 약 0.7이고 분리도는 4.0 이상이다. 또한 표준액 10 μL을 가지고 위의 조건으로 시험할 때 설박탐에 대한 암피실린의 상대유지시간은 약 0.35이다. 설박탐의 이론단수는 3500 이상이며, 대칭계수는 1.5 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 설박탐 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦ 시스템적합성용액  설박탐표준품 약 30 mg을 달아 0.01 mol/L 수산화나트륨용액에 녹여 100 mL로 하고 30 분간 방치한 후 1 mol/L 인산으로 pH 5.0 ± 1이 되도록 조정한다. 이 액 5 mL를 취하여 4.25 mL 아세토니트릴을 넣고 0.005 mol/L 테트라부틸암모늄히드록시드액으로 희석하여 25 mL로 한다. 이 액 1 mL에 암피실린표준품 15 mg을 넣고 이동상으로 희석하여 25 mL로 한다.

세파드록실수화물

Cefadroxil Hydrate

C16H17N3O5S․H2O : 381.40

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세파드록실 (C16H17N3O5S : 363.39) 950 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 조금 녹고 메탄올에 녹기 어렵고 무수에탄올에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 세파드록실표준품의 수용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세파드록실표준품 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수․핵자기공명스펙트럼측정용염산혼합액(3 : 1)용액(1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로피온산나트륨-d4를 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 2.1 ppm 부근에서 단일선의 시그날 A를, δ 7.0 ppm 부근에서 이중선의 시그날 B를, δ 7.5 ppm 부근에 이중선의 시그날 C를 보이며, 각 시그날의 면적강도비 A : B : C는 3 : 2 : 2 이다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

순도시험 1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 유연물질  이 약 0.1 g을 무수에탄올․물․희석시킨 염산(1 → 5)혼합액(75 : 22 : 3) 4 mL에 녹이고 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 무수에탄올․물․희석시킨 염산(1 → 5)혼합액(75 : 22 : 3)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 2 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔(형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 아세트산에틸․물․무수에탄올․포름산혼합액(14 : 5 : 5 : 1)을 전개용매로 하여 약 12 cm 전개한 다음, 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린․시트르산․아세트산시액을 고르게 뿌린 다음 100 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주 반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

3) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{25}] : +164 ∼ +182° (환산한 무수물로서 0.6 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 200 mL에 녹인 액의 pH는 4.0 ∼ 6.0 이다.

수    분  4.2 ∼ 6.0 % (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 세파드록실표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀히 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 500 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세파드록실 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

세파드록실(C16H17N3O5S)의 역가 (μg)

= 세파드록실표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 : 262 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 250 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소칼륨용액(17 → 12500)․메탄올혼합액(17 : 3)

유량 : 세파드록실의 유지시간이 약 5 분이 되게 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 세파드록실 약 5 mg (역가) 및 세파트리진프로필렌글리콜 약 10 mg (역가)를 물 50 mL에 녹인다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 세파드록실, 세파트리진 순으로 유출하고 그 분리도는 4 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세파드록실 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

세파드록실 정

Cefadroxil Tablets

정 량 법  이 약 20 정의 질량을 정밀히 달아 가루로 하고 표시역가에 따라 약 0.2 g (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 pH 5.0 인산염완충액을 넣어 녹여 정확하게 200 mL로 하여 검액으로 한다. 따로, 세파드록실표준품 약 0.2 g (역가)을 정밀히 달아 pH 5.0 인산염완충액을 넣어 녹여 정확하게 200 mL로 하여  표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 세파드록실의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

세파드록실 (C16H17N3O5S)의 역가 (μg)

= 세파드록실표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼  럼 : 안지름 4.0 ～  4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 1.5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한실리카겔을 충전한다.

이동상 : pH 5.0 인산염완충액 ․ 아세토니트릴혼합액 (96 : 4)

유  량 : 1.5 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 이론단수는 1800 이상이고 질량분포비는 2.0 ～ 3.5이며 대칭계수는 2.5이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 세파드록실의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦ 인산염완충액 pH 5.0  인산이수소칼륨 13.6 g을 달아 물에 녹여 2 L로 한 다음 10 mol/L 수산화칼륨으로 pH를 5.0으로 조정한 액

세파만돌나페이트

Cefamandole Nafate

C19H17N6NaO6S2 : 512.50

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세파만돌 (C18H18N6O5S2 : 462.51) 810 ∼ 1000 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루이다.

이 약은 물 또는 메탄올에 녹고 에틸아세테이트, 클로로포름, 에테르 또는 벤젠에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  이 약 및 세파만돌나페이트표준품 10 mg 씩을 달아 전개용매에 녹여 1 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액은 조제 후 곧 사용한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 아세트산에틸․아세톤․아세트산무수물․물혼합액(5 : 2 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 박층판의 3/4 까지 전개한 다음 박층판을 바람에 말리고 자외선(주파장 254 nm) 쪼일 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

pH  이 약 1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 7.0이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세파만돌로서 1 mg (역가) 당 0.15 EU 이하이다.

순도시험  중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

수    분  2.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  표준곡선법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지  역가시험 가)(2)(가)③㉮ 및 ㉯의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균  Staphylococcus aureus ATCC 6538P를 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 적당량을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 녹여 mL 당 약 1 mg (역가)을 함유하는 용액을 만든 다음 37 ℃ 수욕에서 60 분간 가수분해시킨다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 2.00 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 검액으로 한다. 따로 세파만돌표준품 적당량을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 녹여 mL 당 1 mg (역가)의 표준원액을 만든 다음 37 ℃ 수욕에서 60 분간 방치한다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 1 일 이내에 쓴다. 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 1.28, 1.60, 2.00, 2.50 및 3.12 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 표준액으로 하며 mL 당 2.00 μg (역가)을 함유하는 용액을 표준중간희석액으로 한다. 검액, 표준액 및 표준중간희석액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 나)(4)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

세파졸린나트륨

Cefazolin Sodium

C14H13N8NaO4S3 : 476.49

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세파졸린 (C14H14N8O4S3 : 454.51) 900 ∼ 975 μg (역가)를 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물 또는 포름아미드에 잘 녹고 메탄올에 녹기 어려우며 에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 세파졸린나트륨표준품의 수용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세파졸린나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로피온산나트륨-d4를 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 2.7 ppm 부근 및 δ 9.3 ppm 부근에 각각 단일선시그날 A 및 B를 보이고 각 시그날의 면적강도비 A : B 는 3 : 1이다.

4)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -19 ∼ -23° (환산한 무수물로서 2.5 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.8 ∼ 6.5이다

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색 ∼ 엷은 황색이고 맑다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 측정할 때 파장 400 nm에서 흡광도로 0.35 이하이다. 측정은 용액을 만든 후 10분 이내에 실시한다.

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

3) 비소  이 약 2.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다. 검액을 만들 때 질산마그네슘의 에탄올용액 (1 → 50) 10 mL를 넣은 다음 강과산화수소수 1.5 mL를 넣고 강열한다 (1 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 0.10 g을 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0) 20 mL에 녹이고 검액으로 한다. 검액은 시험할 때 만든다. 검액 5 μL를 가지고 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 세파졸린에 대한 유지시간 0.2인 피크 및 세파졸린 이외의 피크면적은 각각 1.5 % 이하이며, 세파졸린 이외의 피크면적의 합은 2.5 % 이하이다. 단, 세파졸린에 대한 유지시간 약 0.2피크면적은 자동적분법으로 측정한 면적에 감도계수 1.43를 곱한 값으로 한다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 용매 피크 이후부터 세파졸린의 유지시간의 약 3배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 세파졸린표준품 약 80 mg을 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)에 녹이고 100 mL로 하여 시스템적합성용검액으로 한다. 시스템적합성용검액 1 mL을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH7.0)을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 5 μL로부터 얻은 세파졸린의 피크면적이 시스템적합성용검액에서 얻은 피크면적의 3 ∼ 7 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용검액 5 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세파졸린피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

5) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀히 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀히 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (272 nm) : 264 ∼ 292 (1.6 mg, 물, 100 mL).

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세파졸린으로서 1 mg (역가) 당 0.10 EU 이하이다.

수    분  2.5 % 이하 (1 g, 용량적정법, 직접적정), 수분측정용메탄올 대신에 수분측정용포름아미드․수분측정용메탄올혼합액(2 : 1)을 사용한다.

정 량 법  이 약 및 세파졸린표준품 약 0.1 g (역가)씩을 정밀하게 달아 각각 내부표준액을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 5 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 세파졸린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세파졸린(C14H14N8O4S3)의 역가 (μg)

= 세파졸린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  p-아세트아니시디드의 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)용액(11 → 20000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 인산수소이나트륨십이수화물 2.27 g 및 시트르산일수화물 0.47 g을 달아 물을 넣어 녹여 935 mL로 하고 아세토니트릴 65 mL를 넣는다.

유  량 : 세파졸린의 유지시간이 약 8 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세파졸린, p-아세트아니시디드의 순으로 유출하고 분리도는 4.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 세파졸린피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법	기밀용기

세파클러수화물

Cefaclor Hydrate

C15H14ClN3O4S·H2O : 385.82

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세파클러 (C15H14ClN3O4S : 367.81) 950 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 결정성 가루이며 냄새는 없든가 또는 약간 특이한 냄새가 있으며 맛은 약간 쓰다.

이 약은 물에 녹고 메탄올에 조금 녹으며 에탄올에 매우 녹기 어렵고 에테르에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 세파클러표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 페이스트법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  정량법의 검액 및 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간은 같다.

순도시험    1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 3.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 디메틸포름아미드 10 mL에 현탁하여 검액을 만들어 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 약 50 mg을 정밀하게 달아 인산이수소나트륨액(pH 2.5)을 넣어 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 세파클러표준품 적당량을 정밀하게 달아 인산이수소나트륨액(pH 2.5)을 넣어 녹여 약 0.05 mg/mL의 일정한 농도로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 각 유연물질의 양을 구할 때 개개 유연물질은 0.5 % 이하이며, 총 유연물질의 양은 2.0 % 이하이다. 필요하면 인산이수소나트륨액(pH 2.5) 20 μL를 가지고 같은 조작을 하여 보정한다.

각 유연물질의 양 (%) [eqn: = {C} over {W _{}} ` TIMES `` {A _{i}} over {A _{S}}]

C : 표준액의 세파클러농도 [μg (역가)/mL]

W : 이 약의 채취량 [mg (역가)]

Ai : 검액에서 얻은 개개 유연물질의 피크면적

AS : 표준액에서 얻은 세파클러 피크면적

◦ 인산이수소나트륨액(pH 2.5)  인산이수소나트륨 2.4 g을 물 1000 mL에 녹이고 인산으로 pH를 2.5로 조정한다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 220 nm)

칼럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.

이동상 A - 인산이수소나트륨 6.9 g을 물 1000 mL에 녹이고 인산으로 pH를 4.0으로 조정한다.

이동상 B - 이동상 A․아세토니트닐혼합액(550 : 450)

시간(분)	이동상 A (vol %)	이동상 B (vol %)
0 0 ∼ 30 30 ∼ 45 45 ∼ 55 55 ∼ 60 60 ∼ 70	95 95 → 75 75 → 0 0 0 → 95 95	5 5 → 25 25 → 100 100 100 → 5 5

유  량 : 1.0 mL/분.

시스템적합성

세파클러표준품 및 세파클러, 델타-3 이성체표준품 적당량을 표준품에 녹여 1 mL 중 약 0.05 mg을 함유하도록 하여 시스템적합성용액으로 한다. 시스템적합성용액을 가지고 위의 조건으로 시험할 때 세파클러 피크는 23 ∼ 29 분에 유출되고 세파클러, 델타-3 이성체와 세파클러의 분리도는 2.0 이상이며, 세파클러피크에 대한 대칭계수는 1.2 이하이다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +105 ∼ +120° (환산한 무수물로서 0.1 g, 물, 25 mL, 100 mm)

결 정 성  시험할 때 적합하다.

pH  이 약 0.25 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.0 ∼ 4.5 이다.

수    분  3.0 ∼ 6.5 % (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 세파클러표준품 약 15 mg (역가) 씩을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건에 따라 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세파클러의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

세파클러(C15H14ClN3O4S)의 역가 (μg)

= 세파클러표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 265 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 1-펜탄설폰산나트륨 1.0 g을 달아 물 780 mL에 녹이고 트리에틸아민 10 mL를 넣어 잘 섞은 다음 인산으로 pH를 2.5 ± 1로 조정하고 메탄올 220 mL를 넣는다.

유  량 : 1.5 mL/분

시스템적합성

시스템성능 : 시스템적합성용액을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 세파클러의 상대유지시간은 약 0.8, 세파클러, 델타-3 이성체의 상대유지시간은 약 1.0 이며 세파클러와 세파클러, 델타-3 이성체의 분리도는 2.5 이상, 대칭계수은 1.5 이하이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 세파클러피크의 상대표준편차는 2 % 이하이다.

◦ 시스템적합성용액 이 약 및 세파클러표준품 및 세파클러, 델타-3 이성체표준품을 적당량을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 1 mL 당 0.3 mg이 되도록 한다.

저 장 법  기밀용기

세파클러 캡슐

Cefaclor Capsules

이 약은 정량할 때 표시량의 90.0 ∼ 120.0 %에 해당하는 세파클러 (C15H14ClN3O4S : 367.81)를 함유한다.

제    법  이 약은 ｢세파클러수화물｣을 가지고 캡슐제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  이 약 1 캡슐의 내용물을 물과 섞어 1 mL 당 세파클러 약 2 mg의 농도로 하여 여과하고 여액을 가지고 세파클러 확인시험 2)에 따라 시험한다.

순도시험  유연물질  이 약 20 캡슐 이상을 취하여 그 내용물의 질량을 정밀하게 달아 표시역가에 따라 세파클러 약 50 mg(역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 인산이수소나트륨액(pH 2.5)에 녹이고 필요하면 초음파처리하고, 인산이수소나트륨액(pH 2.5)로 희석하여 정확하게 10 mL로 하고 여액을 검액으로 한다. 따로 세파클러수화물 순도시험 유연물질의 표준액 조제법에 따라 조제하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 세파클러수화물 순도시험 유연물질 시험법에 따라 조작하여 각 유연물질의 양(%)를 계산한다 (개개유연물질함량 : 0.5 % 이하, 총 유연물질의 양 : 2.0 % 이하).

용출시험  이 약 1 캡슐을 취하여 시험액으로 물 900 mL를 써서 제 2 법에 따라 매분 50 회전으로 시험한다. 용출시험 시작 30 분 후에 시험액을 여과한다. 처음 여액 10 mL는 버리고 다음 여액을 검액으로 한다. 따로 세파클러표준품 약 28 mg (역가)을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고「세파클러수화물」의 정량법에 따라 시험하여 각 액의 세파클러의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다. 이 약의 30 분간의 용출률이 80 % (Q) 이상일 때 적합하다.

세파클러 (C15H14ClN3O4S)의 표시량에 대한 용출률(%)

= 세파클러표준품의 역가 (mg)

C : 1 캡슐 중 세파클러(C15H14ClN3O4S)의 표시량 [mg (역가)]

제제균일성시험  질량편차시험을 할 때 적합하다.

수    분  8.0 % 이하 (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 20 캡슐 이상을 취하여 그 내용물의 질량을 정밀하게 달아 표시역가에 따라 세파클러 약 15 mg (역가)을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 정확하게 50 mL로 하고 잘 흔들어 섞은 다음 여과하여 여액을 검액으로 하고 이하 ｢세파클러수화물｣의 정량법에 따라 시험한다.

세파클러(C15H14ClN3O4S)의 역가 (μg)

= 세파클러표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

저 장 법  기밀용기

세파트리진프로필렌글리콜

Cefatrizine Propylene Glycol

C18H18N6O5S2․(C3H8O2)n

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세파트리진 (C18H18N6O5S2 : 462.50) 816 ∼ 876 μg (역가)를 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색을 띤 가루이다.

이 약은 물에 조금 녹고 메탄올 또는 에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 세파트리진프로필렌글리콜표준품의 수용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세파트리진프로필렌글리콜표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수․핵자기공명스펙트럼측정용중염산혼합액(3 : 1) 용액 (1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로피온산나트륨-d4를 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 1.2 ppm 부근에 이중선의 시그날 A, δ 7.0 ppm 부근에 이중선의 시그날 B, δ 7.5 ppm 부근에 이중선의 시그날 C, δ 8.3 ppm 부근에 단일선의 시그날 D를 보이며, 각 시그날의 면적강도비 A : B : C : D는 3 : 2 : 2 : 1이다.

비선광도   : + 52 ∼ +58° (환산한 무수물로서 2.5 g, 1 mol/L 염산시액, 50 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 6.0 이다.

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (270 nm) : 190 ∼ 220 (40 mg, 물, 2000 mL)

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하). 질산마그네슘육수화물의 에탄올용액(1 → 25)를 쓴다.

3) 유연물질  이 약 25 mg을 물 5 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL을 취하여 물을 넣어 정확하게 20 mL가 되게하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL 씩을 박층크로마토그래프용 실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 1-부탄올․물․아세트산무수물혼합액(3 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 12 cm 전개시킨 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린․시트르산․아세트산시액을 고르게 뿌린 다음 100 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주 반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

수    분  2.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.1% (1g, 백금도가니)

정 량 법  약 및 세파트리진프로필렌글리콜표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀히 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 25 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건에 따라 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세파트리진의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

세파트리진 (C18H18N6O5S2)의 역가 (μg)

= 세파트리진프로필렌글리콜표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 270 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 인산이수소칼륨 2.04 g을 물에 녹여 1500 mL로 한 액에 메탄올 500   mL를 섞은 액

유  량 : 세파트리진의 유지시간이 약 6 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 세파드록실 약 5 mg (역가) 및 세파트리진프로필렌글리콜 약 10 mg (역가)을 정밀히 달아 물 50 mL에 녹이고 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 세파드록실, 세파트리진 순서로 유출되고 분리도는 4 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조작조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세파트리진의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

세파피린나트륨

Cefapirin Sodium

C17H16N3NaO6S2 : 445.45

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세파피린 (C17H17N3O6S2 : 423.46) 865 μg (역가)이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 메탄올에 조금 녹으며, 에탄올에 녹기 어려우며, 아세톤에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 세파피린나트륨표준품의 수용액(3 → 200000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세파피린나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로피온산나트륨-d4를 내부표준물질로하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 2.2 ppm 부근에 단일선의 시그날 A, δ 7.3 ppm 부근 및 δ 8.3 ppm 부근에 다중선의 시그날 B 및 C가 나타난다. 각 시그날 면적비 A : B : C는 3 : 2 : 2 이다.

4) 이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도   : +157 ∼ +175° (환산한 무수물로서 2 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 6.5 ∼ 8.5 이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다. 질산마그네슘의 에탄올용액 (1 → 25)를 쓴다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 0.1 g을 아세톤․물혼합액(3 : 1) 5 mL에 녹이고 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 아세톤․물혼합액(3 : 1)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL 씩을 박층크로마토그래프용 실리카겔(형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 아세트산에틸․아세톤․물․아세트산무수물혼합액(5 : 2 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개시킨 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 자외선(주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 주반점 및 원점의 반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세파피린으로서 1 mg(역가) 당 0.17 EU 미만이다.

수    분  2.0 % 이하 (0.7 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 세파피린나트륨표준품 약 0.1 g (역가)씩을 정밀히 달아  1 % 인산염완충액(pH 6.0)을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 한 다음 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL를 정확하게 넣어 1 % 인산염완충액(pH 6.0)으로 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 세파피린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세파피린(C17H17N3O6S2)의 역가 (μg)

= 세파피린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  바닐린의 수용액(1 → 1000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 0.05 mol/L 인산이수소나트륨시액(pH 2.6)․아세토니트릴혼합액(93 : 7)

유  량 : 세파피린의 유지시간이 약 7 분이 되도록 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세파피린, 내부표준물질의 순으로 유출하고 분리도는 10 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의피크면적에 대한 세파피린피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  밀봉용기

세팔렉신수화물

Cefalexin Hydrate

C16H17N3O4S․H2O : 365.40

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세팔렉신 (C16H17N3O4S : 347.39) 950 ∼ 1030 μg을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물에 조금 녹고 메탄올에 녹기 어려우며 에탄올 또는 디메틸포름아미드에는 거의 녹지 않는다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  1)  이 약 및 세팔렉신표준품의 수용액(3 → 100000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세팔렉신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 200)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨을 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 1.8 ppm 부근에 단일선시그날 A, δ 7.5 ppm 부근에 단일선 또는 끝이 다중선의 시그날 B가 보이고 각 시그날의 면적강도비 A : B 는 3 : 5이다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +144 ∼ +158° (환산한 무수물로서 0.125 g, 물 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.5 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.0 ∼ 5.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다.(10 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 디메틸포름아미드 10 mL에 현탁하여 검액을 만들어 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀히 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀히 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

4) 유연물질  이 약 약 25 mg을 인산이수소칼륨용액(9 → 500)에 녹여 5 mL로 하여 검액으로 한다. 검액 1 mL를 정확하게 취하여 인산이수소칼륨용액(9 → 500)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 정확하게 취하여 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 필요하면 인산이수소칼륨용액(9 → 500)에 대한 기준선의 변동을 보정한다. 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 세팔렉신 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 세팔렉신 피크면적보다 크지 않다. 또한 표준액의 세팔렉신 피크면적의 1 / 50보다 더 큰 피크면적의 합과 검액의 세팔렉신 이외의 피크면적의 합은 표준액의 세팔렉신의 피크면적의 5배보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 254 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm의 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 변화시켜 농도구배를 제어한다.

이동상 A - 1-펜탄설폰산나트륨 1.0 g을 물 1000 mL에 녹이고 트리에틸아민 15 mL를 넣고 인산을 넣어 pH 2.5로 조정한다.

이동상 B - 1-펜탄설폰산나트륨 1.0 g을 물 300 mL에 녹이고 트리에틸아민 15 mL를 넣고 인산을 넣어 pH 2.5로 조정한다. 이 액에 아세토니트릴 350 mL 및 메탄올 350 mL를 넣는다.

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)
0 ～ 1 1 ～ 34.5 34.5 ～ 35.5	100 100 → 0 0	0 0 → 100 100

유량 : 1.0 mL/분

측정범위 : 용매 피크 이후부터 세팔렉신의 유지시간의 약 2배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 2 mL를 정확하게 취하여 인산이수소칼륨용액(9 → 500)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 20 μL로부터 얻은 세팔렉신 피크면적이 표준액의 세팔렉신 피크면적의 1.8 ∼ 2.2 %가 되는지를 확인한다.

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 세팔렉신피크의 이론단수는 150000 단 이상이고 대칭계수는 0.8 ∼ 1.3 이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 3 회 반복할 때 세팔렉신의 유지시간 및 피크면적의 상대표준편차는 각각 2.0 % 이하이다.

수    분  4.0 ∼ 8.0 % 이하 (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 세팔렉신표준품 약 0.1 g (역가)씩을 정밀히 달아 각각 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)을 넣어 녹이고 물로 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5.0 mL를 넣고 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 세팔렉신의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세팔렉신(C16H17N3O4S)의 역가 (μg)

= 세팔렉신표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  m-히드록시아세토페논의 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)용액(1 → 1500)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소칼륨 6.8 g을 물 1000 mL에 녹이고 희석시킨 인산(3 → 500)을 넣어 pH를 3.0 으로 조정한다. 이 액 800 mL에 메탄올 200 mL를 넣는다.

유량 : 세팔렉신의 유지시간이 약 7분이 되도록 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세팔렉신, 내부표준물질의 순으로 유출하고, 분리도는 6 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 5 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 세팔렉신피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법	기밀용기

시럽용 세팔렉신

Cefalexin for Syrup

이 약은 쓸 때 녹이거나 현탁시켜 쓰는 시럽제로 정량할 때 표시량의 90.0 ～ 110.0 %에 해당하는 세팔렉신(C16H17N3O4S : 347.39)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢세팔렉신수화물｣을 가지고 시럽제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  이 약의 표시량에 따라 세팔렉신 3 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물에 녹여 100 mL로 한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 260 ～ 264 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

pH  이 약을 표시에 따라 녹인 용액의 pH는 3.0 ～ 6.0이다.

제제균일성시험 (분포)  다음과 같은 방법으로 함량균일성시험을 할 때 적합하다. 이 약 1 포를 가지고 내용물 전체량을 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5) 3V/5 mL를 넣고 10 분간 강하게 섞어서 혼합한 다음 1 mL 중 세팔렉신 약 1 mg (역가)를 함유하는 액이 되도록 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)을 넣어 정확하게 V mL로 하고 원심분리한다. 상층액 2 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣고 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5)를 넣어 100 mL로 하여 검액으로 한다. 이하 정량법에 따라 시험한다.

세팔렉신 (C16H17N3O4	S)의 양 [mg (역가)]

= Ws[eqn: ~times~{Q_{T}}over{Q_{S}}~times~{V~}over{20~}]

WS : 세팔렉신표준품의 양 [mg (역가)]

내부표준액  m-히드록시아세토페논의 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5) 용액(1 → 15000)

수    분  2.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

용출시험  이 약의 표시량에 따라 세팔렉신 약 0.25 g (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 시험액으로 물 900 mL를 써서 제 2 법에 따라 매분 50 회전으로 시험한다. 용출시험 시작 15분 후에 용출액 20 mL 이상을 취하여 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과하고 처음 여액 10 mL는 버리고 다음 여액 2 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 세팔렉신표준품 약 22 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 물에 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험하여 파장 262 nm 부근의 흡수극대파장에서 흡광도 AT 및 AS를 측정한다. 이 약의 15분간의 용출률이 80 % 이상일 때 적합하다.

세팔렉신 (C16H17N3O4	S)의 표시량에 대한 용출률(%)

= [eqn: {W_{S}}over {W_{T}}~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~{1~}over{C~}~TIMES 1125]

WS : 세팔렉신표준품의 양 [mg (역가)]

WT : 이 약의 취한 양(g)

C : 1 g 중 세팔렉신 (C16H17N3O4S)의 표시량 [mg (역가)]

정 량 법  이 약을 필요하면 가루로 하여 세팔렉신 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5) 60 mL를 넣고 10 분간 세게 흔들어 섞은 다음 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 원심분리한다. 상층액 2 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣고 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 세팔렉신표준품 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)를 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣고 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 내부표준액에 대한 세팔렉신의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세팔렉신 (C16H17N3O4S)의 역가 (㎍)

= 세팔렉신표준품의 역가 (μg)[eqn: ~times~{Q_{T}}over{Q_{S}}~times~ 5]

내부표준액  m-히드록시아세토페논의 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5) 용액(1 → 15000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 3.0 mm, 길이 약 75 mm인 스테인레스강관에 3 μm 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 인산이수소칼륨 2.72 g을 물 1000 mL에 녹이고 희석시킨 인산(3 → 500)을 넣어 pH를 3.0으로 조정한다. 이 액 800 mL에 메탄올 200 mL를 넣는다.

유  량 : 세팔렉신의 유지시간이 약 6 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 세팔렉신,  내부표준액의 순서로 유출하고 분리도는 8 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복 할 때 내부표준액에 대한 세팔렉신 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이  다.

저 장 법  기밀용기.

세팔렉신 캡슐

Cefalexin Capsules

이 약은 정량할 때 표시량의 93.0 ～ 107.0 %에 해당하는 세팔렉신 (C16H17N3O4S : 347.39)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢세팔렉신수화물｣을 가지고 캡슐제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  이 약의 표시량에 따라 세팔렉신 70 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물 25 mL를 넣고 5 분간 세게 흔들어 섞은 다음 여과한다. 여액 1 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 100 mL로 한 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 260 ～ 264 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

용출시험  이 약 1 캡슐을 취하여 시험액으로 물 900 mL를 써서 제 2 법에 따라 매분 50 회전으로 시험한다. 용출시험 시작 60 분 후에 시험액 20 mL이상을 취하여 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인필터로 여과한다. 처음 여액 10 mL는 버리고 다음 여액 V mL를 정확하게 취하여 표시량에 따라 1 mL 중 세팔렉신 (C16H17N3O4S) 약 22 μg (역가)을 함유하도록 물을 넣어 정확하게 V′mL로 하여 검액으로 한다. 따로 세팔렉신표준품 약 22 mg (역가)을 정밀히 달아 물에 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 262 nm 부근의 흡수극대파장에서 흡광도 AT 및 AS를 측정한다. 이 약의 60 분간의 용출률이 80 % 이상일 때 적합하다.

세팔렉신 (C16H17N3O4S)의 표시량에 대한 용출률 (%)

= 세팔렉신표준품의 역가 (㎎)[eqn: ~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~{V~'}over{V~}~times~{1}over{C}~times~90]

C : 1 캡슐 중 세팔렉신 (C16H17N3O4S)의 표시량 [mg (역가)]

제제균일성시험  다음과 같은 방법으로 함량균일성시험을 할 때 적합하다.

이 약 1 캡슐의 내용물을 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5) 3V/5 mL를 넣어 세게 흔들어 섞은 다음 1 mL 중 세팔렉신 약 1.25 mg (역가)를 함유하는 액이 되도록 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)을 넣어 정확하게 V mL로 한다. 이 액을 원심분리하고 상층액 2 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣고 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 세팔렉신표준품 약 25 mg (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)에 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 4.5) 정확하게 취하여 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣고 0.1 mol/L 인산염완충액을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 세팔렉신의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세팔렉신 (C16H17N3O4	S)의 양 [mg (역가)]

= Ws[eqn: ~times~{Q_{T}}over{Q_{S}}~times~{V~}over{20~}]

WS : 세팔렉신표준품의 양 [mg (역가)]

수    분  10.0 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 20 캡슐 이상을 가지고 그 내용물의 질량을 정밀히 달고 가루로 하여 세팔렉신 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5) 60 mL를 넣고 10 분간 세게 흔들어 섞은 다음 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 원심분리한다. 상층액 2 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣고 0.1 mol/L 인산염완충액 (pH 4.5)를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 이하 ｢시럽용 세팔렉신｣의 정량법에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

세팔로틴나트륨

Cefalotin Sodium

C16H15N2NaO6S2 : 418.42

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세팔로틴 (C16H16N2O6S2 : 396.44) 920 ∼ 980 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 메탄올에 녹기 어려우며 에탄올에 매우 녹기 어렵고 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 세팔로틴나트륨표준품의 수용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세팔로틴나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨을 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 2.1 ppm 부근에 단일선의 시그날 A, δ 3.9 ppm 부근에 단일선 또는 끝이 다른 선인 시그날 B, δ 7.0 ppm 부근에 다중선시그날 C를 볼 수 있으며 각 시그날의 면적강도비 A : B : C는 3 : 2 : 2이다.

4)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{25}] : +124 ∼ +134° (5 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 7.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 5 mL에 녹일 때 액은 밝은 황색이고 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  정량법의 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 정량법의 검액 및 표준액 10 μL씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 세팔로틴 이외의 피크의 면적은 표준액의 세팔로틴피크면적보다 크지 않다. 또한 검액의 세팔로틴 이외의 피크면적의 합은 표준액의 세팔로틴의 피크면적의 3배보다 크지 않다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 세팔로틴의 유지시간의 약 4배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL을 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 10 mL로 한 액 10 μL로부터 얻은 세팔로틴의 피크면적이 표준액의 세팔로틴의 피크면적의 7 ∼ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 표준액을 90 ℃의 수욕 중에서 10분간 가열한 다음 식힌다. 이 액 2.5 mL을 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 한 액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 세팔로틴에 대한 상대유지시간 약 0.5 피크와 세팔로틴의 분리도는 9 이상이고 세팔로틴의 대칭계수는 1.8 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 3 회 반복할 때 세팔로틴의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세팔로틴으로서 1 mg(역가) 당 0.13 EU 미만이다.

수    분  1.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 역적정)

정 량 법  이 약 및 세팔로틴나트륨표준품 약 25 mg (역가)씩을 정밀히 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 25 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세팔로틴의 피크면적 AT 및 AS를 구한다.

세팔로틴(C16H16N2O6S2)의 역가 (μg)

= 세팔로틴나트륨표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃부근의 일정 온도

이동상 : 아세트산나트륨삼수화물 17 g을 물 790 mL에 녹인 액에 아세트산무수물 0.6 mL를 넣는다. 필요하면 0.1 mol/L 수산화나트륨시액 또는 아세트산무수물을 넣어 pH 5.9로 조정한다. 이 액에 아세토니트닐 150 mL 및 에탄올 70 mL를 넣는다.

유  량 : 세팔로틴의 유지시간이 약 12 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액을 90 ℃ 수욕에서 10 분 동안 가열한 다음 식히고 이 액 2.5 mL를 취하여 이동상을 넣어 100 mL로 한 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세팔로틴에 대한 상대유지시간 약 0.5 피크와 세팔로틴의 분리도는 9 이상이고, 세팔로틴의 대칭계수는 1.8 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세팔로틴 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

주사용 세팔로틴나트륨

Cefalotin Sodium for Injection

확인시험  이 약 및 세팔로틴나트륨표준품의 0.0025 % 수용액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 220 ～ 310 nm에서 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 흡수극대와 흡수극소를 나타낸다.

세포탁심나트륨

Cefotaxime Sodium

C16H16N5NaO7S2 : 477.45

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 세포탁심 (C16H17N5O7S2 : 455.47) 916 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 메탄올에 조금 녹으며 에탄올에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 세포탁심나트륨표준품 2 mg에 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 녹이고 100 mL로 한다. 이 액들을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세포탁심나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 125)를 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨을 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 2.1 ppm 부근, δ 4.0 ppm 부근 및 δ 7.0 ppm 부근에 각각 단일선 시그날 A, B 및 C를 보이며 각 시그날의 면적강도비 A : B : C는 3 : 3 : 1 이다.

4)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +58 ∼ +64° (환산한 건조물로서 0.25 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 6.5이다

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (235 nm) : 360 ∼ 390 (환산한 건조물로서 20 mg, 물, 1000 mL)

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 밝은 황색이고 맑다.

2) 황산염  이 약  2.0 g을 물 40 mL에 녹이고 묽은 염산 2 mL 및 물을 넣어 50 mL로 하여 잘 흔들어 섞은 다음 여과한다. 처음 여액 10 mL를 버리고 다음의 여액 25 mL에 물을 넣어 50 mL로 한다. 이것을 검액으로 하여 시험한다. 비교액은 0.005 mol/L 황산 1.0 mL를 취하고 묽은 염산 1 mL 및 물을 넣어 50 mL로 한다(0.048 % 이하).

3) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

4) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

5) 유연물질  정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 약 25 mg을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 25 mL로 한 액을 검액으로 한다. 다만, 검액의 측정범위는 세포탁심의 유지시간의 3.5 배 범위로 한다 (각각의 유연물질은 1.0 % 이하, 총 유연물질은 3.0 % 이하).

시스템적합성

시스템의 성능, 시스템의 재현성은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

검출의 확인 : 표준액 2 mL를 정확히 취하여 이동상 A를 넣어 정확히 100 mL가 되게 한다. 이 액 2 mL를 정확히 취하여 이동상 A를 넣어 정확히 20 mL가 되게 한다. 이 액 10 μL로부터 얻은 세포탁심의 피크면적이 표준액의 세포탁심의 피크면적의 0.15 ∼ 0.25%가 되는 지를 확인한다.

6) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀히 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀히 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세포탁심으로서 1 mg (역가) 당 0.05 EU 이하이다.

건조감량  3.0 % 이하 (1 g, 105 ℃, 3 시간)

정 량 법  이 약 및 세포탁심나트륨표준품 약 40 mg (역가)씩을 정밀히 달아 이동상 A를 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세포탁심의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

세포탁심(C16H17N5O7S2)의 역가 (μg)

= 세포탁심나트륨표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 235 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 30 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B의 혼합비를 다음과 같이 변화시켜 농도구배를 제어한다.

이동상 A - 0.05 mol/L 인산수소이나트륨시액에 인산을 넣어 pH를 6.25가 되게 한다. 이 액 860 mL에 메탄올 140 mL를 넣는다.

이동상 B - 0.05 mol/L 인산수소이나트륨시액에 인산을 넣어 pH를 6.25가 되게 한다. 이 액 600 mL에 메탄올 400 mL를 넣는다.

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)
0 ～ 7 7 ～ 9 9 ～ 16 16 ∼ 45 45 ∼ 50	100 100 → 80 80 80 → 0 0	0 0 → 20 20 20 → 100 100

유  량 : 세포탁심의 유지시간이 약 14 분이 되도록 한다 (약 1.3 mL/분).

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 1 mL에 물 7.0 mL 및 메탄올 2.0 mL를 넣어 흔들어 섞는다. 이 액에 탄산나트륨십수화물 25 mg을 넣어 흔들어 섞고 실온에서 10 분간 방치한 다음 아세트산무수물 3 방울 및 표준액 1 mL을 넣어 흔들어 섞는다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세포탁심에 대한 상대유지시간 약 0.3의 데스아세틸세포탁심, 세포탁심 순으로 유출하고, 분리도는 20 이상이다. 세포탁심 피크의 대칭계수는 2 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 세포탁심피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

주사용 세포탁심나트륨

Cefotaxime Sodium for Injection

확인시험  1)  ｢세포탁심나트륨｣의 확인시험 2)에 따라 시험한다.

2)  ｢세포탁심나트륨｣의 확인시험 4)에 따라 시험한다.

3)  정량법의 검액 및 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간은 같다.

순도시험  유연물질  ｢세포탁심나트륨｣의 순도시험 5)에 따라 시험한다. 단, 측정범위는 주성분 피크 유지시간의 8 배 범위로 한다 (각각의 유연물질은 1.0 %, 총 유연물질은 4.0 % 이하).

정 량 법  ｢세포탁심나트륨｣ 의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 40 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 이동상 A을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다.

주사용 세포테탄나트륨

Cefotetan Sodium for Injection

확인시험  1)  이 약 세포테탄 약 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 염산히드록실아민시액 2 mL를 넣어 녹여 3 분간 방치한 다음 산성황산암모늄철(Ⅲ)시액 1 mL를 넣어 진탕할 때 액은 적갈색을 나타낸다.

2)  이 약 세포테탄 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 1 % 인산염완충액(pH 6.5)을 넣어 녹여 1000 mL로 한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 283 ～ 287 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

3)  이 약을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 파수 약 1760 ㎝-1, 1630 ㎝-1, 1520 ㎝-1 및 1080 ㎝-1에서 흡수를 나타낸다.

세포페라존나트륨

Cefoperazone Sodium

C25H26N9NaO8S2 : 667.65

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세포페라존 (C25H27N9O8S : 645.67) 871 μg (역가)이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 메탄올에 녹으며 무수에탄올에는 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 세포페라존표준품의 수용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수 스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨을 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 1.2 ppm 부근에 삼중선의 시그날 A, δ 6.8 ppm 부근 및 δ 7.3 ppm 부근에 각각 이중선의 시그날 B 및 C를 보이며, 각 시그날의 면적강도비 A : B : C는 3 : 2 : 2 이다.

3)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다. 다만, 동결건조된 가루인 경우는 제외한다.

비선광도   : -15 ∼ -25° (1 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 4 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 6.5이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 엷은 황색이고 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 0.1 g을 물 100 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 25 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 유지시간 약 8분의 유연물질 Ⅰ은 5.0 % 이하이고, 유지시간 17분의 유연물질 Ⅱ는 1.5 % 이하이다. 또한 유연물질의 합계 양은 7.0 % 이하이다. 단, 유연물질 Ⅰ 및 Ⅱ의 피크면적은 측정한 면적에 각각의 감도계수 0.90 및 0.75를 곱한 값으로 한다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 용매 피크 이후부터 세포페라존의 유지시간의 약 3배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL을 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 20 mL로 하고 이 액 25 μL로부터 얻은 세포페라존의 피크면적이 표준액의 3.5 ∼ 6.5 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 표준액 25 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세포페라존의 피크의 이론단수는 5000 이상이고 대칭계수는 1.5 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 25 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 세포페라존의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세포페라존 1 mg (역가) 당 0.20 EU 이하이다.

수    분  1.0 % 이하 (3 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 약 0.1 g (역가)을 정밀히 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL를 넣어 검액으로 한다. 따로 세포페라존표준품 약 0.1 g (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0) 5 mL를 넣어 녹이고 물을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL를 넣어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 세포페라존의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세포페라존(C25H27N9O8S2)의 역가 (μg)

= 세포페라존표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  아세트아닐리드의 물․아세토니트릴혼합액(43 : 7)용액(3 → 8000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 35 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세트산무수물 57 mL 및 트리에틸아민 139 mL를 취하여 물을 넣어 1000 mL로 한다. 이 액 20 mL에 물 835 mL, 아세토니트릴 140 mL 및 묽은 아세트산 5 mL를 넣는다.

유  량 : 세포페라존의 유지시간이 약 10 분이 되게 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 내부표준물질, 세포페라존 순으로 유출하고 분리도는 5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 세포페라존 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  밀봉용기 (냉소보관)

주사용 세포페라존나트륨

Cefoperazone Sodium for Injection

확인시험  1)  이 약 및 세포페라존표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 페이스트법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세포페라존표준품 적당량을 달아 아세톤․물혼합액(9 : 1)으로 mL 당 1.0 mg을 함유하는 용액을 만들어 각각 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메틸에틸케톤․아세트산무수물․물혼합액(18 : 3 : 3)을 전개용매로 하여 전개한 다음 박층판에 자외선 (주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

3)  정량법의 검액 및 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간은 같다.

정 량 법  ｢세포페라존나트륨｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 물을 넣어 녹이고 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL를 넣어 검액으로 한다.

세폭시틴나트륨

Cefoxitin Sodium

C16H17N3NaO7S2 : 449.44

이 약은 정량할 때 환산한 무수, 무아세톤, 무메탄올로서 1 mg에 대하여 세폭시틴 (C16H17N3O7S2 : 427.46) 927 ∼ 970 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황백색의 입자 또는 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 메탄올에 녹으며 에탄올에 녹기 어렵고 에테르에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  정량법의 검액에서 얻은 주피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간과 같다.

2)  이 약 25 mg을 달아 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)을 넣어 녹여 1000 mL로 한 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 234 ∼ 238 및 260 ∼ 264 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

3)  이 약 및 세폭시틴표준품 20 mg씩을 달아 메탄올을 넣어 녹인 다음 10 mL로 한 액을 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름․아세톤․포름산혼합액(10 : 9 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 정도 전개한 다음 박층판을 바람에 말려 p-디메틸아미노신남알데히드시액을 뿌리고 약 80 ℃에서 5 분간 가열할 때 나타나는 검액 및 표준액의 적자색 반점의 Rf 값은 같다.

4)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +206 ∼ +214° (환산한 무수, 무아세톤, 무메탄올물로서 0.25 g, 메탄올, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.2 ∼ 7.0이다.

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (262 nm) : 190 ∼ 210 [환산한 무수물로서 2.0 mg, 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0), 100 mL]

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 아세톤 및 메탄올  이 약 5.0 g을 달아 물에 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 3.0 mL를 원심분리관에 넣고 얼음물에서 중에서 2 분간 식히고 세게 흔들면서 0.24 mol/L 염산 3.0 mL를 넣고 원심분리하여 맑은 액을 검액으로 한다. 따로 아세톤 5.0 mL를 취하여 물을 넣어 정확하게 1000 mL로 하여 용액 (1)로 한다. 또한 메탄올 5.0 mL를 취하여 메탄올을 넣어 1000 mL로 하여 용액 (2)로 한다. 용액 (1) 50.0 mL 및 용액 (2) 5.0 mL를 취하여 물을 넣어 정확하게 500 mL로 하여 표준액으로 한다. 이 액의 아세톤 및 메탄올 농도는 각각 0.050 % 및 0.005 %(V/V)이다. 검액 및 표준액 2 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액에서 아세톤 및 메탄올의 피크면적을 측정하여 AU 및 AS를 측정하여 다음 식에 따라 계산할 때 아세톤 0.7 % 이하 및 메탄올 0.1 % 이하이다.

아세톤 및 메탄올의 양(%)

D : 20 ℃에서 아세톤 및 메탄올의 비중 (g/mL)

P : 표준액에서의 아세톤 및 메탄올의 농도(V/V%)

C : 검액에서의 세폭시틴나트륨의 농도(g/mL)

3) 세폭시틴락톤  이 약 약 0.1 g을 정밀히 달아 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 검액 1 mL를 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔로 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름․아세톤․포름산혼합액(10 : 9 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 정도 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 p-디메틸아미노신남알데히드시액을 고르게 뿌리고 약 80 ℃에서 5 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다 (1.0 % 이하).

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세폭시틴 1 mg (역가) 당 0.10 EU 이하이다.

수    분  1.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정), 단, 메탄올 대신에 에틸렌글리콜․피리딘혼합액(3 : 1)을 쓴다.

정 량 법  이 약 약 50 mg (역가)을 정밀히 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 세폭시틴표준품 약 10 mg (역가)을 정밀히 달아 물을 넣어 녹여 20 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세폭시틴의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

세폭시틴(C16H17N3O7S2)의 역가 (μg)

= 세폭시틴표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 실온

이동상 : 물․메.탄올․아세트산무수물혼합액(50 : 50 : 1)

유  량 : 세폭시틴의 유지시간이 약 6 분이 되도록 한다.

저 장 법  기밀용기

세푸록심나트륨

Cefuroxime Sodium

C16H15N4NaO8S : 446.37

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세푸록심 (C16H16N4O8S : 424.39) 875 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 메탄올에 녹으며 에탄올에 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 세푸록심나트륨표준품의 수용액(1 → 100000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세푸록심나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨은 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 4.0 ppm 부근에 단일시그날 A, δ 6.6 ppm 부근에 사중선시그날 B, δ 6.9 ppm 부근 및 δ 7.7 ppm 부근에 각각 이중선시그날 C 및 D를 보이며 각 시그날의 면적비 A : B : C : D는 3 : 1 : 1 : 1이다.

4)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +59 ∼ +66° (환산한 무수물로서 0.5 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 6.0 ∼ 8.5이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 맑다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험할 때 파장 450 nm에서 흡광도는 0.25 이하이다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 3.0 mL를 넣는다 (30 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 25 mg을 물 25 mL에 녹여 검액으로 한다. 검액 1 mL을 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 세푸록심 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 세푸록심의 피크면적보다 크지 않다. 또한 검액의 세푸록심 이외의 피크면적의 합은 표준액의 세푸록심의 피크면적의 3배보다 크지 않다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 용매 피크 이후부터 세푸록심 유지시간의 약 4배의 범위

시스템적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성을 따른다.

검출의 확인 : 표준액 1 mL을 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 20 μL로부터 얻은 세푸록심의 피크면적이 표준액의 세푸록심의 피크면적의 7 ∼ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세푸록심의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

5) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀히 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀히 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 실릴화한 기체크로마토그래프용 규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유   량 : 30 mL/분

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세푸록심 1 mg (역가) 당 0.10 EU 미만이다.

수    분  4.0 % 이하 (0.4 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 세푸록심나트륨표준품 약 25 mg (역가)씩을 정밀히 달아 각각 물을 넣어 녹여 정확하게 25 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세푸록심 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

세푸록심(C16H16N4O8S)의 역가 (μg)

= 세푸록심나트륨표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 : 273 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 125 mm의 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용헥사실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세트산나트륨삼수화물 0.68 g을 물 900 mL에 녹이고 아세트산무수물을 넣어 pH를 3.4가 되게 한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다. 이 액 990 mL에 아세토니트릴 10 mL를 넣는다.

유량 : 세푸록심의 유지시간이 약 8 분이 되게 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 검액을 60 ℃에서 10 분간 방치하고 식힌 다음 이 액 20 μL를 가지고 신속하게 위의 조건으로 조작할 때 세푸록심피크와 세푸록심피크에 대한 상대유지시간이 약 0.7 인 피크의 분리도는 2.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세푸록심 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

세푸록심악세틸

Cefuroxime Axetil

C20H22N4O10S : 510.47

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세푸록심 (C16H16N4O8S : 424.39) 800 ∼ 850 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색 무정성의 가루이다.

이 약은 디메틸설폭시드에 잘 녹고, 메탄올에 녹으며, 에탄올에 조금 녹고, 물에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 세푸록심악세틸표준품의 메탄올용액(3 → 200000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세푸록심악세틸표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수소화디메틸설폭시드용액(1 → 20)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 테트라메틸실란을 내부표준물질로하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 1.5 ppm 부근에 일대의 이중선 시그날 A, δ 2.1 ppm 부근에 일대의 단일선 시그날 B, δ 3.9 ppm 부근에 단일선 시그날 C가 보이며, 각 시그날의 면적강도비 A : B : C는 1 : 1 : 1이다.

결 정 성  시험할 때 결정성이 없다.

비선광도   : + 41 ∼ + 47° (0.5 g, 메탄올, 50 mL, 100 mm)

순도시험  1) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 도가니에 달아 질산마그네슘의 에탄올용액 (1 → 10) 10 mL를 넣고 천천히 가열하여 회화한다. 탄화물이 남아있으면 소량의 질산으로 적시고 강열하여 회화한다. 식힌 다음 잔사에 묽은 염산 10 mL를 넣고 수욕에서 가온하여 녹이고 이 액을 검액으로 하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 25 mg을 메탄올 4 mL에 녹인 다음 인산이수소암모늄용액(23 → 1000)을 넣어 10 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 1 mL을 정확하게 취하여 메탄올 40 mL을 넣고 인산이수소암모늄용액(23 → 1000)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 2 μL씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 세푸록심악세틸 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 세푸록심악세틸의 2 개 피크면적의 합의 1.5 배보다 크지 않다. 또한 검액의 세푸록심악세틸 이외의 피크면적의 합은 표준액의 세푸록심악세틸의 2개의 피크면적의 합의 4배보다 크지 않다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 용매 피크 이후부터 세푸록심악세틸의 2 개 피크 중 유지시간이 큰 쪽의 피크의 약 3 배 범위

시스템적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 메탄올 4 mL를 넣고 다시 인산이수소암모늄용액(23 → 1000)을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 2 μL로부터 얻은 세푸록심악세틸의 2 개의 피크면적의 합이 표준액 2 μL로부터 얻은  세푸록심악세틸의 2개 피크면적의 합의 7 ∼ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 재현성 : 표준액 2 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세푸록심악세틸의 2개 피크면적의 합의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

4) 아세톤  이 약 약 1 g을 정밀히 달아 내부표준액 0.2 mL를 정확하게 넣고 다시 디메틸설폭시드를 넣어 녹이고 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 아세톤 약 0.5 g을 정밀히 달아 디메틸설폭시드를 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 0.2 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 0.2 mL를 정확하게 넣고 다시 디메틸설폭시드를 넣어 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 1 μL 씩을 가지고 다음의 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 아세톤의 피크면적비 QT 및 QS를 구할 때 아세톤의 양은 1.3 % 이하이다.

아세톤의 양(%)

WS : 아세톤의 채취량(g)

WT : 이 약의 채취량(g)

내부표준액 : 1-프로판올의 디메틸설폭시드용액(1 → 200)

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼럼 : 안지름 3 mm, 길이 2 m인 유리관에 기체크로마토그래프용폴리에틸렌글리콜 600 및 기체크로마토그래프용 폴리에틸렌글리콜 1500을 1 : 1 비율로 혼합한 것을 125 ∼ 150 μm의 기체크로마토그래프용규조토에 20 % 비율로 피복시킨 것을 충전한다.

칼럼온도 : 90 ℃ 부근의 일정온도

검체도입부온도 : 115 ℃ 부근의 일정온도

운반기체 : 질소

유량 : 내부표준물질의 유지시간이 약 4 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 1 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 아세톤, 내부표준물질 순으로 유출하고 분리도는 5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 1 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 아세톤 피크면적의 상대표준편차는 5.0 % 이하이다.

수    분  2.0 % 이하 (0.4 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.2 % 이하 (0.5 g)

이성질체비  정량법에 따라 시험하고 다음 계산식에 따라 이성체 A의 함량비를 구한다 (0.48 ∼ 0.55).

이 약 중 이성체 A의 함량비

정 량 법  이 약 및 세푸록심악세틸표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀히 달아 각각 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 10 mL씩을 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL 및 메탄올 5 mL를 정확하게 넣고 인산이수소암모늄용액(23 → 1000)을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 세푸록심악세틸의 2 개 피크면적의 합의 비 QT 및 QS를 구한다.

세푸록심(C16H16N4O8S)의 역가 (μg)

= 세푸록심악세틸표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  아세트아닐리드의 메탄올용액(27 → 5000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 278 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 200 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 트리메틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소암모늄용액(23 → 1000)․메탄올혼합액(5 : 3)

유  량 : 세푸록심악세틸의 2개 피크 중 먼저 유출되는 피크의 유지시간이 약 8 분이 되게 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 내부표준물질, 세푸록심악세틸의 순으로 유출하고 세푸록심악세틸의 두 개의 피크의 분리도는 1.5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL씩을 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 세푹록심악세틸의 2개의 피크면적의 합의 비의 상대표준 편차는 1.0 % 이하이다.

상대유지시간 : 내부표준물질에 대한 이성체 B의 상대유지시간은 약 2, 이성체 A의 상대유지시간은 약 2.25이다.

저 장 법  차광한 기밀용기

세푸록심악세틸 정

Cefuroxime Axetil Tablets

정 량 법  ｢세푸록심악세틸｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 20 정 이상을 가지고 그 질량을 정밀히 달아 가루로 하고 표시역가에 따라 약 50 mg (역가) 에 해당하는 양을 정밀히 달아 각각 메탄올을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하고 이 액 10 mL을 정확하게 취하여 메탄올 5 mL를 넣은 다음 인산이수소암모늄용액(23 → 1000)을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다.

세프라딘수화물

Cefradine Hydrate

C16H19N3O4S․2H2O : 385.44

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세프라딘 (C16H19N3O4S : 349.41) 900 ∼ 1050 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황백색의 결정성 가루이며 냄새는 없거나 또는 약간 특이한 냄새가 있으며 맛은 쓰다.

이 약은 물에 조금 녹고 메탄올에 녹기 어려우며 에탄올에 매우 녹기 어렵고 에테르에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  이 약 및 세프라딘표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다. 다만, 스펙트럼에 차이가 있을 때에는 각각을 메탄올에 녹인 다음 건조하여 그 잔류물들을 가지고 시험을 반복한다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 6.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

2) 비소  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다 (1 ppm 이하).

3) 세팔렉신 정량법에 따라 시험하여 다음 식에 따라 세팔렉신의 양을 구한다(5.0 % 이하).

세팔렉신(C16H17N3O4S)의 양 (%) = [eqn: {A _{T}} over {A _{S}} TIMES 100]

AT : 검액에서 얻은 세팔렉신 피크면적

AS : 검액에서 얻은 세프라딘과 세팔렉신 합계면적

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세프라딘 1 mg (역가)당 0.20 EU 이하이다.

수    분  8.5 ～ 10.5 % (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 세프라딘표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀히 달아 각각 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 다음 식에 따라 세프라딘의 양을 구한다.

세프라딘(C16H19N3O4S)의 역가 (μg)

= 세프라딘표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

AT : 검액에서 얻은 세프라딘과 세팔렉신 합계면적

AS : 표준액에서 얻은 세프라딘과 세팔렉신 합계면적

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 250 mcm인 스테인레스강관에 105 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 물․메탄올․0.5 mol/L 아세트산나트륨․0.7 mol/L 아세트산혼합액(782 : 200 : 15 : 3)

유  량 : 1.0 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험할 때 세팔렉신 및 세프라딘의 상대유지시간은 각각 0.8 및 1.0이며 두 피크 사이의 분리도는 2.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 세프라딘 피크의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦시스템적합성용액 : 세프라딘표준품 및 세팔렉신표준품을 적당량 달아 이동상에 녹여 각각 mL 당 0.5 mg을 함유하는 용액을 만든다.

저 장 법  차광한 기밀용기

주사용 세프메녹심염산염

Cefmenoxime Hydrochloride for Injection

확인시험  1)  이 약 세프메녹심으로서 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 2 mL 및 염산히드록실아민용액(1 → 10) 1 mL를 넣어 녹여 5 분간 방치한 다음 1 mol/L 염산시액 3 mL 및 염화철(Ⅲ)시액 3 방울을 넣을 때 액은 빨강 띤 자색을 나타낸다.

2)  이 약 세프메녹심으로서 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 2 mL를 넣어 녹여 수욕에서 1 분간 가열하여 식힌 다음 니트로프루싯나트륨시액 1 방울을 넣을 때 액은 적색을 나타낸다.

3)  ｢세프메녹심염산염｣의 확인시험 1)에 따른다

세프타지딤수화물

Ceftazidime Hydrate

세프타지딤	C22H22N6O7S2․5H2O : 636.65

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 세프타지딤 (C22H22N6O7S2 : 546.58) 950 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정성가루이다.

이 약은 물에 녹기 어렵고, 아세토니트릴 또는 에탄올에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 세프타지딤표준품의 pH 6.0 인산염완충액용액(1 → 100000)를 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세프타지딤표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약 50 mg을 달아 건조한 탄산나트륨 5 mg을 넣고 핵자기공명스펙트럼 측정용 중수 0.5 mL에 녹이고 이 액을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨을 내부기준물질로서 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ 1.5 ppm 부근 및 δ 6.9 ppm 부근에 각각 단일선의 시그날 A 및 B를, δ 7.9 ∼ 9.2 ppm에 다중선의 시그날 C를 나타내며, 각 시그날의 면적강도비 A : B : C는 6 : 1 : 5 이다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도   : -28 ∼ -34° (환산한 건조물로서 0.5 g, 인산염완충액(pH 6.0), 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.5 g을 물 100 mL에 녹인 액의 pH는 3.0 ∼ 4.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 무수인산수소이나트륨 5 g 및 인산이수소칼륨 1 g을 물에 녹여 100 mL로 한 액 10 mL에 녹일 때 액은 맑다. 또한 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험할 때 파장 420 nm에서의 흡광도는 0.20 이하이다.

2) 유리피리딘  이 약 약 50 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 피리딘 0.1 g을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 한 다음 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 피리딘 피크 높이 HT 및 HS을 측정할 때 유리피리딘의 양은 0.3 % 이하이다.

유리피리딘의 양(mg)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 20 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소암모늄 2.88 g을 물 500 mL에 녹이고 아세토니트릴 300 mL를 넣고 물을 넣어 1 L로 하고 강암모니아수를 넣어 pH를 7.0으로 조정한다.

유  량 : 피리딘의 유지시간이 약 4 분이 되도록 조정한다.

시스템 적합성

검출의 확인 : 표준액 10 μL에서 얻은 피리딘의 피크높이가 기록장치의 풀스케일의 약 50 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 5 mg을 피리딘의 이동상용액 (1 → 20000) 100 mL에 녹인다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세프타지딤, 피리딘의 순으로 유출하고 그 분리도는 9 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 6 회 반복할 때 피리딘 피크높이의 상대표준편차는 5.0 % 이하이다.

3) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

4) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

5) 유연물질 (트리틸-t-부틸체 및 t-부틸체)  이 약 0.1 g을 희석시킨 인산수소이나트륨시액 (1 → 3) 2 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 희석시킨 인산수소이나트륨시액(1 → 3)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 2 μL씩을 가지고 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적하고 아세트산 n-부틸․아세트산무수물․아세트산염완충액(pH 4.5)․l-부탄올혼합액(16 : 16 : 13 : 3)을 전개용매로 하여 약 12 cm 전개시킨 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 자외선 (주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 주반점보다 윗부분의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

6) 기타 유연물질  이 약 20 mg을 이동상 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상에 녹여 정확하게 200 mL가 되게 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 세프타지딤 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 세프타지딤의 피크면적보다 크지 않다. 또 검액의 세프타지딤 이외의 피크면적의 합은 표준액의 세프타지딤 피크면적의 5 배보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 20 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소암모늄 5.0 g을 물 750 mL에 녹이고 인산을 넣어 pH를 3.5 로 조정한 다음 물을 넣어 870 mL로 한다. 여기에 아세토니트릴 130 mL를 넣는다.

유  량 : 세프타지딤의 유지시간이 약 4 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 용매피크 다음부터 세프타지딤 유지시간의 약 3 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 5 mL로 한다. 이 액 5 μL에서 얻은 세프타지딤의 피크면적은 표준액 5 μL에서 얻은 세프타지딤의 피크면적 15 ～ 25 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 및 아세트아닐리드 10 mg 씩을 이동상 20 mL에 녹인다. 이 액 5 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세프타지딤, 아세트아닐리드의 순으로 유출되고 그 분리도는 10 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세프타지딤 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세프타지딤 1 mg (역가) 당 0.10 EU 이하이다.

건조감량  13.0 ∼ 15.0 % (0.1 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  이 약 및 세프타지딤표준품 약 0.1 g (역가)씩을 정밀하게 달아 각각 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)에 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 mL를 각각 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL를 정확하게 넣고 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)을 넣어 50 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질 피크면적에 대한 세프타지딤의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세프타디짐 (C22H22N6O7S2)의 역가 (μg)

= 세프타디짐표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준물질  디메돈의 0.05 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)용액(11 → 10000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 10 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용헥실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 무수인산수소이나트륨 4.26 g 및 인산이수소칼륨 2.72 g을 물 980 mL에 녹이고 아세토니트릴 20 mL를 넣는다.

유  량 : 세프타지딤의 유지시간이 약 4 분이 되게 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험할 때 내부표준물질, 세프타지딤의 순으로 유출하고 분리도는 3 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 세프타지딤의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  차광한 기밀용기

세프트리악손나트륨수화물

Ceftriaxone Sodium Hydrate

세프트리악손나트륨                           C18H16N8Na2O7S3․3½H2O : 661.60

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세프트리악손 (C18H18N8O7S3 : 554.58) 905 ∼ 935 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 물 또는 디메틸설폭시드에 잘 녹고 메탄올에 조금 녹으며 무수에탄올에 매우 녹기 어렵고 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 세프트리악손나트륨표준품의 수용액(1 → 100000)을 가지고 자외가시부스펙트럼측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용중수소화디메틸설폭시드용액(1 → 10)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용테트라메틸실란을 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H을 측정할 때 δ 3.5 ppm 부근, δ 3.8 ppm 부근, δ 6.7 ppm 부근 및 δ 7.2 ppm 부근에 각각 단일선의 시그날 A, B, C 및 D를 나타내며 각 시그날의 면적강도비 A : B : C : D는 3 : 3 : 1 : 2이다. 또한, δ 3.5 ppm 부근의 시그날이 물의 시그날과 겹쳐 나타나므로 프로브온도를 약 50 ℃로 유지하여 측정한다.

3)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도   : -153 ∼ -170° (환산한 무수물로서 50 mg, 물, 2.5 mL, 20 mm)

pH  이 약 0.6 g을 물 5 mL에 녹인 액의 pH는 6.0 ∼ 8.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 0.6 g을 물 5 mL에 녹일 때 액은 밝은 황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질 가) 이 약 20 mg을 이동상 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1  mL를 정확하게 취하여 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 세프트리악손에 대한 상대유지시간 약 0.5 인 유연물질 Ⅰ의 피크면적 및 상대유지시간 약 1.3 인 유연물질 Ⅱ의 피크면적은 표준액의 세프트리악손 피크면적보다 크지 않다. 다만 유연물질 Ⅰ 및 유연물질 Ⅱ의 피크면적은 자동적분법으로 측정한 면적에 각각 감도계수 0.9 및 1.2를 곱한 값으로 한다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 무수인산수소이나트륨 5.796 g 및 인산이수소칼륨 3.522 g을 물에 녹여 정확하게 1 L로 하여 A 액으로 한다. 시트르산일수화물 20.256 g 및 수산화나트륨 7.840 g을 물에 녹여 정확하게 1 L로 하여 B 액으로 한다. 브롬화테트라 n-헵틸암모늄 4.0 g을 아세토니트릴 450 mL에 녹인다. 이 액에 물 490 mL, A 액 55 mL 및 B 액 5 mL를 넣는다.

유  량 : 세프트리악손의 유지시간이 약 7 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 세프트리악손 유지시간의 약 2 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 검액 5 mL를 정확하게 취하여 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)을 넣어 정확하게 200 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 세프트리악손의 피크면적은 시스템적합성용액 10 μL에서 얻은 세프트리악손 피크면적의 0.9  ～ 1.1 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 10 mg을 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)을 넣어 녹여 5 mL로 한다. 이 액에 테레프탈산디에틸의 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)용액 (9 → 5000) 5 mL를 넣고 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)을 넣어 200 mL로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세프트리악손, 테레프탈산디에틸의 순으로 유출하고 분리도는 6 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세프트리악손 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

나)  이 약 10 mg을 이동상 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴․물혼합액(23 : 11)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 세프트리악손 피크 다음에 유출하는 각각의 유연물질의 피크면적은 표준액에서 얻은 세프트리악손의 피크면적보다 크지 않다. 또한 유연물질피크의 합계면적은 표준액의 피크면적의 2.5 배보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 무수인산수소이나트륨 5.796 g 및 인산이수소칼륨 3.522 g을 물에 녹여 정확하게 1 L로 하여 A 액으로 한다. 시트르산일수화물 20.256 g 및 수산화나트륨 7.840 g을 물에 녹여 정확하게 1 L로 하여 B 액으로 한다. 브롬화테트라 n-헵틸암모늄 4.0 g을 아세토니트릴 450 mL에 녹인다. 이 액에 물 490 mL, A액 55 mL 및 B액 5 mL를 넣고 다시 아세토니트릴 700 mL를 넣는다.

유  량 : 세프트리악손의 유지시간이 약 3 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 세프트리악손 유지시간의 약 10 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 검액 5 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴․물혼합액(23 : 11)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴․물혼합액(23 : 11)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 세프트리악손의 피크면적은 시스템적합성용액 10 μL에서 얻은 세프트리악손의 피크면적의 0.9 ～ 1.1 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 10 mg을 아세토니트릴․물혼합액(23 : 11)을 넣어 녹여 5 mL로 한다. 이 액에 테레프탈산디에틸의  물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)용액 (9 → 5000) 5 mL를 넣고 아세토니트릴․물혼합액(23 : 11)을 넣어 200 mL로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세프트리악손, 테레프탈산디에틸의 순으로 유출하고 분리도는 3 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세프트리악손 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 세프트리악손 1 mg (역가)당 0.20 EU 이하이다.

수    분  8.0 ∼ 11.0 % (0.15 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 세프트리악손나트륨표준품 약 0.1 g (역가)씩을 정밀하게 달아 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)을 넣어 녹여 각각 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL 씩을 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL 씩을 정확하게 넣은 후 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)를 넣어 200 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 세프트리악손의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

세프트리악손(C18H18N8O7S3)의 역가 (μg)

= 세프트리악손나트륨표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준물질  테레프탈산디에틸의 물․아세토니트릴 혼합액(11 : 9)용액(9 → 5000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 무수인산수소이나트륨 5.796 g 및 인산이수소칼륨 3.522 g을 물에 녹여 정확하게 1 L로 하여 A 액으로 한다. 시트르산일수화물 20.256 g 및 수산화나트륨 7.840 g을 물에 녹여 정확하게 1 L로 하여 B 액으로 한다. 브롬화테트라 n-헵틸암모늄 4.0 g을 아세토니트릴 450 mL에 녹인다. 이 액에 물 490 mL, A 액 55 mL 및 B 액 5 mL를 넣는다.

유  량 :세프트리악손의 유지시간이 약 7 분이 되게 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 세프트리악손, 내부표준물질 순으로 유출하고 분리도는 6 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질 피크 면적에 대한 세프트리악손의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법	차광한 기밀용기

주사용 세프트리악손나트륨

Ceftriaxone Sodium for Injection

확인시험  이 약 및 세프트리악손나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

정 량 법  ｢세프트리악손나트륨수화물｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL 을 정확하게 넣은 다음 물․아세토니트릴혼합액(11 : 9)를 넣어 정확하게 200 mL로 하여 검액으로 한다.

주사용 세프티족심나트륨

Ceftizoxime Sodium for Injection

확인시험  1)  이 약 세프티족심으로서 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물 2 mL에 녹여 염산히드록실아민시액 3 mL를 넣어 5 분간 방치한 다음 산성황산암모늄철(Ⅲ)시액 1 mL를 넣을 때 적갈색을 나타낸다.

2)  이 약 세프티족심으로서 1 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물 4 mL에 녹여 빙냉시키면서 묽은염산 1 mL를 넣은 다음 새로 만든 아질산나트륨용액(1 → 100) 1 mL를 넣어 2 분간 방치한다. 여기에 빙냉하면서 설파민산암모늄시액 1 mL를 넣어 1 분간 방치한 다음 N-(1-나프틸)에틸렌디아민염산염용액(1 → 1000) 1 mL를 넣을 때 자색을 나타낸다.

3)  ｢세프티족심나트륨｣의 확인시험 1)에 따른다.

세픽심수화물

Cefixime Hydrate

세픽심                                         C16H15N5O7S2․3H2O : 507.50

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 세픽심 (C16H15N5O7S2 : 453.45) 930 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황색의 결정성 가루이다.

이 약은 메탄올 또는 디메틸설폭시드에 잘 녹고 무수에탄올에 조금 녹으며 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 세픽심표준품의 pH 7.0 의 0.1 mol/L 인산염완충액용액(1 → 62500)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 세픽심표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약 50 mg을 핵자기공명스펙트럼측정용중수소화디메틸설폭시드․핵자기공명스펙트럼측정용중수혼합액(4 : 1) 0.5 mL에 녹인 액을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용테트라메틸실란을 내부기준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H을 측정할 때 δ 4.7 ppm 부근에 단일선의 시그날 A를, δ 6.5 ∼ δ 7.4 ppm 부근에 다중선의 시그날 B를 나타내며, 각 시그날의 면적강도비 A : B는 1 : 1 이다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -75 ∼ -88° [환산한 무수물로서 0.45 g, 탄산수소나트륨용액(1 → 50), 50 mL, 100 mm]

pH  이 약의 포화용액의 pH는 2.4 ∼ 4.1이다.

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (288 nm) : 500 ∼ 550 [환산한 무수물로서 70 mg, 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0), 5 L]

순도시험  유연물질  이 약 0.1 g을 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0) 100 mL에 녹여 검액으로 한다. 검액 10 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하고 면적백분율법으로 각 피크면적을 측정할 때 세픽심 이외의 각 피크 양은 1.0 % 이하이며, 세픽심 이외의 피크의 양의 합계는 2.5 % 이하이다.

조작조건

정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 용매피크 다음부터 세픽심의 유지시간의 약 3 배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 검액 1 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 μL로부터 얻은 세픽심 피크의 높이가 20 ∼ 60 mm가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 세픽심표준품 약 2 mg을 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0) 200 mL에 녹이고 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 세픽심의 피크의 이론단수는 4000 이상이고 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세픽심의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

수    분  9.0 ∼ 12.0 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.1 % 이하(1 g)

정 량 법  이 약 및 세픽심표준품 약 0.1 g (역가)씩을 각각 정밀하게 달아 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 mL 씩을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 7.0)을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 세픽심의 피크면적 AT 및 AS를 구한다.

세픽심(C16H15N5O7S2)의 역가 (μg)

= 세픽심표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 125 mm인 스테인레스강관에 4 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 테트라부틸암모늄히드록시드시액의 용액(10 → 13) 25 mL를 취하여 물을 넣어 1 L로 하고 희석시킨 인산(1 → 10)으로 pH를 6.5으로 조절한 다음, 이 용액 300 mL에 아세토니트릴 100 mL를 넣는다.

유  량 : 세픽심의 유지시간이 약 10 분이 되도록 조절한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 세픽심의 이론단수는 4000 이상이고 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 세픽심 피크면적비의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

저 장 법	차광한 기밀용기

스트렙토마이신황산염

Streptomycin Sulfate

황산스트렙토마이신                           (C21H39N7O12)2․3H2SO4 : 1457.38

이 약은 Streptomyces griseus을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 아미노글리코사이드계 화합물의 황산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 스트렙토마이신 (C21H39N7O12 : 581.57) 740 ∼ 820 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 에탄올에 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 50 mg을 물 5 mL에 녹인 액에 닌히드린시액 1 mL 및 피리딘 0.5 mL를 넣고 10 분간 가열하면 액은 자색을 나타낸다.

2) 이 약 및 스트렙토마이신황산염표준품 10 mg씩을 물 10 mL에 녹이고 검액 및 표준액으로 한다. 이 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔로 만든 박층판에 점적한다. 인산이수소칼륨용액(7 → 100)을 전개용매로 하여 약 12 cm 전개한 다음 바람에 말린다. 여기에 1,3-디히드록시나프탈렌의 에탄올용액(1 → 500)․희석시킨 황산(1 → 5)혼합액(1 : 1)을 고르게 뿌린 다음 약 150 ℃에서 약 5 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 주반점은 같은 색깔과 같은 Rf 값을 나타낸다.

3) 이 약의 수용액(1 → 5)은 황산염의 정성반응을 나타낸다.

비선광도   : -79 ∼ -88° (환산한 건조물로서 0.5 g, 물, 50 mL, 100 mm)

pH  이 약 2 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 7.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 5 mL에 녹일 때 액은 무색 ∼ 엷은 황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

3) 비소  이 약 2.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (1 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 0.20 g을 정밀하게 달아 메탄올․황산혼합액(97 : 3)에 녹이고 5 mL로 하여 환류냉각기를 달아 1 시간 가열한다. 식힌 다음 냉각기 내부를 메탄올․황산혼합액(97 : 3) 적당량으로 씻고 메탄올․황산 혼합액(97 : 3)을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 D(+)-만노즈 36 mg을 정밀하게 달아 메탄올․황산혼합액(97 : 3)에 녹이고 5 mL로 하여 환류냉각기를 달아 1 시간 가열한다. 식힌 다음 냉각기 내부를 메탄올․황산혼합액(97 : 3) 적당량으로 씻고 메탄올․황산혼합액(97 : 3)을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 메탄올․황산혼합액(97 : 3)을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL를 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 톨루엔․메탄올․아세트산무수물혼합액(2 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 13 ∼ 15 cm 전개시킨 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 1,3-디히드록시나프탈렌의 에탄올용액(1 → 500)․희석시킨 황산(1 → 5)혼합액(1 : 1)을 고르게 뿌린 다음 110 ℃에서 5 분간 가열할 때 표준액에서 얻은 반점에 해당하는 위치의 검액에서 얻은 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 스트렙토마이신 1 mg (역가)당 0.10 EU 이하이다.

이상독성부정시험  이 약 1 mg을 주사용수 0.5 mL에 녹여 체중 17 ～ 24 g 의 건강한 마우스 5 마리에 각각 15 ～ 30 초간 정맥 주사한다. 동물은 시험 전 적어도 5 일 동안 관찰하였을 때 이상이 없는 것을 사용한다. 투여 후 24 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물이 없다. 만약 1 마리가 죽은 경우에는 5 마리를 가지고 다시 시험하여 24 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물이 없다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 녹여 mL 당 3.0 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다.

건조감량  5.0 % 이하 (0.5 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  1.0 % 이하 (1 g)

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(가)①㉮의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균  Bacillus subtilis ATCC 6633을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 20 mg (역가)을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹여 정확하게  50 mL로 하여 검액원액으로 한다. 이 검액원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 8.0 및 2.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 스트렙토마이신황산염표준품 적당량을 건조한 다음 약 20 mg (역가)을 정밀하게 달아 희석시킨 pH 6.0 인산염완충액(1 → 2)을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 표준원액으로 한다. 이 표준원액은 5 ∼ 15 ℃에서 저장하며 30 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 8.0 및 2.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

주사용 스트렙토마이신황산염

Streptomycin Sulfate for Injection

이 약은 쓸 때 녹여 쓰는 주사제로 정량할 때 표시량의 90.0 ～ 110.0 %에 해당하는 스트렙토마이신 (C21H39N7O12 : 581.57)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢스트렙토마이신황산염｣을 가지고 주사제의 제법에 따라 만든다.

성    상  이 약은 흰색 또는 엷은 황색의 덩어리 또는 가루이다.

확인시험  ｢스트렙토마이신황산염｣의 확인시험 2)에 따라 시험한다.

pH  이 약 스트렙토마이신 2.0 g (역가)에 해당하는 양을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ～ 7.0이다.

순도시험  용해상태  이 약의 표시량에 따라 스트렙토마이신황산염 1.0 g (역가)에 해당하는 양을 달아 물 3 mL에 녹일 때 액은 맑다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험할 때 파장 400 nm에서의 흡광도는 0.50 이하이다.

무균시험  시험할 때 적합하다.

엔도톡신  이 약은 스트렙토마이신으로서 1 mg (역가) 당 0.10 EU 미만이다.

불용성이물시험  시험할 때 적합하다.

주사제의 불용성미립자시험  시험할 때 적합하다.

제제균일성시험  시험할 때 적합하다.

건조감량  4.0 % 이하 (0.5 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  ｢스트렙토마이신황산염｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 스트렙토마이신황산염 약 1.0 g (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물을 넣어 정확하게 200 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 달아 mL 당 8.0 및 2.0 μg (역가)을 함유하도록 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 희석하여 고농도검액 및 저농도검액으로 한다.

저 장 법  밀봉용기

스펙티노마이신염산염수화물

Spectinomycin Hydrochloride Hydrate

염산스펙티노마이신                          C14H24N2O7․2HCl․5H2O : 495.35

이 약은 Streptomyces spectabilis를 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 화합물의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 1 mg에 대하여 스펙티노마이신 (C14H24N2O7 : 332.35) 603 ∼ 713 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약의 수용액(1 → 100) 5 mL에 안트론시액을 천천히 넣을 때 경계면에는 청색 ∼ 청록색을 나타낸다.

2)  이 약 및 스펙티노마이신염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 페이스트법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 수용액(1 → 150) 3 mL에 질산은시액 한 방울을 넣을 때 액은 흰색으로 뿌옇게 된다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도   : +15 ∼ + 21° (환산한 무수물로서 2.1 g, 물, 25 mL, 200 mm)

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 4.0 ∼ 5.6 이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 스펙티노마이신 1 mg (역가) 당 0.09 EU이하이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 녹여 mL 당 15 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다.

수    분  16.0 ∼ 20.0 % (0.3 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  1.0 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 및 스펙티노마이신염산염표준품 약 30 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 내부표준액 10.0 mL 및 헥사메틸디실라잔 1.0 mL를 넣어 때때로 흔들어 주면서 1 시간 반응시킨 다음 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 0.5 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질 피크면적에 대한 스펙티노마이신염산염의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

스펙티노마이신 (C14H24N2O7)의 역가 (μg)

= 스펙티노마이신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  트리페닐안티몬 50 mg을 달아 디메틸아미드를 넣어 녹여 25 mL로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 3 mm, 길이 약 600 mm인 관에 칼럼기체-크롬Q (80/100메쉬)에 그 질량의 5 %에 해당하는 SE-52를 피복시킨 것을 충전한다.

칼럼온도 : 90 ℃ 부근의 일정 온도

운반기체 : 헬륨

유  량 : 45 mL/분

저 장 법  기밀용기

시클로세린 캡슐

Cycloserine Capsules

확인시험  1)  이 약 시클로세린으로서 10 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 물 2 mL를 넣어 흔들어 섞고 여과하여 여액에 염화철(Ⅲ)시액 1 ～ 2 방울을 넣으면 액은 어두운 적색을 나타낸다.

2)  이 약 시클로세린으로서 5 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 수산화나트륨용액(1 → 250) 10 mL를 넣어 녹인 다음 이 액 1 mL에 묽은아세트산 3 mL를 넣어 흔들어 섞고 이 액에 시클로세린반응용시액 1 mL를 넣으면 액은 청색을 나타낸다.

시트르산수화물

Citric Acid Hydrate

순도시험  2) 황산염  이 약 2.0 g을 물에 녹여 30mL로 하여 검액으로 한다. 따로 황산칼륨 0.181g을 희석시킨 에탄올 (99.5)(3 → 10)에 녹여 정확하게 500 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취해 희석시킨 에탄올 (99.5)(3 → 10)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 4.5 mL에 염화바륨이수화물용액(1 → 4) 3 mL를 넣어 흔들어 섞은 다음 1 분간 방치한다. 이 액 2.5 mL에 검액 15 mL 및 아세트산 0.5 mL를 넣어 5 분간 방치할 때 액은 다음의 비교액보다 혼탁하지 않다.

◦ 비교액  황산칼륨 0.180 g을 물에 녹여 정확하게 500 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취해 물을 넣어 정확히 100 mL로 한다. 검액 대신 이 액 15 mL를 가지고 검액과 같이 조작하여 비교액으로 한다.

아목시실린수화물

Amoxicillin Hydrate

아목시실린	C16H19N3O5S․3H2O : 419.45

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 아목시실린 (C16H19N3O5S : 365.40) 950 ∼ 1010 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물 또는 메탄올에 녹기 어렵고 에탄올에 매우 녹기 어렵다.

확인시험  이 약 및 아목시실린표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +290 ∼ +315° (환산한 무수물로서 0.1 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 20 mg을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 6.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 황산마그네슘용액 (1 → 4) 2 mL를 넣어 섞은 다음 수욕에서 가열하여 증발건고 한다. 잔류물을 약하게 가열하여 탄화하고 식힌 다음 황산 1 mL를 넣고 주의하여 가열한 다음 500 ～ 600 ℃로 가열하여 회화한다. 식힌 다음 잔류물에 염산 1 mL를 넣고 수욕에서 가온하여 증발건고한다. 잔류물에 물 10 mL를 넣고 수욕에서 가온하여 녹인다. 식힌 다음 암모니아시액으로 pH를 3 ～ 4 로 맞춘 다음 묽은아세트산 2 mL를 넣고 필요하면 여과하고 물 10 mL로 씻고 여액과 씻은 액을 비색관에 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액을 검액으로 하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 취하여 황산마그네슘용액 (1 → 4) 2 mL를 넣어 섞은 다음 검액과 같이 조작한다 (20 ppm이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 0.10 g을 사붕산나트륨십수화물용액(1 → 200) 50 mL에 녹여 검액으로 한다. 검액 1 mL를 정확하게 취하고 사붕산나트륨십수화물용액(1 → 200)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 아목시실린 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 아목시실린의 피크면적보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 254 nm)

칼럼 : 안지름 4 mm, 길이 30 cm인 스테인레스강관에 10 μL의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세트산나트륨삼수화물 1.36 g을 물 750 mL에 녹이고, 아세트산(31)로 pH 4.5로 조정한 다음 다시 물을 넣어 1000 mL로 한다. 이 액 950 mL에 메탄올 50 mL를 넣는다.

유량 : 아목시실린의 유지시간이 약 8 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 아목시실린의 유지시간의 약 4배의 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 사붕산나트륨십수화물용액(1 → 200)을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 아목시실린의 피크면적은 표준액 10 μL에서 얻은 아목시실린의 피크면적의 7 ∼ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 아목시실린 피크의 이론단수는 2500 이상이고 대칭계수는 1.5 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 아목시실린의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

4) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

수    분  11.5 ∼ 15.0 % (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 아목시실린표준품 약 30 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 붕산용액(1 → 200)을 넣어 녹이고 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 아목시실린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

아목시실린(C16H19N3O5S2)의 역가 (μg)

= 아목시실린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

유  량 : 아목시실린의 유지시간이 약 8 분이 되도록 조절한다.

이동상 : 아세트산나트륨삼수화물 1.361 g을 물 750 mL에 녹이고 아세트산(31)을 이용하여 pH 4.5로 조정한 다음 다시 물을 넣어 1000 mL로 한다. 이 액 950 mL에 메탄올 50 mL를 넣는다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 아목시실린의 이론단수는 2500 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 아목시실린의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

시럽용 아목시실린

Amoxicillin for Syrup

확인시험  1)  이 약 아목시실린 약 20 mg 에 해당하는 양을 달아 물 10 mL를 넣어 녹이고 페링시액 1 mL를 넣으면 즉시 적자색을 나타낸다.

2)  이 약 수용액(1 → 5000) 2 mL에 황산수은(Ⅱ)의 2.5 mol/L 황산용액(3 → 20) 1 mL를 넣어 수욕에서 2 분간 가열하고 여기에 아질산나트륨용액(1 → 1000) 1 mL를 넣고 2 분간 가열하면 적갈색이 나타난다.

3)  이 약 아목시실린 약 0.2 g 에 해당하는 양 및 아목시실린표준품 약 0.2 g을 달아 0.1 mol/L 염산시액을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메탄올․클로로포름․물․피리딘혼합액(9 : 8 : 3 : 1)을 전개용매로 하여 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린 0.3 g을 메탄올 100 mL에 녹인 용액을 박층판에 고르게 뿌리고 110 ℃에서 15 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

아목시실린 캡슐

Amoxicillin Capsules

이 약은 정량할 때 표시량의 92.0 ～ 105.0 %에 해당하는 아목시실린 (C16H19N3O5S : 365.40)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢아목시실린수화물｣을 가지고 캡슐제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  이 약의 내용물을 취하여 표시량에 따라 아목시실린수화물 8 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 0.01 mol/L 염산시액 2 mL를 넣고 30 분간 흔들어 섞은 다음 여과하여 여액을 검액으로 한다. 따로 아목시실린표준품 8 mg (역가)에 해당하는 양을 0.01 mol/L 염산시액 2 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 테트라히드로푸란․물․포름산 혼합액(50 : 5 : 2)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린의 에탄올 (95)용액(1 → 20)을 고르게 뿌리고 110 ℃에서 15 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 주반점은 적자색을 나타내고 Rf 값은 같다.

순도시험  유연물질  이 약의 내용물을 취하여 표시량에 따라 아목시실린으로서 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 달아 붕산용액(1 → 200) 30 mL를 넣고 15 분간 흔들어 섞은 다음 붕산용액(1 → 200)을 넣어 50 mL로 한다. 이 액을 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 붕산용액(1 → 200)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 아목시실린 이외의 피크면적은 표준액의 아목시실린의 피크면적보다 크지 않다.

조작조건

｢아목시실린수화물｣의 순도시험 3)의 시험조건에 따른다.

시스템적합성

검출의 확인 및 시스템재현성은 ｢아목시실린수화물｣의 순도시험 3)의 시스템적합성에 따른다.

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 아목시실린피크의 이론단수는 2500 이상, 대칭계수는 1.5 이하이다.

용출시험  이 약 1 캡슐을 취하여 시험액으로 물 900 mL를 써서 싱커를 사용하여 제 2 법에 따라 매분 100 회전으로 시험한다. 용출시험 시작 60 분 후에 시험액 20 mL 이상을 취하여 공경 0.45 μm 이하의 멤브레인필터로 여과한다. 처음 여액 10 mL는 버리고 다음 여액 V mL를 정확하게 취하여 표시량에 따라 1 mL 중 아목시실린 (C16H19N3O5S) 약 56 μg (역가)을 함유하도록 물을 넣어 정확하게 V′ mL로 하여 검액으로 한다. 따로 아목시실린표준품 약 28 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 100 mL이 되게 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 50 μL씩을 가지고 다음의 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 아목시실린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다. 이 약의 60 분간의 용출률이 75 % 이상일 때 적합하다.

아목시실린 (C16H19N3O5S)의 표시량에 대한 용출률 (%)

= 아목시실린표준품의 역가(mg)[eqn: ~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~{V~'}over{V~}~times~{1}over{C}~times~180]

C : 1 캡슐 중 아목시실린 (C16H19N3O5S)의 표시량 [mg (역가)]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼 럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 아세트산나트륨삼수화물 1.361 g을 물 750 mL에 녹여 아세트산(31)로 pH 4.5로 조정하고 물을 넣어 1000 mL로 한다. 이 액 950 mL에 메탄올 50 mL를 넣어 섞는다.

유 량 : 아목시실린의 피크 유지시간이 약 8 분이 되도록 조정한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 50 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 이론단수는 2500 이상이고 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 50 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 아목시실린의 피크면적의 상대표준편차는 1.5 % 이하이다.

제제균일성시험  시험할 때 적합하다.

수    분  15.0 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 20 캡슐 이상을 가지고 그 내용물의 질량을 정밀하게 단다. 표시역가에 따라 아목시실린수화물 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물 70 mL를 넣어 15 분간 흔들어 섞은 다음 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 원심분리하고 상층액을 검액으로 한다. 따로 아목시실린표준품 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 20 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 아목시실린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

아목시실린 (C16H19N3O5S)의 역가 (μg)

= 아목시실린표준품의 역가 (μg)[eqn: ` TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} ` TIMES `5]

조작조건

칼럼온도, 이동상 및 유량은 ｢아목시실린수화물｣의 정량법의 조건에 따른다.

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 아목시실린 피크의 이론단수는 2500 이상, 대칭계수는 1.5 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 아목시실린 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

아  미  카  신

Amikacin

C22H43N5O13 : 585.60

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 아미카신 (C22H43N5O13) 900 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 회백색 양털 모양의 가루이다.

확인시험  1)  이 약 및 아미카신표준품 약 60 mg씩을 달아 물에 녹여 mL 당 6 mg을 함유하는 용액을 만들어 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 3 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 230 × 230 × 90 mm인 전개조의 앞쪽 끝부분에 200 × 30 mm 왓트만여과지 3호 또는 이와 동질의 여과지를 길이 방향으로 접어서 걸치고 박층판이 전개조 끝 부위로 약 10 mm 나오도록 하여 실리카겔층이 앞쪽으로 기울도록 하고 200 × 6 mm의 구멍이 있는 전개조 덮개로 전개조를 덮은 여과지부분을 제외하고는 뚫린 부분을 접착테이프로 막은 후 5 시간 30 분 동안 메탄올·강암모니아수·클로로포름혼합액(60 : 35 : 25)을 전개용매로 하여 전개하고 박층판을 바람에 말린다. 여기에 1 % 닌히드린의 부탄올용액 100 mL에 피리딘 1 mL를 넣은 용액을 고르게 뿌리고 110 ℃에서 15 분간 가열하여 발색시킬 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

2)  정량법의 검액 및 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간은 같다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{25}] : +97 ∼ +105° (환산한 무수물로서 0.5 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 9.5 ∼ 11.5이다.

수    분  8.5 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  1.0 % 이하 (1 g). 단, 탄화시킨 잔류물에 질산 2 mL 및 황산 5 방울 넣어 적신다.

정 량 법  이 약 및 아미카신표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 10.0 mL를 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

아미카신 (C22H43N5O13)의 역가 (μg)

= 아미카신표준품의 역가 (μg)[eqn: ` TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} `]

조작조건

검출기 : 전기화학검출기(통합전류측정방식, 금지시전극 및 pH 은-염화은 참조전극, 범위 : 300 nC, 출력 : 1 V 풀스케일, 상승시간 : 0.5 초, 양극성(positive polarity), 포텐셜 E=0.04 V ; t1=200 ms; E2=0.8 V ; t2=190 ms ; E3=-0.8 ; t3=190 ms)

칼럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 트리메틸아민기로 충분히 기능화한 8 μm의 고용량 음이온 교환 미세다공질체를 충전한다. 같은 충전제로 된 보호칼럼을 쓴다.

이동상 : 0.115 mol/L 수산화나트륨, 필요하면 조정한다.

유량 : 0.5 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 아미카신표준품 및 카나마이신일황산염표준품 적당량을 정밀하게 달아 물에 녹여 1 mL당 0.02 mg, 카나마이신 0.008 mg을 함유하는 용액을 만들어 시스템적합성용으로 한다. 이 액 20 μL을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 아미카신에 대한 카나마이신의 상대유지시간은 0.8 이고 분리도는 3 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 아미카신 피크면적의 상대표준편차는 3 % 이하이며, 대칭계수는 2 이하이다.

저 장 법	기밀용기

아미카신 주사액

Amikacin Injection

정 량 법  ｢아미카신｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 10.0 mL를 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다.

아미카신황산염

Amikacin Sulfate

황산아미카신	C22H43N5O13·xH2SO4

이 약은 카나마이신의 유도체의 황산염이다. 이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 아미카신 (C22H43N5O13 : 585.60) 691 ∼ 791 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 아미카신황산염표준품을 미리 건조한 다음 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 아미카신황산염표준품 0.1 g씩을 달아 물 4 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 2 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 물․강암모니아수․메탄올․테트라히드로푸란혼합액(1 : 1 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 꺼내어 바람에 말린다. 여기에 닌히드린․시트르산․아세트산시액을 고르게 뿌리고 100 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점은 적자색을 띠고 Rf 값은 같다.

3) 이 약의 수용액(1 → 100)은 황산염의 정성반응(1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_D^20] : +76 ∼ +84° (1 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 100 mL에 녹인 액의 pH는 6.0 ∼ 7.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 유연물질  이 약 0.1 g을 물 4 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 2 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 물․강암모니아수․메탄올․테트라히드로푸란혼합액(1 : 1 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린․시트르산․아세트산시액을 고르게 뿌리고 100 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 아미카신 1 mg (역가) 당 0.50 EU 이하이다.

건조감량  4.0 % 이하 (1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  이 약 및 아미카신황산염표준품 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 각각의 액 200 μL씩을 유리마개가 달린 시험관에 정확하게 취하여 피리딘 3 mL 및 2,4,6-트리니트로벤젠설폰산용액(1 → 100) 2 mL 씩을 정확하게 넣고 마개를 막고 70 ℃ 수욕 중에서 30 분간 가온한다. 식힌 다음 각각 아세트산무수물 2 mL 씩을 정확하게 넣어 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각각의 아미카신유도체의 피크높이 HT 및 HS를 측정한다.

아미카신 (C22H43N5O13)의 역가 (μg)

= 아미카신황산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {H _T} over {H _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 340 nm)

칼럼 : 안지름 4.6 mm, 길이 25 cm의 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실릴릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 35 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소칼륨 2.72 g을 물 800 mL에 녹여 수산화칼륨용액(1 → 40)으로 pH를 6.5로 조정한 다음 물을 넣어 1 L로 한다. 이 액 280 mL에 메탄올 720 mL를 넣고 섞는다.

유 량 : 아미카신유도체의 피크 유지시간이 약 9 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 이 약 및 카나마이신황산염 각각 약 5 mg (역가)을 물 5 mL에 녹인다. 이 액 200 μL를 유리마개가 달린 시험관에 취하여 피리딘 3 mL 및 2,4,6-트리니트로벤젠설폰산용액(1 → 100) 2 mL를 넣고 마개를 막아 70 ℃의 수욕 중에서 30 분간 가온한다. 식힌 다음 아세트산무수물 2 mL를 넣은 다음 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 아미카신유도체, 카나마이신유도체 순서로 유출하고 분리도는 5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 아미카신유도체의 피크 높이의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

저 장 법	밀봉용기

아지트로마이신수화물

Azithromycin Hydrate

아지스로마이신	C38H72N2O12․2H2O : 785.02

이 약은 에리트리마이신의 유도체이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물로서 1 mg에 대하여 아지트로마이신 (C38H72N2O12 : 748.98)으로서 945 ∼ 1030 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정성 가루이다.

이 약은 메탄올 또는 무수에탄올에 잘 녹으며 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  이 약 및 아지트로마이신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  무정형 및 입자의 대부분이 복굴절과 입자의 소멸이 나타나지 않는 경우를 제외하고 시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α] _{D}^{20}] : -45 ∼ -49° (환산한 무수물로서 0.4 g, 무수에탄올, 20 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.2 g을 50 % 메탄올용액 10 mL에 녹인 액의 pH는 9.0 ∼ 11.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 1.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

2) 유연물질  가) 총 유연물질  정량법에 따라 시험한다. 다만, 검액 및 조작조건은 다음과 같다. 이 약 약 33 mg을 정밀하게 달아 아세토니트릴 5 mL를 넣어 녹이고 0.02 mol/L 인산이수소칼륨용액․아세토니트릴 혼합액(71 : 29)을 10 mol/L 수산화칼륨시액으로 pH를 8.0으로 한 액을 넣어 100 mL로 하여 검액으로 한다. 검액 50 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 아지트로마이신 및 각 유연물질의 피크면적을 측정한다 (총 유연물질 5.5 % 이하).

총 유연물질의 함량 (%)

조작조건

이동상 : 0.02 mol/L 인산이수소칼륨용액․아세토니트릴혼합액(75 : 25)을 10 mol/L 수산화칼륨시액으로 pH를 11.0으로 한다.

유  량 : 1.2 mL/분

측정범위 : 약 80 분

나) 에리트로마이신 A 이미노에테르  이 약 적당량을 달아 클로로포름․메탄올혼합액(1 : 1)으로 녹여 mL 당 25 mg으로 하여 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신 A 이미노에테르표준품 2.5 mg을 정밀하게 달아 클로로포름․메탄올혼합액(1 : 1)으로 녹여 mL 당 0.125 mg으로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 50 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔 (형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 에틸아세테이트․헥산․디에틸아민혼합액(15 : 5 : 2)을 전개용매로 하여 전개한 다음 박층판을 100 ℃에서 10 분간 가열한다. 여기에 바닐린 3 g을 에탄올 100 mL를 넣어 녹이고 황산 1.5 mL를 넣은 액을 고르게 뿌리고 100 ℃에서 10 분간 다시 가열할 때  검액에서 나타나는 주반점 이외의 반점은 표준액에서 나타나는 주반점보다 진하지 않다.

수    분  4.0 ∼ 5.0 % (0.4 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.1 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 및 아지트로마이신표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 각각 아세토니트릴․물혼합액(3 : 2)을 넣어 녹여 내부표준액 2 mL 씩을 정확하게 넣은 다음 아세토니트릴․물혼합액(3 : 2)를 넣어 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 아지트로마이신의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

아지트로마이신 (C38H72N2O12)의 역가 (μg)

= 아지트로마이신표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  4,4'-비스(디에틸아미노)벤조페논의 아세토니트릴용액(3 → 4000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 215 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한폴리비닐알코올겔폴리머를 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산수소이칼륨 6.97 g을 물 750 mL에 녹여 수산화칼륨시액을 넣어 pH 11.0으로 조정한 다음 물을 넣어 1 L로 한다. 이 액 400 mL에 아세토니트릴 600 mL를 넣는다.

유  량 : 아지트로마이신의 유지시간이 약 10 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 아지트로마이신, 내부표준물질 순서로 유출하고 분리도는 2.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 아지트로마이신의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법	기밀용기

아지트로마이신 캡슐

Azithromycin capsules

확인시험  1)  이 약의 내용물을 가지고 필요하면 가루로 하여 정량법의 검액 및 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간은 같다.

정 량 법  이 약 20 캡슐 이상을 가지고 그 내용물의 질량을 정밀하게 달고 필요하면 가루로 하여 표시역가에 따라 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 아세토니트릴을 넣어 녹여 1 mL 중 1 mg (역가)을 함유하는 용액을 만든다. 이 용액 2 mL를 정확하게 취하여 내부표준액으로 정확하게 50 mL로 한 다음 다시 이 용액 2 mL를 정확하게 취하여 내부표준액으로 정확하게 25 mL로 하여 검액으로 한다. 따로, 아지트로마이신표준품 약 33 mg(역가)씩을 정밀하게 달아 각각 아세토니트릴을 넣어 녹여 정확하게 200 mL로 한 다음 이 액 2 mL 씩을 정확하게 취하여 내부표준액으로 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 50 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 아지트로마이신의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

내부표준액  디펜히드라민염산염 약 1.5 mg을 정밀하게 달아 0.02 mol/L 인산이수소칼륨용액·아세토니트릴혼합액(71 : 29)을 10 mol/L 수산화칼륨시액으로 pH를 8.0으로 한 액을 넣어 녹여 1000 mL가 되게 한다.

조작조건

검출기 : 전기화학검출기

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 150 mm인 스테인레스강관에 Alumina based hydrocarbon을 충전한다.

이동상 : 0.02 mol/L 인산이수소칼륨용액·아세토니트릴혼합액(71 : 29)을 10 mol/L 수산화칼륨시액으로 pH를 11.0으로 한다.

유  량 : 1.5 mL/분

암포테리신 B

Amphotericin B

C47H73NO17 : 924.08

이 약은 Streptomyces nodosus를 배양하여 얻은 항진균활성을 가지는 폴리엔마크로라이드계 화합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 암포테리신 B (C47H73NO17) 840 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 황색 ∼ 주황색의 가루이다.

이 약은 디메틸설폭시드에 잘 녹고 물 또는 에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 5 mg을 디메틸설폭시드 10 mL에 녹인다. 이 액 1 mL에 인산 5 mL를 넣을 때 두 층 사이는 청색을 띄며 흔들어 섞을 때 액은 청색을 띤다. 또한 이 액에 물 15 mL를 넣어 흔들어 섞을 때 액은 황색 ∼ 밝은 황갈색을 띤다.

2)  이 약 및 암포테리신 B 표준품을 각각 약 25 mg을 달아 디메틸설폭시드 5 mL를 넣어 녹이고 메탄올을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 1 mL에 메탄올을 넣어 50 mL로 한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

pH  이 약 0.3 g을 물 10 mL에 현탁시킨 액의 pH는 3.5 ∼ 6.0이다.

순도시험  암포테리신 A  이 약 및 암포테리신 B 표준품 약 50 mg 씩을 정밀하게 달아 각각을 디메틸설폭시드 10 mL를 정확하게 넣어 녹이고 메탄올을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 4 mL 씩을 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액 (1)으로 한다. 따로 니스타틴표준품 약 20 mg을 정밀하게 달아 디메틸설폭시드 40 mL를 넣어 녹이고 메탄올을 넣어 정확하게 200 mL로 한다. 이 액 4 mL를 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액 (2)으로 한다. 이들 액을 가지고 검액과 같이 조작하여 얻은 공시험액을 대조로 하여 자외가시부흡광도측정법에 시험한다. 파장 282 nm 및 304 nm에서 각각의 흡광도를 측정하여 아래 식에 따라 암포테리신  B 의 양을 구할 때 주사용의 경우 5 % 이하이다. 단 주사용 이외의 경우 암포테리신 B의 양은 15 % 이하이다.

암포테리신 A 함량 (%)

WS : 니스타틴표준품의 양(mg)

WT : 이 약의 양(mg)

ASa1 : 표준액 (1)의 282 nm에서의 흡광도

ASb1 : 표준액 (2)의 282 nm에서의 흡광도

ASa2 : 표준액 (1)의 304 nm에서의 흡광도

ASb2 : 표준액 (2)의 304 nm에서의 흡광도

AT1 : 검액의 282 nm에서의 흡광도

AT2 : 검액의 304 nm에서의 흡광도

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 암포테리신 B로서 1 mg(역가) 당 1.0 EU 미만이다.

건조감량  5.0 % 이하 (0.1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  0.5 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약의 표시역가에 따라 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 물을 넣어 녹여 mL 당 5 mg (역가)을 함유하는 용액을 만든다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 이동상을 넣어 mL 당 8 μg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 따로 암포테리신 B 표준품 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 메탄올을 넣어 녹여 mL 당 0.2 mg (역가)을 함유하는 표준액원액을 만든다. 이 표준액원액 적당량을 정확하게 취하여 이동상을 넣어 mL 당 8 μg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 암포테리신 B의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

암포테리신 B (C47H73NO17)의 역가 (μg)

= 암포테리신 B 표준품의 역가 (μg)[eqn: ~times~{{A_T}}over{A_S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 405 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 150 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥틸실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 10 mol/L 인산칼륨용액․아세토니트릴혼합액(66 : 34) (pH 4.8 ±   0.2)

유  량 : 1.0 mL/분

저 장 법	차광한 기밀용기 (냉소 보관)

암피실린수화물

Ampicillin Hydrate

아미노벤질페니실린

암피실린	C16H19N3O4S․3H2O : 403.45

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 암피실린 (C16H19N3O4S : 349.40) 960 ∼ 1005 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물에 조금 녹고 메탄올에 녹기 어려우며 에탄올에 매우 녹기 어렵고 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  이 약 및 암피실린표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +280 ∼ +305 ° (환산한 무수물로서 0.5 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 400 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 5.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 50 mg을 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 암피실린 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 암피실린 피크면적보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산수소이암모늄 5.94 g을 물 850 mL에 녹이고 아세토니트릴 100 mL를 넣고 인산으로 pH를 5.0으로 조정한 다음 물을 넣어 정확하게 1 L로 한다.

유  량 : 암피실린의 유지시간이 약 6 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 암피실린 유지시간의 약 10 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 암피실린의 피크면적이 표준액의 10 μL에서 얻은 암피실린 피크면적의 7 ～ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 암피실린표준품 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 이동상 10 mL에 녹이고 구아이페네신의 이동상용액(1 → 200) 5 mL를 넣고 다시 이동상을 넣어 50 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 암피실린, 구아이페네신 순으로 유출되고 그 분리도는 40 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 구아이페네신의 피크면적에 대한 암피실린의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

4) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 암포테리신 B로서 1 mg(역가) 당 0.15 EU 미만이다.

수    분  12.0 ∼ 15.0 % (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 암피실린표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 적당량의 이동상에 녹이고 내부표준액 5 mL씩을 정확하게 넣은 다음 이동상을 넣어 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 암피실린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

암피실린 (C16H19N3O4S)의 역가 (μg)

= 암피실린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  구아이페네신의 이동상용액(1 → 200)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산수소이암모늄 5.94 g을 물 850 mL에 녹이고 아세토니트릴 100 mL를 넣고 인산으로 pH를 5.0으로 조정한 다음 물을 넣어 정확하게 1 L로 한다.

유  량 : 암피실린의 유지시간이 약 6 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 암피실린, 내부표준물질의 순서로 유출하고 분리도는 40 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 암피실린 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

암피실린 캡슐

Ampicillin Capsules

확인시험  1)  이 약 내용물을 가지고 암피실린으로서 약 10 mg에 해당하는 양을 물 1 mL에 현탁시키고 페링시액 2 mL 및 물 6 mL의 혼합액 2 mL를 넣으면 즉시 적자색을 나타낸다. 다만, 프로베네시드가 함유되어 있을 때에는 이 약 적당량을 달아 클로로포름으로 씻어 클로로포름층을 버린 다음 그 잔류물을 가지고 시험한다.

2)  이 약의 mL 당 암피실린 1 mg을 함유하는 용액 2 mL에 페놀 0.5 mL 및 차아염소산나트륨시액 5 mL를 넣으면 지속하는 벤즈알데히드의 냄새가 나며 3 ～ 5 분 이내에 주황색 침전이 생긴다. 다만, 프로베네시드가 함유되어 있을 때에는 이 약 적당량을 달아 클로로포름으로 씻어 클로로포름층을 버린 다음 그 잔류물을 가지고 시험한다.

정 량 법  ｢암피실린수화물｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 20 캡슐 이상을 가지고 그 내용물의 질량을 정밀하게 달고 표시역가에 따라 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 적당량의 이동상에 녹이고 내부표준액 5 mL씩을 정확하게 넣은 다음 이동상을 넣어 50 mL로 하여 검액으로 한다.

암피실린나트륨

Ampicillin Sodium

아미노벤질페니실린나트륨	C16H18N3NaO4S : 371.39

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 암피실린 (C16H19N3O4S : 349.40) 850 ∼ 950 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 무수에탄올에 조금 녹는다.

확인시험  1) 이 약 및 암피실린나트륨표준품을 데시케이터(0.67 kPa 이하, 60 ℃)에서 3시간 건조하고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다. 단, 동결건조 암피실린나트륨의 경우는 제외한다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +246 ∼ +272° (환산한 무수물로서 1.0 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 8.0 ∼ 10.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색 ～ 엷은 황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 1 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 1 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 50 mg을 이동상 50 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각 액의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 암피실린 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 암피실린 피크면적보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산수소이암모늄 5.94 g을 물 850 mL에 녹이고 아세토니트릴 100 mL를 넣고 인산으로 pH를 5.0으로 조정한 다음 물을 넣어 정확하게 1 L로 한다.

유  량 : 암피실린의 유지시간이 약 6 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 암피실린 유지시간의 약 10 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 암피실린의 피크면적은 표준액의 10 μL에서 얻은 암피실린 피크면적의 7 ～ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 암피실린표준품 50 mg을 정밀하게 달아 이동상 10 mL에 녹이고 구아이페네신의 이동상용액(1 → 200) 5 mL를 넣고 다시 이동상을 넣어 50 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 암피실린, 구아이페네신의 순서로 유출되고 그 분리도는 35 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 구아이페네신의 피크면적에 대한 암피실린의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

5) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상징액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 암피실린으로서 1 mg (역가) 당 0.15 EU 이하이다.

수    분  2.0 % 이하 (0.2 g, 용량적정법, 직접적정).

정 량 법  ｢암피실린수화물｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 적당량의 이동상에 녹이고 내부표준액 5 mL씩을 정확하게 넣은 다음 이동상을 넣어 50 mL로 하여 검액으로 한다.

저 장 법  기밀용기

에리트로마이신

Erythromycin

C37H67NO13 : 733.93

이 약은 Saccharopolyspora erythraea을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 마크로라이드계 화합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 에리트로마이신 (C37H67NO13) 930 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 가루이다.

이 약은 디메틸포름아미드에 썩 잘 녹고 메탄올 또는 에탄올에 잘 녹으며 물에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 에리트로마이신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 에리트로마이신표준품 10 mg씩을 메탄올 1 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이 액들을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메탄올․강암모니아수혼합액 (50 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 4-메톡시벤즈알데히드․황산시액을 고르게 뿌리고 100 ℃에서 15 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점은 진한 보라색 반점을 나타내며 Rf 값은 같다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -71 ∼ -78° (환산한 무수물로서 1g, 에탄올, 50 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.1 g을 물 150 mL에 녹인 액의 pH는 8.0 ∼ 10.5이다.

순도시험  1) 티오시안산염  이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 50 mL 갈색용량플라스크에 넣고 메탄올 20 mL를 넣어 녹인 다음 여기에 염화제이철시액 1 mL를 넣고 메탄올을 넣어 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로, 미리 105 ℃에서 1 시간 동안 건조한 티오시안산칼륨을 식힌 다음 0.1 g을 정확하게 달아 두 개의 50 mL 용량플라스크에 각각 넣고 메탄올을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 각각에서 5.0 mL 씩을 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 50 mL로 한 다음 각 용액에서 다시 5.0 mL 씩을 정확하게 취하여 50 mL 갈색 용량플라스크에 넣고 각 액에 염화제이철시액 1.0 mL를 정확하게 넣고 메탄올을 넣어 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 따로 염화제이철시액 1 mL를 50 mL 갈색 용량플라스크에 넣고 메탄올을 넣어 녹여 50 mL로 하여 공시험액으로 한다. 검액, 표준액, 공시험액은 모두 만든 후 30 분 이내에 쓴다. 검액 및 표준액을 가지고 공시험액을 대조로 하여 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험하여 492 nm에서의 흡광도를 측정하여 다음 식에 따라 티오시안산염의 양을 구할 때 0.3 % 이하이다.

[eqn: 티오시안산염의~함량~(%)~=~ {58.08} over {97.18} ` TIMES {A _{T}} over {W _{T}} ` TIMES `0.5~ TIMES `[ {W _{1}} over {A _{1}} `+ {W _{2}} over {A _{2}} ]]

AT : 검액의 흡광도

WT : 검체 채취량 (mg)

A1, A2 : 각 표준액의 흡광도

W1, W2 : 각 표준액의 티오시안산칼륨 채취량 (mg)

58.08 : 티오시안산염 분자량

97.18 : 티오시안산칼륨 분자량

시스템적합성 : 각 표준액을 가지고 흡광도를 측정하여 다음 식에 따라 적합성계수(S)를 계산할 때 0.985 ∼ 1.015 이어야 한다.

[eqn: S~=~ {A _{1}} over {W _{1}} ` TIMES ` {W _{2}} over {A _{2}}]

A1, A2 : 각 표준액의 흡광도

W1, W2 : 각 표준액의 티오시안산칼륨 채취량 (mg)

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 5 법에서 묽은염산 (1 → 2) 대신에 염산을 써서 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 40 mg을 메탄올 2 mL에 녹인 다음 인산염완충액(pH 7.0)․메탄올혼합액(15 : 1)을 넣어 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신표준품 16 mg을 메탄올 2 mL에 녹이고 인산염완충액(pH 7.0)․메탄올혼합액(15 : 1)을 넣어 정확하게 10 mL로 하여 표준원액으로 한다. 에리트로마이신 B 및 에리트로마이신 C 5 mg 씩을 메탄올 2 mL에 녹인 다음 표준원액 2 mL를 정확하게 넣고 인산염완충액(pH 7.0)․메탄올혼합액(15 : 1)을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 100 μL씩을 정확하게 취하여 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정할 때 검액의 에리트로마이신 B 및 에리트로마이신 C의 피크면적은 표준액의 에리트로마이신 B 및 에리트로마이신 C의 피크면적보다 크지 않다. 또한 에리트로마이신, 에리트로마이신 B 및 에리트로마이신 C 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 에리트로마이신의 피크면적보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 215 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용구형스티렌-디비닐벤젠공중합체를 충전한다.

칼럼온도 : 70 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산수소이칼륨 3.5 g을 물에 녹여 100 mL로 하여 희석시킨 인산(1 → 10)으로 pH 9.0 으로 조정한다. 이 액 50 mL에 t-부틸알코올 190 mL 및 아세토니트릴 30 mL를 넣고 다시 물을 넣어 1 L로 한다.

유  량 : 에리트로마이신의 유지시간이 약 20 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 용매피크 다음부터 에리트로마이신의 유지시간의 약 4 배의 범위

시스템적합성

시스템의 성능 : N-데메틸에리트로마이신 2 mg을 표준액 10 mL에 녹인다. 이 액 100 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 N-데메틸에리트로마이신, 에리트로마이신 C, 에리트로마이신, 에리트로마이신 B의 순서로 유출하고, N-데메틸에리트로마이신과 에리트로마이신 C의 분리도는 0.8 이상, N-데메틸에리트로마이신과 에리트로마이신의 분리도는 5.5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 100 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 3 회 반복할 때 에리트로마이신의 피크면적의 상대표준편차는 3.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

발열성물질  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 1.0 mg을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 하고 검액의 양은 5.0 mL로 한다. 단, 시험주사량은 토끼의 체중 Kg 당 검액 1.0 mL로 한다.

수    분  10.0 % 이하 (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.2 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 및 에리트로마이신표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL를 넣어 녹이고 이동상으로 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 에리트로마이신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

에리트로마이신 (C37H67NO13)의 역가 (μg)

= 에리트로마이신표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 150 ∼ 300 mm인 스테인레스강관에 5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 메탄올․0.067 mol/L 인산이수소칼륨용액혼합액(3 : 2)

저 장 법  밀폐용기

에리트로마이신락토비온산염

Erythromycin Lactobionate

락토비온산에리스로마이신	C37H67NO1․C12H22O12 : 1092.22

이 약은 에리트로마이신의 락토비온산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 에리트로마이신 (C37H67NO13 : 733.93) 590 ∼ 700 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루이다.

이 약은 물, 메탄올 또는 무수에탄올에 잘 녹고 아세톤에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 3 mg에 아세톤 2 mL를 넣고 여기에 염산 2 mL를 넣을 때 액은 주황색을 나타내며 바로 적색 ∼ 짙은 자색으로 변한다.

2) 이 약 0.3 g에 암모니아시액 15 mL를 넣은 다음 클로로포름 15 mL를 넣어 흔들어 섞어 수층을 분리하여 취한다. 이 액을 클로로포름 15 mL로 3 회 씻은 다음 수욕에서 증발건고한다. 잔류물을 메탄올․물혼합액 (3 : 2) 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 따로 락토비온산 0.10 g을 메탄올․물혼합액 (3 : 2)에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박충크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 박층크로마토그래프용 실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 물․1-부탄올․아세트산무수물혼합액 (3 : 3 : 1)의 상층을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 묽은 황산을 고르게 뿌려 105 ℃에서 20 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점은 짙은 갈색을 띠고 표준액에서 얻은 주반점의 Rf 값과 같다

pH  이 약 0.5 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.5이다.

순도시험  중금속  이 약 0.5 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.5 mL를 넣는다 (50 ppm 이하).

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 에리트로마이신으로서 1 mg(역가) 당 1.0 EU 미만이다.

수    분  5.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  2.0 % 이하 (1 g). 단, 탄화시킨 잔류물에 질산 2 mL 및 황산 5 방울 넣어 적신다.

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(가)②㉯의 배지를 쓴다. 다만, pH는 7.8 ∼ 8.0으로 한다.

(2) 시험용균  Staphylococcus aureus ATCC 6538P를 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 메탄올 50 mL를 넣어 녹이고 여기에 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 20.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 에리트로마이신표준품 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 메탄올 50 mL를 넣어 녹이고 다시 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 정확하게 100 mL가 되게 하여 표준원액으로 한다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 7 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 20.0 및 5.0 μg (역가)이 함유하도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

주사용 에리트로마이신락토비온산염

Erythromycin Lactobionate for Injection

확인시험  1)  이 약 에리트로마이신락토비온산염 5 mg에 해당하는 양을 달아 황산 2 mL를 넣어 조용히 흔들어 섞을 때 액은 적갈색을 나타낸다.

2) ｢에리트로마이신락토비온산염｣의 확인시험 1)에 따라 시험한다.

순도시험  중금속  이 약 0.4 g를 취해 도가니에 넣어 황산을 넣어 적신 다음 탄화될 때 까지 낮은 온도에서 회화한다. 탄화물에 질산 2 mL와 황산 5방울을 넣고 흰 색 연기가 나지 않을 때까지 조심스럽게 강열한다. 탄소가 완전히 탈 때까지 500 ∼ 600 ℃에서 회화하고 식힌 다음 6 mol/L 염산 4 mL를 넣는다. 뚜껑을 덮지 않은 채 15 분간 증기욕에 둔 다음 증기욕상에서 천천히 증발건고한다. 잔류물을 염산 1 방울로 적시고 뜨거운 물 10 mL를 넣고 2 분간 가온한다. 액이 리트머스 종이에 알칼리반응을 나타날 때 까지 6 mol/L 암모니아수를 넣고 물을 넣어 25 mL로 한 다음 1 mol/L 아세트산으로 pH를 3.0 ∼ 4.0 으로 조정한다. 필요하면 여과하고 물 10 mL로 씻는다. 여액과 씻은 액을 50 mL 네슬러관에 넣고 물을 넣어 40 mL로 하여 검액으로 한다. 비교액에는 납표준액 2 mL를 넣고 물을 넣어 25 mL로 한다. 1 mol/L 아세트산 또는 6 mol/L 암모니아수로 pH를 3.0 ∼ 4.0 으로 조정하고 물을 넣어 40 mL로 한다. 검액과 비교액 각각에 아세트산염완충액, pH 3.5 2 mL를 넣고 티오아세타미드·글리세린염기성시액 1.2 mL 물을 넣어 50 mL로 한다. 2 분간 둔 다음 흰색의 배경을 써서 위에서 관찰할 때 검액의 용액의 색깔은 표준액 보다 진하지 않다.

엔도톡신  이 약 내용물을 물에 녹여 1 mL 당 에리트로마이신 50 mg을 함유하는 용액을 만든 후 희석하여 1 mL당 에리트로마이신 0.2 mg을 함유하는 용액을 만든다. 이 용액은 1 mL 당 0.07 EU 미만이다.

정 량 법  「에리트로마이신락토비온산염」의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 메탄올 50 mL를 넣어 녹이고 여기에 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 용액을 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 20.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 고농도검액 및 저농도검액으로 한다.

에리트로마이신스테아르산염

Erythromycin Stearate

스테아린산에리스로마이신	C55H103NO15 : 1018.40

이 약은 에리트로마이신의 스테아르산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 에리트로마이신 (C37H67NO13 : 733.93) 600 ∼ 720 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루이다.

이 약은 에탄올 또는 아세톤에 잘 녹고 메탄올에 녹으며 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 3 mg을 아세톤 2 mL에 녹이고 염산 2 mL를 넣을 때 액은 주황색을 띠며 바로 적색 ∼ 짙은 자색으로 변한다.

2) 이 약과 에리트로마이신스테아르산염표준품을 데시케이터(감압, 실리카겔)에서 24시간 건조하고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 6.0 ∼ 11.0이다.

순도시험  유연물질  이 약 0.165 g을 정밀하게 달아 100 mL 삼각플라스크에 넣고 메탄올 15 mL를 넣어 녹이고 pH 8.0 완충액 15 mL를 넣고 섞은 다음 0.2 μm 필터로 여과하여 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신표준품, 에리트로마이신 B, 에리트로마이신 C 및 N-데메틸에리트로마이신 각각 6 mg 씩을 정밀하게 달아 메탄올 15 mL에 녹인 다음 pH 8.0 완충액 15 mL를 넣어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 100 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 다음 식에 따라 에리트로마이신 A, 에리트로마이신 B, 에리트로마이신 C, 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 수도에리트로마이신 A 에놀에텔 이외의 가장 큰 개개 유연물질의 양과 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 수도에리트로마이신 A 에놀에텔을 구할 때 각각 3.0 % 이하이다. 다만 에리트로마이신 A 유지시간에 대한 수도에리트로마이신 A 에놀에텔의 상대유지시간은 약 1.5이고, 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 수도에리트로마이신 A 에놀에텔의 피크면적은 자동적분법에 따라 구한 면적에 각각 에리트로마이신 A에 대한 감도계수 0.09 및 0.15 를 곱한 값으로 한다.

[eqn: 유연물질의~양~(%)~=~30~ TIMES ~ {C~ TIMES ~P} over {W} ` TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

C : 표준액 중 에리트로마이신의 농도 (mg/mL)

P : 에리트로마이신표준품 중 에리트로마이신 A의 함량 (%)

W : 검체 채취량 (mg)

AT : 검액에서 얻은 에리트로마이신 A, 에리트로마이신 B, 에리트로마이신 C, 에리트로마이신 A 에놀에텔, 수도에리트로마이신 A 에놀에텔 이외의 가장 큰 개개 유연물질과 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 수도에리트로마이신 A 에놀에텔의 각 피크면적

AS : 표준액에서 얻은 에리트로마이신 A의 피크면적

◦ pH 8.0 완충액  인산수소이칼륨 2 g을 물에 녹여 100 mL로 하고 인산으로 pH를 8.0으로 조정한 액

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 215 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 ～ 10 μm의 액체크로마토그래프용 구형스티렌-디비닐벤젠공중합체를 충전한다.

칼럼온도 : 70 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 인산수소이칼륨 3.5 g을 물에 녹여 100 mL로 하여 희석시킨 인산(1 → 10)으로 pH 9.0 으로 조정한다. 이 액 50 mL에 물 400 mL, t-부틸알코올 175 mL 및 아세토니트릴 30 mL를 넣고 다시 물을 넣어 1 L로 한다.

유  량 : 2 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 100 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 N-데메틸에리트로마이신, 에리트로마이신 C, 에리트로마이신 A, 에리트로마이신 B 순으로 유출하고, N-데메틸에리트로마이신과 에리트로마이신 C의 분리도는 0.8 이상, N-데메틸에리트로마이신과 에리트로마이신 A의 분리도는 5.5 이상이다. 따로 에리트로마이신표준품 5 mg을 정밀하게 달아 메탄올 1 mL를 넣어 녹이고 pH 3.5 완충액 5 mL를 넣고 30 분간 방치한 액을 시스템적합성용액 (1)로 한다. 이 액 100 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 에리트로마이신 A 유지시간에 대한 에리트로마이신 A 에놀에텔의 상대유지시간은 약 4.3 ～ 4.7 이다.

◦ pH 3.5 완충액  pH 8.0 완충액 20 mL를 인산으로 pH 3.5로 조정한 액

시스템의 재현성 : 에리트로마이신표준품 약 40 mg을 정밀하게 달아 100 mL 삼각플라스크에 넣고 메탄올 5 mL를 넣어 녹인 다음 pH 8.0 완충액 5 mL를 넣어 시스템적합성용액 (2)로 한다. 이 액 100 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5회 반복할 때 에리트로마이신 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

수    분  5.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  2.0 % 이하 (1 g)

정 량 법  ｢에리트로마이신｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL를 넣어 녹이고 이동상으로 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다.

저 장 법  기밀용기

에리트로마이신스테아르산염 정

Erythromycin Stearate Tablets

확인시험  이 약을 가루로 하여 표시역가에 따라 약 100 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 클로로포름 50 mL를 넣어 잘 흔들어 섞은 다음 여과한 여액을 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신표준품 약 10 mg을 달아 클로로포름 5 mL에 녹여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 n-부탄올․아세트산․물혼합액(3 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 요오드증기를 쏘이거나 10 % 황산용액을 뿌려 반점을 확인할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

에리트로마이신에스톨산염

Erythromycin Estolate

C40H71NO14․C12H25OSO3H : 1056.39

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 에리트로마이신 (C37H67NO13 : 733.93) 600 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정성 가루 또는 가루이며 냄새는 없고 맛은 쓰다.

이 약은 메탄올 또는 에탄올에 조금 녹고 물 또는 벤젠에는 매우 녹기 어렵다.

확인시험  이 약 및 에리트로마이신에스톨산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 현탁시킨 액의 pH는 4.5 ∼ 7.0이다.

순도시험  유리에리트로마이신  이 약 0.250 g을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신 표준품 약 75.0 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험할 때 검액에서 얻은 피크면적은 표준액에서 얻은 주피크 면적보다 크지 않다 (6.0 % 이하).

◦ 완충액  인산이수소칼륨 3.4 g 및 트리에틸아민 2.75 mL를 물에 녹여 1000 mL로 한다.

조작조건

검 출 기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 195 nm)

칼    럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 250 mm인 스테인레스강관에 5 μm 액체크로마토그래프용옥틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 30 ℃ 부근의 일정 온도

이 동 상 : 아세토니트릴․완충액(35 : 65) 혼합액을 묽은 인산을 넣어 pH 3.0으로 조절한다.

유    량 : 1 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 및 검액 25 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 표준액의 에리트로마이신 및 검액의 첫 번째 주피크 유지시간은 약 5 분 및 약 10 분이다.

측정범위 : 표준액은 에리트로마이신 피크 유지시간의 약 2 배 범위, 검액은 에리트로마이신프로피오네이트의 첫 번째 피크 유지시간의 약 4.5 배 범위

수    분  4.0 % 이하 (0.2 g, 10 % 이미다졸을 포함하는 메탄올 20 mL, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  ｢에리트로마이신｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 적당량을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL를 넣어 녹이고 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 1.0 mg (역가)을 함유하도록 한 다음 이 용액을 60 ℃ 수욕에서 2 시간 가온하거나 또는 실온에서 16 ∼ 18 시간 방치하여 검액으로 한다.

저 장 법  기밀용기

에리트로마이신에틸숙시네이트

Erythromycin Ethylsuccinate

에칠호박산에리스로마이신	C43H75NO16 : 862.05

이 약은 에리트로마이신의 유도체이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 에리트로마이신 (C37H67NO13 : 733.93) 780 ∼900 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루이다.

이 약은 메탄올 또는 아세톤에 잘 녹고 에탄올에 녹으며 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 3 mg을 아세톤 2 mL에 녹이고 염산 2 mL를 넣을 때 액은 주황색을 띠며 바로 적색 ∼ 짙은 자색으로 변한다.

2)  이 약 및 에리트로마이신에틸숙시네이트표준품을 데시케이터(감압, 실리카겔)에서 24시간 건조시키고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 현탁시킨 액의 pH는 6.0 ∼ 8.5이다.

순도시험  1) 유리에리트로마이신  이 약 0.250 g을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신표준품 약 75.0 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 아세토니트릴을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험할 때 검액에서 얻은 피크면적은 표준액에서 얻은 주피크 면적보다 크지 않다 (6.0 % 이하).

조작조건

「에리트로마이신에스톨산염」의 순도시험 유리에스트로마이신의 조작조건에 따른다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 및 검액 25 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 표준액의 에리트로마이신 및 검액의 에리트로마이신에틸숙시네이트의 피크 유지시간은 약 8 분 및 약 24 분이다.

측정범위 : 표준액은 에리트로마이신 피크 유지시간의 약 2 배 범위, 검액은 에리트로마이신에틸숙시네이트의 피크 유지시간의 약 2 배 범위

2) 유연물질  이 약 약 0.115 g을 정밀하게 달아 50 mL 삼각플라스크에 넣고 메탄올 25 mL에 녹인 다음 가수분해시액 20mL를 넣고 섞은 다음 약 12 시간 실온에서 방치한 후 가수분해시액을 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 에리트로마이신 약 50 mg을 정밀하게 달아 메탄올 12.5 mL에 녹인 다음 가수분해시액을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 표준액 (1)로 한다. 따로 에리트로마이신 B, 에리트로마이신 C 각각 5 mg 씩을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL에 녹인 다음 표준액 (1) 2.5 mL를 넣고 가수분해시액을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 표준액 (2)로 한다. 검액 및 표준액 (2) 200 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 다음 식에 따라 에리트로마이신 A, 에리트로마이신 B, 에리트로마이신 C, 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 에리트로마이신 N-에틸숙시네이트 이외의 가장 큰 개개 유연물질과 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 에리트로마이신 N-에틸숙시네이트의 양을 구할 때 각각 3.0 % 이하이다. 다만 에리트로마이신 A 유지시간에 대한 에리트로마이신 N-에틸숙시네이트의 상대유지시간은 약 1.3이고 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 에리트로마이신 N-에틸숙시네이트의 피크면적은 자동적분법에 따라 구한 면적에 각각 에리트로마이신 A에 대한 감도계수 0.09 및 0.14 를 곱한 값으로 한다.

[eqn: 유연물질의~양~(%)~=~50~ TIMES ` {C~ TIMES `P} over {W} ` TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

C : 표준액 (2)중 에리트로마이신의 농도 (mg/mL)

P : 에리트로마이신표준품 중 에리트로마이신 A의 함량 (%)

W : 검체 채취량 (mg)

AT : 검액에서 얻은 에리트로마이신 A, 에리트로마이신 B, 에리트로마이신 C, 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 에리트로마이신 N-에틸숙시네이트 이외의 가장 큰 개개 유연물질과 에리트로마이신 A 에놀에텔 및 에리트로마이신 N-에틸숙시네이트의 각 피크면적

AS : 표준액 (2)에서 얻은 에리트로마이신 A의 피크면적

◦ 가수분해시액  인산수소이칼륨 2 g을 물에 녹여 100 mL로 하고 인산으로 pH를 8.0으로 조정한 액

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 215 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용 구형스티렌-디비닐벤젠공중합체를 충전한다.

칼럼온도 : 70 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : pH 8.0 완충액 50 mL에 물 400 mL, t-부틸알코올 175 mL 및 아세토니트릴 30 mL를 넣고 다시 물을 넣어 1 L로 한다.

유  량 : 2 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 (1) 200 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 N-데메틸에리트로마이신, 에리트로마이신 C, 에리트로마이신 A, 에리트로마이신 B 순으로 유출하고, N-데메틸에리트로마이신과 에리트로마이신 C의 분리도는 0.8 이상, N-데메틸에리트로마이신과 에리트로마이신 A의 분리도는 5.5 이상이다. 또한 시스템적합성용액 (2) 100 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 에리트로마이신 A 유지시간에 대한 에리트로마이신 A 에놀에텔의 상대유지시간은 약 4.3 ～ 4.7 이다.

◦ 시스템적합성용액 (1)  N-데메틸에리트로마이신 약 2 mg을 표준액 (2) 20 mL에 녹인다.

◦ 시스템적합성용액 (2)  에리트로마이신 약 10 mg을 메탄올 2 mL에 녹인 후 pH 3.5 완충액 10 mL를 넣고 30 분간 둔다. 사용하기 전 까지 냉장보관하고 만든 후 8 시간이 지나면 버린다.

◦ pH 8.0 완충액  인산수소이칼륨 2 g을 물에 녹여 100 mL로 하고 인산으로 pH를 8.0으로 조정한 액
◦ pH 3.5 완충액  pH 8.0 완충액 20 mL를 인산으로 pH 3.5로 조정한 액

시스템의 재현성 : 표준액 (1) 200 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5회 반복할 때 에리트로마이신 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

발열성물질  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 50 mg을 함유하는 수성현탁액을 만들어 검액으로 하고 검액 0.1 mL를 하지 (下肢)근육에 주사한다. 단, 시험주사량은 토끼의 체중 Kg 당 검액 1.0 mL로 한다.

수    분  5.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  1.0 % 이하 (1 g)

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(가)②㉯의 배지를 쓴다. 다만, pH는 7.8 ∼ 8.0으로 한다.

(2) 시험용균 Staphylococcus aureus ATCC 6538P를 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 메탄올 50 mL를 넣어 녹이고 여기에 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 20.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 에리트로마이신표준품 약 50 mg (역가)을 정밀하게 달아 메탄올 50 mL를 넣어 녹이고 다시 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준원액으로 한다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 7 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 20.0 및 5.0 μg (역가)을 함유하도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이 액들을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

에피루비신염산염

Epirubicin Hydrochloride

염산에피루비신	C27H29NO11․HCl : 579.98

이 약은 다우노루비신의 유도체의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 무수물 및 무용매물 1 mg에 대하여 에피루비신염산염 (C27H29NO11ㆍHCl) 970 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 연한 황색을 띤 적색 ∼ 갈색을 띤 적색의 가루이다.

이 약은 물 또는 메탄올에 녹고 에탄올에 녹기 어려우며 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다.

이 약은 흡습성이다.

확인시험  1)  이 약 및 에피루비신염산염표준품의 메탄올용액(3→200000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 에피루비신염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +310 ∼ +340° (무수물 및 무용매물 10 mg, 메탄올, 20 mL, 100 mm)

pH  이 약 10 mg을 물 2 mL에 녹인 액의 pH는 4.0 ∼ 5.5이다.

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (495 nm) : 200 ∼ 230 (무수물 및 무용매물 15 mg, 메탄올, 1000 mL)

순도시험  1) 용해상태  이 약 50 mg을 물 5 mL에 녹일 때 액은 어두운 적색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하)

3) 유연물질  이 약 50 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 내부표준액에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 검액 10 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험한다. 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하고 면적백분율법에 따라 에피루비신 및 2-나프탈렌설폰산 이외의 피크면적의 합을 구할 때 5.0 %이하이다.

내부표준액  2-나프탈렌설폰산나트륨의 물․아세토니트릴․메탄올․인산혼합액(540 : 290 : 170 : 1) 용액(1 → 2000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 6 μm의 액체크로마토그래프용트리메틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 35 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 라우릴황산나트륨 2 g을 달아 물․아세토니트릴․메탄올․인산혼합액(540 : 290 : 170 : 1)을 넣어 녹이고 1 L로 한다.

유  량 : 에피루비신의 유지시간이 약 9.5 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 용매피크 다음부터 에피루비신의 유지시간의 약 3 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 검액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 시스템적합성용액(1)로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 에피루비신의 피크면적은 시스템적합성용액(1)의 10 μL에서 얻은 에피루비신 피크면적의 7 ～ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 에피루비신염산염표준품 50 mg (역가)을 달아 내부표준액에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 시스템적합성용액(2)으로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 내부표준물질, 에피루비신의 순서로 유출되고 그 분리도는 20 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액(2) 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할때 내부표준물질의 피크면적에 대한 에피루비신 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

4) 잔류용매  이 약 약 0.3 g을 정밀하게 달아 내부표준액 0.6 mL를 정확하게 넣은 다음 디메틸포름아미드를 넣어 녹이고 6 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 메탄올 1 mL를 정확하게 취하고 디메틸포름아미드를 넣어 정확하게 25 mL로 하여 표준원액으로 한다. 아세톤 125 μL, 무수에탄올 30μL, 1-프로판올 32 μL 및 표준원액 17 μL를 각각 정확하게 취하여 내부표준액 10 mL를 정확하게 넣은 다음 디메틸포름아미드을 넣어 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 1 μL씩을 가지고 다음의 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 내부표준물질의 피크 면적에 대한 아세톤, 에탄올, 1-프로판올 및 메탄올의 피크면적의 비 QTa 및 QSa, QTb 및 QSb, QTc 및 QSc, QTd 및 QSd를 구한다. 다음 식으로 아세톤, 에탄올, 1-프로판올 및 메탄올의 양을 구할 때 각각 1.5 % 이하, 0.5 % 이하, 0.5 % 이하 및 0.1% 이하이다.

WT : 이 약의 채취량(mg)

내부표준액  1.4-디옥산의 디메틸포름아미드용액(1 → 100)

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼럼 : 안지름 0.53 mm, 길이 30 m의 퓨즈드실리카관의 내면에 기체크로마토그래프용 폴리에틸렌글리콜을 두께 1 μm로 피복한다.

칼럼온도 : 처음 11 분간 40 ℃로 유지하고, 그 다음 매 분 10 ℃씩 90 ℃까지 온도를 올리고 필요하면 다음에 매 분 50 ℃로 130 ℃까지 온도를 높인다. 그 다음 130 ℃를 30 분간 유지한다.

검체도입부온도 : 120 ℃ 부근의 일정 온도

검출기온도 : 150 ℃ 부근의 일정 온도

운반기체 : 헬륨

유량 : 내부표준물질의 유지시간이 약 8 분이 되도록 조정한다.

스플리트 비 : 1 : 15

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 1 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 아세톤, 메탄올, 에탄올, 1-프로탄올, 내부표준물질의 순서로 유출하고, 아세톤과 내부표준물질의 분리도는 30 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 1 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6회 반복할 때 아세톤, 메탄올, 에탄올 및 1-프로판올의 피크면적의 상대표준편차는 각각 4.0% 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 에피루비신으로서 1 mg(역가) 당 1.1 EU 미만이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 2.0 mg (역가)을 함유하는 수용액을 만들어 검액으로 하고 검액의 양은 0.5 mL로 한다.

수    분  8.0 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.5 % 이하 (0.1 g)

정 량 법  이 약 및 에피루비신염산염표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 내부표준액에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질 피크면적에 대한 에피루비신염산염의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

에피루비신염산염 (C27H29NO11·HCl)의 역가 (μg)

= 에피루비신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  2-나프탈렌설폰산나트륨의 물․아세토니트릴․메탄올․인산혼합액(540 : 290 : 170 : 1) 용액(1 → 2000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 6 μm의 액체크로마토그래프용트리메틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 35 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 라우릴황산나트륨 2 g을 달아 물․아세토니트릴․메탄올․인산혼합액(540 : 290 : 170 : 1)을 넣어 녹이고 1 L로 한다.

유  량 : 에피루비신염산염의 유지시간이 약 9.5 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 내부표준물질, 에피루비신의 순서로 유출되고 분리도는 20 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 시험을 5 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 에피루비신의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기(0 ∼ 5 ℃)

옥시테트라사이클린염산염

Oxytetracycline Hydrochloride

염산옥시테트라사이클린	C22H24N2O9․HCl : 496.89

이 약은 Steptomyces rimosus를 배양하여 얻은 항세균성을 가지는 테트라사이클린계 화합물의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 옥시테트라사이클린 (C22H24N2O9 : 460.44) 880 ∼945 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 황색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 무수에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  1) 이 약 및 옥시테트라사이클린염산염표준품의 0.1 mol/L 염산시액 용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2) 이 약 20 mg을 달아 물 3 mL를 넣어 녹이고 질산은시액 1 방울을 넣을 때 액은 혼탁된다.

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 2.0 ∼ 3.0이다.

흡광도비  이 약 및 옥시테트라사이클린표준품 약 50 mg씩을 정밀히 달아 각각 0.1 mol/L 염산시액을 넣어 녹여 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 10 mL씩을 정확하게 취하여 각각 0.1 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 0.1 mol/L 염산시액을 대조로 하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 353 nm에서 각각의 흡광도 AT 및 AS를 측정한다 (92.5 ± 4.3 %).

흡광도비(%)

m : 검체의 수분(%)

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -188 ∼ -200° (환산한 건조물로서 0.25 g, 0.1 mol/L 염산, 25 mL, 100 mm)

순도시험  1) 중금속  이 약 0.5 g을 달아 제 2법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.5 mL를 넣는다 (50 ppm 이하).

2) 유연물질  이 약 20 mg을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산시액에 녹여 정확하게 25 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 4-에피옥시테트라사이클린 20 mg을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산시액에 녹여 정확하게 25 mL로 하여 4-에피옥시테트라사이클린원액으로 한다. 또한 테트라사이클린염산염 20 mg을 0.01 mol/L 염산시액에 녹여 정확하게 25 mL로 하여 테트라사이클린염산염원액으로 한다. 다시 β-아포옥시테트라사이클린 8 mg을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL에 정확하게 녹이고 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 β-아포옥시테트라사이클린원액으로 한다. 4-에피옥시테트라사이클린원액 1 mL, 테트라사이클린염산염원액 4 mL 및 β-아포옥시테트라사이클린원액 40 mL를 각각 정확하게 취하고 0.01 mol/L 염산시액에 정확하게 200 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 검액의 4-에피옥시테트라사이클린 및 테트라사이클린의 피크면적은 표준액의 각각의 피크면적보다 크지 않으며, α-아포옥시테트라사이클린의 피크 및 β-아포옥시테트라사이클린의 피크와 그의 사이에 있는 피크면적의 합은 표준액의 β-아포옥시테트라사이클린의 피크면적보다 크지 않다. 또한 검액의 주피크 다음에 유출하는 2-아세틸-2-데카르복사미드옥시테트라사이클린의 피크면적은 표준액의 4-에피옥시테트라사이클린의 피크면적의 4 배보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm의 스테인레스강관에 8 μm의 액체크로마토그래프용스틸렌-디비닐벤젠공중합체를 충전한다

칼럼온도 : 60˚C 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 다음과 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.

이동상 A : 0.33 mol/L 인산이수소칼륨시액 60 mL, 황산수소테트라부틸암모늄용액(1→100) 100 mL, 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨이수화물용액(1 → 2500) 10 mL 및 물 200 mL를 섞고, 2 mol/L 수산화나트륨시액으로 pH를 7.5로 조정한다. 다시 t-부틸알코올 30 g을 넣고 물을 넣어 1000 mL로 한다.

이동상 B : 0.33 mol/L 인산이수소칼륨시액 60 mL, 황산수소테트라부틸암모늄용액(1 → 100) 50 mL, 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨이수화물(1 → 2500) 10 mL 및 물 200 mL를 섞고, 2 mol/L 수산화나트륨시액으로 pH를 7.5로 조정한다. 다시 t-부틸알코올 30 g을 넣고 물을 넣어 1000 mL로 한다.

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)
0 ～ 20 20 ～ 35	70 → 10 10 → 20	30 → 90 90 → 80

유  량 : 1.0 mL/분

측정범위 : 용매 피크 이후로부터 옥시테트라사이클린 유지시간의 약 3.5 배의   범위

시스템적합성

검출의 확인 : 4-에피옥시테트라사이클린원액 1 mL를 정확하게 취하고 0.05   mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 200 mL로 한다. 이 액 4 mL를 정확하게 취   하고 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 20 μL로부터 얻은 4-에피옥시테트라사이클린의 피크면적이 표준액의 4-에피옥시테트라사이클린의 피크면적의 14 ∼ 26 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : α-아포옥시테트라사이클린 8 mg을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL에 정확하게 녹이고 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 α-아포옥시테트라사이클린원액으로 한다. 검액 3 mL, 4-에티옥시테트라사이클린원액 2 mL, 테트라사이클린염산염원액 6 mL, β-아포옥시테트라사이클린원액 6 mL 및 α-아포옥시테트라사이클린원액 6 mL를 정확하게 취하고 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 4-에피옥시테트라사이클린, 옥시테트라사이클린, 테트라사이클린, α-아포옥시테트라사이클린, β-아포옥시테트라사이클린의 순서로 유출하고 4-에피옥시테트라사이클린과 옥시테트라사이클린, 옥시테트라사이클린과 테트라사이클린 및 α-아포옥시테트라사이클린과 β-아포옥시테트라사이클린의 분리도는 각각 4 이상, 5 이상 및 4 이상이며 옥시테트라사이클린의 대칭계수는 1.3이하 이다.

시스템의 재현성 : 4-에피옥시테트라사이클린원액 1 mL를 정확하게 취하고 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 200 mL로 한다. 이액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 4-에피옥시테트라사이클린의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

상대유지시간 : 옥시테트라사이클린에 대한 α-아포옥시테트라사이클린의 상대유지시간은 약 2.1 이다.

◦ 0.33 mol/L 인산이수소칼륨시액  인산이수소칼륨 4.491 g을 물을 넣어 녹여 1000 mL로 한다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 옥시테트라사이클린 1 mg (역가) 당 0.4 EU 미만이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 5.0 mg (역가)을 함유하는 수용액을 만들어 검액으로 하고 검액의 양은 0.6 mL로 한다.

건조감량  2.0 % 이하 (1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  0.5 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 약 50 mg (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 염산시액 25 mL를 넣어 녹인 다음 물을 넣어 정확하게 250 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 옥시테트라사이클린표준품 약 50 mg (역가)을 정밀히 달아 0.1 mol/L 염산시액 25 mL를 넣어 녹이고 물을 넣어 정확하게 250 mL로 하여 표준액으로 한다. 표준액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 7 일 이내에 쓴다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건에 따라 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 옥시테트라사이클린의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

옥시테트라사이클린 (C22H24N2O9)의 역가 (μg)

[eqn: =~옥시테트라사이클린표준품의~역가( mu g)` TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 250 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴화한실리카겔을 충전한다.

이동상 : t-부틸알코올 50 g을 물에 녹여 200 mL로 한 다음 pH 7.5인 인산염 완충액 60 mL와 t-부틸암모늄하이드로젠설페이트 50 mL 및 에데트산 시액 10 mL를 넣고 물을 넣어 1000 mL로 한다.

유  량 : 1.4 mL/분

저 장 법	차광한 기밀용기

옥시테트라사이클린염산염 캡슐

Oxytetracycline Hydrochloride Capsules

확인시험  이 약을 내용물을 가루로 하여 옥시테트라사이클린염산염 약 10 mg에 해당하는 양을 달아 물 20 mL를 넣어 녹이고 이 액 1 mL에 탄산나트륨용액(1 → 100) 1 mL를 넣고 다시 디아조벤젠설폰산시액 1 mL를 넣을 때 액은 등적색을 나타낸다.

옥시테트라사이클린염산염･폴리믹신 B황산염 안연고

Oxytetracycline Hydrochloride･Polymyxin B Sulfate Ophthalmic Ointment

확인시험  1) 옥시테트라사이클린  이 약의 옥시테트라사이클린염산염의 표시역가에 따라 25 mg (역가)에 해당하는 양을 달아 메탄올 2.0 mL를 넣고 20 분간 온침한 다음 여과하고 여액을 수욕에서 증발건고하여 그 잔류물을 가지고 물 20 mL를 넣어 녹이고 이 액 1 mL에 탄산나트륨용액(1 → 100) 1 mL를 넣고 다시 디아조벤젠설폰산시액 1 mL를 넣을 때 액은 등적색을 나타낸다.

2) 폴리믹신 B  가) 정량법 2)의 용액을 가지고 ｢폴리믹신 B황산염｣의 확인시험 1)에 따라 시험한다.

나) 정량법 2)의 용액을 가지고 닌히드린용액(1 → 1000) 0.5 mL 및 피리딘 2 방울을 넣고 1 분간 끓이면 액은 청색을 나타낸다.

이미페넴수화물

Imipenem Hydrate

C12H17N3O4S․H2O : 317.36

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 이미페넴 (C12H17N3O4S : 299.35) 980 ∼ 1010 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 유황색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 조금 녹고 무수에탄올 에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 이미페넴표준품의 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완충액(pH 7.0)용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 이미페넴표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +89 ∼ +94° (환산한 무수물로서 50 mg, 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완충액(pH 7.0), 10 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 200 mL에 녹인 액의 pH는 4.5 ∼ 7.0 이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 2.0 g을 도가니에 달아 질산 5 mL 및 황산 1 mL를 넣고 흰 연기가 날 때까지 주의하여 가열한다. 식힌 다음 질산 2 mL를 넣고 가열하고 이 조작을 한번 더 반복한다. 다시 과산화수소 2 mL를 넣어 가열하여 액이 무색 ～ 엷은 황색이 될 때까지 반복한다. 식힌 다음 다시 흰 연기가 날 때까지 가열한다. 식힌 다음 물을 넣어 5 mL로 한 액을 검액으로 하여 시험한다 (1 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 약 50 mg을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완층액(pH 7.0)에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완층액(pH 7.0)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 티에나마이신의 피크면적은 표준액의 이미페넴의 피크면적의 1.4 배 보다 크지 않고 검액의 이미페넴 및 티에나마이신 이외의 각각의 피크면적은 표준액에 이미페넴의 피크면적의 1/3 보다 크지 않다. 또한 검액의 이미페넴 및 티에나마이신 이외의 피크면적의 합은 표준액의 피크면적보다 크지 않다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 이미페넴의 유지시간의 약 2배의 범위

시스템적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

검출의 확인 : 표준액 5 mL를 정확하게 취하고 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완층액(pH 7.0)을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 10 μL로부터 얻은 이미페넴의 피크면적이 표준액의 이미페넴의 피크면적의 7 ∼ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 이미페넴의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

상대유지시간 : 이미페넴에 대한 티에나마이신의 상대유지시간은 약 0.8 이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 이미페넴 1 mg (역가) 당 0.25 EU 이하이다.

수    분  5.0 ∼ 8.0 % (20 mg, 전량적정법, 수분기화온도 140 ℃)

강열잔분  0.2 % 이하 (1 g)

정 량 법  이 약 및 이미페넴표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완충액(pH 7.0)에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 이미페넴의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다. 단, 시험은 검액 및 표준액을 만든 다음 30분 이내에 한다.

이미페넴 (C12H17N3O4S)의 역가 (μg)

= 이미페넴표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 280 nm)

칼  럼 : 안지름 약 3.9 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완충액(pH 7.0)․아세토니트   릴 혼합액(100 : 1)

유  량 : 이미페넴의 유지시간이 약 6분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 이 약 50 mg 및 레소르시놀 75 mg을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 3-(N-모르포리노)프로판설폰산완충액(pH 7.0) 50 mL에 정확하게 녹인다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 이미페넴, 레소르시놀의 순서로 유출하고, 분리도는 4 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 이미페넴의 피크면적의 상대표준편차는 0.80 % 이하이다.

저 장 법  밀봉용기

조사마이신프로피오네이트

Josamycin Propionate

프로피온산조사마이신	C45H73NO16 : 884.06

이 약은 조사마이신의 유도체이다. 이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 조사마이신 (C42H69NO15 : 827.99) 843 ∼ 1000 μg (역가)를 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 아세토니트릴에 썩 잘 녹고 메탄올 또는 무수에탄올 (99.5)에 잘 녹으며 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 조사마이신프로피오네이트표준품의 메탄올용액(1 → 100000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 조사마이신프로피오네이트표준품 5 mg 씩을 각각 희석시킨 아세토니트릴(1 → 2) 50 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험할 때 검액에서 얻은 조사마이신프로피오네이트의 피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 조사마이신프로피오네이트의 피크의 유지시간과 같다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 순도시험 2) 의 조작조건에 따른다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 3.0 mL를 넣는다 (30 ppm 이하).

2) 유연물질  이 약 50 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 검액 10 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 면적백분율법에 따라 그 양을 구할 때 개개 유연물질은 6 % 이하이고 총 유연물질의 양은 22 % 이하이다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 234 nm)

칼  럼 : 안지름 약 6 mm, 길이 약 15.0 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 트리에틸아민 10 mL에 물을 넣어 1 L로 하고 아세트산(100)을 넣어 pH를 4.3으로 맞춘다. 이 액 500 mL에 아세토니트릴 500 mL를 넣는다.

유  량 : 조사마이신프로피오네이트의 유지시간이 약 24 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 용매피크 다음부터 조사마이신프로피오네이트 유지시간의 약 3.5 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 검액 3 mL를 정확하게 취하여 이동상에 넣어 정확하게 50 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 2 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 조사마이신프로피오네이트의 피크면적은 시스템적합성용액에서 얻은 조사마이신프로피오네이트 피크면적의 8 ～ 12 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 조사마이신프로피오네이트 5 mg 및 조사마이신 2 mg을 이동상 50 mL에 녹인다. 이 액 10 μL를 가지고  위의 조건으로 시험할 때 조사마이신, 조사마이신프로피오네이트의 순서로 유출하고, 그 분리도는 25 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 조사마이신프로피오네이트 피크면적의 상대표준편차는 1.5 % 이하이다.

건조감량  1.0 % 이하 (1 g, 감압, 오산화인, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  0.1 % 이하 (1 g)

정 량 법  원통평판법  (1) 배지

포도당         1.0 g   육펩톤        6.0 g

카제인펩톤     4.0 g   효모엑스     3.0 g

육엑스         1.5 g   한천         15.0 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 멸균 후 pH는 7.9 ∼ 8.1이 되게 한다.

(2) 시험용균  Bacillus subtilis ATCC 6633을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 메탄올 10 mL를 넣어 녹이고 여기에 1/15 mol/L 인산염완충액(pH 5.6)을 넣어 mL 당 400 μg (역가)을 함유하는 용액을 만든 다음 이 용액 적당량을 정확하게 취하여 1/15 mol/L 인산염완충액(pH 5.6)으로 mL 당 80.0 및  20.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 고농도검  액 및 저농도검액으로 한다. 따로 조사마이신프로피오네이트표준품 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 메탄올 10 mL를 넣어 녹이고 여기에 1/15 mol/L 인산염완충액(pH 5.6)을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 1 mL 당 400 μg (역가)을 함유하도록 하여 표준원액을 만든다. 이 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 3 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 1/15 mol/L 인산염완충액(pH 5.6)으로 mL 당 80.0 및 20.0 μg (역가)이 함유하도록 희석하여고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

◦ 1/15 mol/L 인산염완충액(pH 5.6)  인산이수소칼륨 9.07 g을 달아 물 약 750 mL를 넣어 녹이고 수산화칼륨시액으로 pH를 5.6로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

저 장 법  차광한 기밀용기

카나마이신일황산염

Kanamycin Monosulfate

일황산카나마이신	C18H36N4O11․H2SO4 : 582.58

이 약은 Streptomyces kanamyceticus의 배양에 의하여 얻어지는 항세균활성을 가지는 아미노글리코사이드계 화합물의 황산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 카나마이신 (C18H36N4O11 : 484.50) 750 ∼ 832 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 무수에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 50 mg에 물 3 mL를 넣어 녹인 다음 안트론시액 6 mL를 넣으면 액은 청자색을 나타낸다.

2)  이 약 및 카나마이신일황산염표준품 20 mg씩을 각각 물 1 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름․강암모니아수․메탄올혼합액(2 : 1 : 1)의 상징액을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 0.2 % 닌히드린․물포화 1-부탄올시액을 고르게 뿌리고 100 ℃ 에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 반점은 자갈색을 띠고, 그들의 Rf 값은 같다.

3)  이 약의 수용액(1 → 5)에 염화바륨시액 한 방울을 넣을 때 백색의 침전이 생긴다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +112 ∼ +123° (환산한 건조물로서 0.2g, 물, 20 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 6.5 ∼ 8.5이다.

순도시험  1) 황산염함량  이 약 0.25 g을 정밀하게 달아 물 100 mL에 녹이고 강암모니아수로 pH를 11.0으로 조정한다. 이 액에 0.1 mol/L 염화바륨액 10 mL를 정확하게 넣고 0.1 mol/L 에틸렌디아민테트라아세트산디나트륨액으로 적정한다 (지시약 : 프탈레인퍼플, 0.5 mg). 다만, 액의 색이 변하기 시작할 때에 무수에탄올 50 mL를 넣고 적정의 종말점은 액의 청자색이 무색으로 변할 때로 한다. 같은 방법으로 공시험을 한다. 황산염(SO42-)의 양은 환산한 건조물로 이 약에 대하여 15.0 ～ 17.0 %이다.

0.1 mol/L 염화바륨시액 1 mL = 9.606 mg 황산염(SO42-)

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

3) 비소  이 약 2.0 g을 달아 제 4법에 따라 조작하여 시험한다 (1 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 0.30 g을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 카나마이신일황산염표준품 45 mg을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 1 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 인산이수소칼륨용액(3 → 40)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린의 l-부탄올용액(1 → 100)을 고르게 뿌리고 110 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 카나마이신 1 mg 당 0.50 EU 이하이다.

이상독성부정시험  이 약 2 mg을 주사용수 0.5 mL에 녹여 체중 17 ～ 24 g 의 건강한 마우스 5 마리에 각각 15 ～ 30 초간 정맥주사한다. 동물은 시험 전 적어도 5 일 동안 관찰하였을 때 이상이 없는 것을 사용한다. 투여 후 24 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물이 없다. 만약 1 마리가 죽은 경우에는 5 마리를 가지고 다시 시험하여 24 시간 동안 관찰할 때 죽는 동물이 없다.

건조감량  4.0 % 이하 (5 g, 감압 0.67 kPa이하, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  0.5 % 이하 (1 g)

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지  항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(2)(가)①㉮의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균  Bacillus subtilis ATCC 6633을 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 물에 녹이고 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 20.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 카나마이신일황산염표준품 적당량을 건조시킨 다음 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 희석시킨 인산염완충액(pH 6.0)(1 → 2)에 녹이고 정확하게 50 mL로 하여 표준원액으로 한다. 이 표준원액은 5 ∼ 15 ℃에서 저장하며 30 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.1 mol/L 인산염완충액(pH 8.0)으로 mL 당 20.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  밀폐용기

카나마이신황산염

Kanamycin Sulfate

황산카나마이신	C18H36N4O11․xH2SO4

이 약은 Streptomyces kanamyceticus의 배양에 의하여 얻어지는 항세균활성을 가지는 아미노글리코사이드계 화합물의 황산염이다. 이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 카나마이신 (C18H36N4O11 : 484.50) 690 ∼ 740 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 무수에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 카나마이신일황산염표준품 20 mg 씩을 물 1 mL에 녹이고 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름․강암모니아수․메탄올 혼합액(2 : 1 : 1)을 전개용매로하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 0.2 % 닌히드린․물포화 1-부탄올시액을 고르게 뿌린 다음 100 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 반점은 자갈색을 띠고 그들의 Rf 값은 같다.

2)  이 약의 수용액(1 → 10)은 황산염의 정성반응(1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +103 ∼ +115° (환산한 건조물로서 0.5 g, 물, 50 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 20 mL에 녹인 액의 pH는 6.0 ∼ 7.5이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.5 g을 물 5 mL에 녹일 때 액은 무색 ～엷은 황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 3.0 mL를 넣는다 (30 ppm 이하).

3) 비소  이 약 2.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (1 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 0.30 g을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 카나마이신일황산염표준품 9.0 mg을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 10 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 1 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 인산이수소칼륨용액(3 → 40)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린의 l-부탄올용액(1 → 100)을 고르게 뿌리고 110 ℃에서 10 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

발열성물질  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 mL 당 10 mg을 함유하는 수용액을 만들어 검액으로 한다. 단, 시험주사량은 토끼의 체중 Kg 당 검액 1.0 mL로 한다.

건조감량  5.0 % 이하 (0.5 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

정 량 법  원통평판법  ｢카나마이신일황산염｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 물에 녹여 정확하게 50 mL로 한다.

저 장 법  기밀용기

클래리트로마이신

Clarithromycin

C38H69NO13 : 747.95

이 약은 에리트로마이신의 유도체이다. 이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 클래리트로마이신 (C38H69NO13) 950 ∼ 1050 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정성 가루로 맛은 쓰다.

이 약은 아세톤 또는 클로로포름에 녹고 메탄올, 에탄올에 녹기 어렵고 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 5 mg에 황산 2 mL를 넣고 흔들어 섞을 때 액은 적갈색을 나타낸다.

2)  이 약 3 mg에 아세톤 2 mL를 넣고 다시 염산 2 mL를 넣으면 액은 주황색을 나타내고 즉시 적색 ∼ 짙은 자색으로 변한다.

3)  이 약 및 클래리트로마이신표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 측정할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

4)  이 약 및 클래리트로마이신표준품 10 mg씩을 클로로포름 4 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이 액들을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 클로로포름․메탄올․강암모니아수혼합액(100 : 5 : 1)을 전개용매로 하여 약 15 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 황산을 고르게 뿌린 다음 약 105 ℃ 에서 10 분간 가열할 때 검액 및 표준액에서 얻은 반점은 암자색을 띠고, 그 Rf 값은 같다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: rm[alpha]_D ^20] : -87 ∼ -97° (환산한 무수물로서 0.25 g, 클로로포름, 25 mL, 100 mm)

융    점  220 ∼ 227 ℃

pH  이 약 50 mg을 달아 메탄올을 넣어 녹여 20 mL로 한다. 이 액 10 mL를 취하여 물을 넣어 20 mL로 하여 한 액의 pH는 8.0 ∼ 10.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 0.1 g을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 20 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 클래리트로마이신표준품 약 10 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 20 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액 중 환산한 무수물로 이 약 중 개개의 유연물질은 각각 2.0 % 이하이고, 유연물질의 합계는 5.0 % 이하이다. 다만 0.05 % 미만의 피크는 제외한다.

[eqn: 환산한```무수물로서```이```약```중```각```유연물질의```양`(%)```=` {W _{S}} over {W _{T}} ` TIMES ` {A _{i}} over {A _{S}} `` TIMES `100]

[eqn: 환산한```무수물로서```이```약```중```유연물질의```합계`(%)```=` {W _S} over {W _T} ` TIMES ` {{SUM} A _i} over {A _S} `` TIMES `100]

Ws : 클래리트로마이신표준품의 취한 양(mg)

WT : 무수물로 환산한 이 약의 취한 양(mg)

As : 표준액 중 클래리트로마이신의 피크면적

Ai : 검액 중 각각 유연물질의 피크면적

∑Ai : 검액 중 클래리트로마이신 이외의 피크면적 합계

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 검액을 주입한 다음 2 분부터 주피크 유지시간의 약 5 배 범위

시스템 적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성을 따른다.

검출의 확인 : 표준액 2 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 10 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 10 μL에서 얻은 클래리트로마이신 피크면적은 표준액의 클래리트로마이신 피크면적의 14 ～ 26 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 6 회 반복 조작할 때 클래리트로마이신 피크면적의 상대표준편차는 3.0 % 이하이다.

수    분  2.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

강열잔분  0.1 % 이하 (2.0 g)

정 량 법  이 약 및 클래리트로마이신표준품 약 0.1 g (역가)씩을 정밀히 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 20 mL로 한다. 이들 액 2 mL씩을 정확하게 취하여 각각 내부표준액 2 mL를 넣은 다음 이동상을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 클래리트로마이신의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

클래리트로마이신 (C38H69NO13)의 역가 (μg)

= 클래리트로마이신표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  파라옥시벤조산부틸의 이동상용액 (1 → 20000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 150 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 50 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 희석시킨 0.2 mol/L 인산이수소칼륨시액(1 → 3)․아세토니트릴혼합액(13 : 7)

유  량 : 클래리트로마이신의 유지시간이 약 8 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조작조건에 따라 시험할 때 클래리트로마이신, 내부표준물질의 순서로 유출되고 분리도는 3.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조작조건에 따라 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 클래리트로마이신의 피크면적비의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

저 장 법  밀폐용기

클로람페니콜

Chloramphenicol

C11H12Cl2N2O5 : 323.13

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 클로람페니콜 (C11H12Cl2N2O5) 980 ∼ 1020 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 메탄올 또는 무수에탄올 에 잘 녹고 물에는 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 클로람페니콜표준품의 정량법에서 얻어지는 검액 및 표준액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 클로람페니콜표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: rm[alpha]_D ^20] : +18.5 ∼ +21.5° (1.25 g, 무수에탄올, 25 mL, 100 mm)

융    점  150 ∼ 155 ℃

pH  이 약의 포화용액의 pH는 4.5 ∼ 7.5 이다

흡 광 도  [eqn: E_1cm ^1%] (278 nm) : 289 ∼ 307 (20 mg, 물, 1000 mL)

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.5 mL를 넣는다 (25 ppm 이하).

2) 비소  이 약 2.0 g을 달아 제 4법에 따라 조작하여 시험한다 (1 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 0.10 g을 달아 메탄올 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액(1)로 한다. 표준액(1) 10 mL를 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 표준액(2)로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액, 표준액(1) 및 표준액(2) 20 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔(형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적하고 클로로포름․메탄올․아세트산무수물 혼합액(79 : 14 : 7)을 전개용매로 하여 약 15 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 자외선(주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 주반점 및 원점의 반점 이외의 반점은 표준액(1)로부터 얻은 반점보다 진하지 않다. 또한 검액에서 얻은 주반점 및 원점의 반점 이외의 반점의 합계는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 클로람페니콜 1 mg (역가) 당 0.2 EU 미만이다.

건조감량  0.5 % 이하 (1 g, 105 ℃, 3시간).

강열잔분  0.1 % 이하 (1 g).

정 량 법  이 약 및 클로람페니콜표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 클로람페니콜의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

클로람페니콜 (C11H12Cl2N2O5)의 역가 (μg)

= 클로람페니콜표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 280 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 250 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 물․메탄올․아세트산혼합액(550 : 450 : 1)

유  량 : 1.5 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조작조건으로 시험할 때 주 피크의 이론단수는 1800 이상이고 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조작조건으로 시험을 6 회 반복할 때 주 피크의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법	기밀용기

클로람페니콜 점안액

Chloramphenicol Ophthalmic Solution

확인시험  1)  이 약 클로람페니콜 10 mg에 해당하는 양을 달아 50 % 에탄올 1 mL에 녹이고 염화칼슘용액(1 → 100) 3 mL 및 아연가루 50 mg을 넣고 10 분간 수욕에서 가열한다. 상징액을 시험관에 따르고 아세트산나트륨무수물 0.1 g 및 염화벤조일 2 방울을 넣은 다음 1 분간 흔들어 섞고 염화철(Ⅲ)시액 10 방울을 넣으면 (이때 액이 투명하지 않으면 묽은염산을 넣는다.) 자색 ～ 적자색을 나타낸다. 아연가루를 넣지 않고 위와 같이 시험할 때는 무색이다.

2)  정량법의 검액에서 얻은 주피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간과 같다.

클로람페니콜 캡슐

Chloramphenicol Capsules

확인시험  1)  이 약 내용물을 가지고 클로람페니콜 10 mg에 해당하는 양을 달아 50 % 에탄올 1 mL에 녹이고 염화칼슘용액(1 → 100) 3 mL 및 아연가루 50 mg을 넣고 10 분간 수욕에서 가열한다. 상징액을 시험관에 따르고 아세트산나트륨무수물 0.1 g 및 염화벤조일 2 방울을 넣은 다음 1 분간 흔들어 섞고 염화철(Ⅲ)시액 10 방울을 넣으면 (이때 액이 투명하지 않으면 묽은염산을 넣는다.) 자색 ～ 적자색을 나타낸다. 아연가루를 넣지 않고 위와 같이 시험할 때는 무색이다.

2)  정량법의 검액에서 얻은 주피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간과 같다.

클로람페니콜숙시네이트나트륨

Chloramphenicol Sodium Succinate

호박산클로람페니콜나트륨	C15H15Cl2N2NaO8 : 445.18

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 클로람페니콜 (C11H12Cl2N2O5 : 323.13) 711 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고, 메탄올 또는 무수에탄올에 잘 녹는다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  1)  이 약 및 클로람페니콜숙시네이트나트륨표준품의 수용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 클로람페니콜숙시네이트나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 액은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: rm[alpha]_D ^20] : +5 ∼ +8° (환산한 무수물로서 1.25 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.4 g을 물 5 mL에 녹인 액의 pH는 6.0 ∼ 7.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색 ∼ 황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 1법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유리클로람페니콜  이 약 약 33 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 50 mL로 하고 공경 0.5 μm의 필터로 여과하여 검액으로 한다. 클로람페니콜표준품 약 0.6 mg를 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 100 mL로 하고 공경 0.5 μm의 필터로 여과하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 각 액의 클로람페니콜의 피크면적 AT 및 AS 을 측정한다. (2.0 % 이하)

유리클로람페니콜(C11H12Cl2N2O5)의 양 (%) [eqn: =~5000` TIMES ` {C} over {W TIMES Q} ` TIMES {A _{T}} over {A _{S}}]

C : 표준액 중의 클로람페니콜의 농도 (μg/mL)

Q : 검액에서 클로람페니콜숙시네이트나트륨의 mg 중 클로람페니콜의 양(μg)

W : 검체 채취량 (mg)

AT : 검액에서 얻은 클로람페니콜 피크면적

As : 표준액에서 얻은 클로람페니콜 피크면적

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 275 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 10 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.05 mol/L 인산이수소암모늄용액(10 % 인산으로 pH 2.5 ± 0.1 조정한 것)·메탄올혼합액(60 : 40).

유  량 : 1 mL/분

시스템적합성

컬럼의 성능 : 검액을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 두 개의 주피크 클로람페니콜-1-숙시네이트 와 클로람페니콜-3-숙시네이트의 이론단수는 1750 이상이고 분리도은 2.0 이상이며 대칭계수는 1.2 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 두 개의 주피크 클로람페니콜-1-숙시네이트 와 클로람페니콜-3-숙시네이트 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 클로람페니콜 1 mg 당 0.2 EU 미만이다.

수    분  2.0 % 이하 (1.0 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 약 20 mg (역가)을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 1000 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 클로람페니콜숙시네이트표준품 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 물 50 mL를 정확하게 넣어 현탁한다. 액을 섞으면서 0.01 mol/L 수산화나트륨시액 7 mL를 서서히 넣고 pH 7.0이 되게 한다. 이 액에 물을 넣어 정확하게 1000 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 276 nm에서의 흡광도 AT 및 AS를 측정한다.

클로람페니콜(C11H12Cl2N2O5)의 역가 (μg)

= 클로람페니콜숙시네이트표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

저 장 법  밀봉용기

주사용 클로람페니콜숙시네이트나트륨

Chloramphenicol Sodium Succinate for Injection

확인시험  1)  이 약 클로람페니콜숙시네이트나트륨 약 50 mg에 해당하는 양에 피리딘 5 mL 및 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL를 넣고 흔들어 섞은 다음 수욕에서 수 분간 가열하면 피리딘층은 짙은 적색으로 변한다.

2)  이 약 클로람페니콜숙시네이트나트륨 약 0.1 g에 해당하는 양에 레소르신 0.2 g 및 황산 0.2 mL를 넣고 짙은 적색의 용액이 될 때까지 가열하고 이 용액을 과량의 물에 서서히 넣으면 녹색의 형광을 나타내는 주황색용액이 된다.

3)  이 약 클로람페니콜숙시네이트나트륨표준품의 수용액(1 → 50000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 271 ～ 281 nm에서 흡수극대를 나타낸다.

순도시험  유리클로람페니콜  이 약 약 1 g에 해당하는 양을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 1 mL을 정확히 취해서 이동상에 녹여 정확하게 200 mL로 하여 이를 공경 0.5 μm의 필터로 여과하여 검액으로 한다. 클로람페니콜표준품 약 0.6 mg를 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 100 mL로 하고 공경 0.5 μm의 필터로 여과하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 각 액의 클로람페니콜의 피크면적 AT 및 AS 을 측정한다. (2.0 % 이하)

유리클로람페니콜(C11H12Cl2N2O5)의 양 (%) [eqn: =0.1` TIMES ` {C} over {D} ` TIMES {A _{T}} over {A _{S}}]

C : 표준액 중의 클로람페니콜의 농도 (μg/mL)

D : 검액 중의 클로람페니콜의 농도 (mg/mL)

AT : 검액에서 얻은 클로람페니콜 피크면적

As : 표준액에서 얻은 클로람페니콜 피크면적

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 275 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 10 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.05 mol/L 인산이수소암모늄용액(10 % 인산으로 pH 2.5 ± 0.1 조정한 것)·메탄올혼합액(60 : 40).

유  량 : 1 mL/분

시스템적합성

컬럼의 성능 : 검액을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 두 개의 주피크 클로람페니콜-1-숙시네이트 와 클로람페니콜-3-숙시네이트의 이론단수는 1750 이상이고 분리도은 2.0 이상이며 대칭계수는 1.2 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 두 개의 주피크 클로람페니콜-1-숙시네이트 와 클로람페니콜-3-숙시네이트 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

정 량 법  ｢클로람페니콜숙시네이트나트륨｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약을 표시역가에 따라 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 물에 녹여 정확하게 1000 mL로 하여 검액으로 한다.

클로람페니콜팔미테이트

Chloramphenicol Palmitate

팔미틴산클로람페니콜	C27H42Cl2N2O6 : 561.54

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 클로람페니콜 (C11H12Cl2N2O5 : 323.13) 558 ∼ 587 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 회백색의 결정성 가루이다.

이 약은 아세톤에 잘 녹고 메탄올 또는 무수에탄올에 조금 녹으며 물에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 클로람페니콜팔미테이트표준품의 무수에탄올용액(1 → 33000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 클로람페니콜팔미테이트표준품 5 mg씩을 아세톤 1 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔(형광제 첨가)을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 아세톤․시클로헥산 혼합액(1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 자외선(주파장 254 nm)을 쪼일 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: rm[alpha]_D ^25] : +21 ∼ +25° [환산한 건조물로서 1 g,무수에탄올 (99.5), 20 mL, 100 mm]

융    점  91 ∼ 96 ℃

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 50 mg을 정밀하게 달아 메탄올에 녹여 50 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 만든 후 30 분 이내에 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 클로람페니콜팔미테이트 피크 이외의 피크면적의 합은 표준액의 클로람페니콜팔미테이트 피크면적의 3.5 배 보다 크지 않다. 다만 클로람페니콜팔미테이트에 대한 상대유지시간 약 0.5 및 약 5.0의 클로람페니콜 및 클로람페니콜디팔미테이트의 피크면적은 자동적분법으로 구한 면적에 각각 감도계수 0.5 및 1.4 를 곱한 것으로 한다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 270 nm)

칼  럼 : 안지름 약 6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 20 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 메탄올

유 량 : 클로람페니콜팔미테이트의 유지시간이 약 5 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 클로람페니콜팔미테이트의 유지시간의 약 6 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 이 약 50 mg을 메탄올에 녹여 50 mL로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하고 메탄올을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 메탄올을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 클로람페니콜팔미테이트 피크면적은 시스템적합성용액의 클로람페니콜팔미테이트 피크면적의 7 ～ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 클로람페니콜팔미테이트의 피크의 이론단수는 5000 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 클로람페니콜팔미테이트의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

4) 유리클로람페니콜  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 자일렌에 열을 가해 녹여 정확하게 80 mL한다. 이 용액을 식힌 뒤 여액을 물 15 mL으로 세 번 추출하여 크실렌을 제거한다. 추출액에 물을 넣어 정확하게 50 mL로 희석한다. 이 용액에 톨루엔 10 mL을 정확하게 넣어 섞은 다음 다시 수층을 추출한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 측정할 때 파장 278 nm에서의 흡광도 A는 0.268 이하이다. (450 ppm 이하).

유리클로람페니콜(ppm) = A [eqn: TIMES ` {10000} over {5.96}]

건조감량  1.0 % 이하 (1 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3시간)

정 량 법  이 약 및 클로람페니콜팔미테이트표준품 약 37 mg (역가)을 정밀히 달아 각각을 메탄올 40 mL 및 아세트산무수물 1 mL에 녹이고 다시 메탄올을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 10 mL씩을 정확하게 취하고 각각에 이동상을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 정확하게 취하여 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 클로람페니콜팔미테이트의 피크면적 AT 및 AS 을 측정한다.

클로람페니콜(C11H12Cl2N2O5)의 역가 (μg)

= 클로람페니콜표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 280 ㎚)

칼  럼 : 안지름 약 3.9 mm, 길이 약 30 cm의 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40˚C 부근의 일정온도

이동상 : 메탄올․물․아세트산무수물 혼합액(172 : 27 : 1)

유  량 : 클로람페니콜팔미테이트의 유지시간이 약 7분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 클로람페니콜팔미테이트의 피크의 이론단수는 2400 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 클로람페니콜팔미테이트의 피크면적의 상대 표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  차광한 기밀용기

클록사실린나트륨수화물

Cloxacillin Sodium Hydrate

C19H17ClN3NaO5S․H2O : 475.88

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 클록사실린 (C19H18ClN3O5S : 435.88) 900 ∼ 960 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 밝은 황백색의 결정 또는 결정성 가루이다.

이 약은 물, 디메틸포름아미드 또는 메탄올에 잘 녹고 에탄올에 조금 녹는다.

확인시험  1)  이 약 및 클록사실린나트륨표준품의 메탄올 용액 (1 → 2500)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 클록사실린나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: rm[alpha]_D ^20] : +163 ∼ +171° (환산한 무수물로서 1 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.5이다.

순도시험 1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색 ～ 밝은  황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 5 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 50 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 50 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 클록사실린 피크 이외의 개개 피크면적은 표준액의 클록사실린 피크면적 보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 230 nm)

칼  럼 : 안지름 약 6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산수소이암모늄 4.953 g을 물 700 mL에 녹이고 아세토니트릴 250 mL를 넣는다. 이 액에 인산을 넣어 pH를 4.0으로 조정한 다음 물을 넣어 정확하게 1 L로 한다.

유  량 : 클록사실린의 유지시간이 약 24 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 클록사실린의 유지시간 약 3 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 표준액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 클록사실린 피크면적이 표준액의 클록사실린 피크면적의 7 ～ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 클록사실린나트륨표준품 약 50 mg을 정확하게 달아 이동상 적당량에 녹이고 구아이페네신의 이동상용액(1 → 200) 5 mL를 넣고 다시 이동상을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 구아이페네신, 클록사실린의 순서로 유출하고 그 분리도는 25 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 6 회 반복할 때 구아이페네신 피크면적에 대한 클록사실린 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

5) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐 - 50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 클록사실린 1 mg 당 0.20 EU 이하이다.

수    분  3.0 ∼ 4.5 % (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 클록사실린나트륨표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀히 달아 각각 물을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL를 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 클록사실린나트륨의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

클록사실린 (C19H17ClN3NaO5S)의 역가 (μg)

= 클록사실린나트륨표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 220 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 인산이수소칼륨 2.72 g을 물에 녹여 1000 mL로 한 후 8 mol/L 수산화칼륨용액으로 pH를 5.0으로 조절한 액 1000 mL 및 아세토니트릴 500 mL를 혼합한 액

유  량 : 1.0 mL/분

저 장 법  기밀용기

클록사실린나트륨 캡슐

Cloxacillin Sodium Capsules

확인시험  1)  이 약 내용물을 가지고 클록사실린나트륨 2 mg에 해당하는 양을 시험관에 넣고 크로모트로프산 2 mg 및 황산 2 mL를 넣고 150 ℃에서 가열하면 1 ～ 1.5 분 후에 올리브 녹색이 되고 2 분 후에는 짙은 홍색으로 변하여 탄화하면서 점차적으로 어두운 흑색이 된다.

2)  정량법의 검액에서 얻은 주피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간과 같다.

클린다마이신염산염

Clindamycin Hydrochloride

염산클린다마이신	C18H33ClN2O5S․HCl : 461.44

이 약은 린코마이신의 유도체의 염산염이다. 이 약은 정량할 때 1 mg에 대하여 클린다마이신 (C18H33ClN2O5S : 424.98) 838 ∼ 940 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 회백색의 결정 또는 결정성 가루이다

이 약은 물 또는 메탄올에 잘 녹고 에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  이 약 0.1 g에 물 5 mL를 넣어 녹이고 수산화나트륨시액 2 mL를 넣어 잘 흔들어 섞을 때 액은 뿌옇게 된다. 여기에 펜타시아노니트로실철(Ⅲ)산나트륨시액 0.3 mL를 넣어 다시 흔들어 섞고 60 ∼ 65 ℃에서 10분간 방치한 다음 묽은 염산 2 mL를 넣어 흔들어 섞을 때 액은 청록색을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{25}] : +135 ∼ +150° (환산한 무수물로서 0.5 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.0 ∼ 5.5이다.

순도시험  유연물질  이 약 0.125 g을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 25 mL로 하여 검액으로 한다. 린코마이신염산염표준품 50 mg 및 클린다마이신염산염표준품 100 mg을 각각 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 린코마이신의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 식 (1)에 따라 린코마이신의 양을 구한다. 또 식 (2)에 따라 7-에피클린다마이신, 클린다마이신 B 및 기타 유연물질의 양을 구할 때 7-에피클린다마이신의 양은 4.0 % 이하, 클린다마이신 B의 양은 2.0 % 이하, 기타 유연물질의 양은 1.0 % 이하이며, 린코마이신을 포함하는 총 유연물질의 양은 6.0 % 이하이다.

린코마이신 (C18H34N2O6S)의 양 (%) [eqn: =~2.5` TIMES ` {C _{L} ` TIMES P _{L}} over {W} ` TIMES {A _{T}} over {A _{S}}]  (1)

CL : 표준액 중의 린코마이신염산염의 농도 (mg/mL)

PL : 린코마이신염산염표준품의 린코마이신(C18H34N2O6S) 역가(μg/mg)

W : 검체 채취량 (mg)

AT : 검액에서 얻은 린코마이신 피크면적

As : 표준액에서 얻은 린코마이신 피크면적

[eqn: 유연물질의~양~(%)~=~2.5~ TIMES ` {C~ TIMES ~P} over {W} ` TIMES {A _{i}} over {A _{C}}]  (2)

C : 표준액 중 클린다마이신염산염의 농도 (mg/mL)

P : 클린다마이신염산염표준품의 클린다마이신 (C18H33ClN2O5S) 역가

(μg/mg)

W : 검체 채취량 (mg)

Ai : 검액에서 얻은 각 유연물질의 피크면적

AC : 표준액에서 얻은 클린다마이신의 피크면적

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 5 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 인산이수소칼륨 6.8 g을 물 1 L에 녹이고 8 mol/L 수산화칼륨용액으로 pH를 7.5로 조정한 액․아세토니트릴 혼합액(550 : 450)

유  량 : 1.0 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 클린다마이신에 대한 린코마이신, 클린다마이신 B, 7-에피클린다마이신의 상대유지시간은 각각 0.4, 0.65 및 0.9 이다.

측정범위 : 클린다마이신의 유지시간의 약 6 배 범위

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

발열성물질  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 녹이고 mL 당 5.0 mg을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 단, 시험주사량은 토끼의 체중 Kg 당 검액 1.0 mL로 한다.

수    분  6.0 % 이하 (0.3 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 클린다마이신염산염표준품 약 20 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 이동상에 정확하게 녹여 20 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 클린다마이신염산염의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

클린다마이신 (C18H33ClN2O5S)의 역가 (μg)

=클린다마이신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 8 mol/L 수산화칼륨용액으로 pH를 7.5로 조정한 0.05 mol/L 인산이수소칼륨․아세토니트릴혼합액(550 : 450)

유  량 : 클린다마이신의 유지시간이 약 10분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 클린다마이신의 피크의 이론단수는 6000 이상이며 분리도는 1.5 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 클린다마이신의 피크면적의 상대 표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

클린다마이신염산염 캡슐

Clindamycin Hydrochloride Capsules

이 약은 정량할 때 표시량의 93.0 ∼ 107.0 %에 해당하는 클린다마이신 (C18H33ClN2O5S : 424.98)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢클린다마이신염산염｣을 가지고 캡슐제의 제법에 따라 만든다.

확인시험  이 약의 내용물을 꺼내어 표시량에 따라 클린다마이신염산염 10 mg(역가)에 해당하는 양을 달아 메탄올 2 mL를 넣어 잘 흔들어 섞은 다음 원심분리하고 상징액을 검액으로 한다. 따로 클린다마이신염산염표준품 10 mg을 메탄올 2 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박충크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 10 μL 씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 메탄올․톨루엔․강암모니아수 혼합액(140 : 60 : 3)을 전개용매로 하여 약 12 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 L-타르타르산용액(1 → 5) 500 mL에 차질산비스무트시액 50 mL을 넣은 액을 고르게 뿌릴 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

용출시험  이 약 1 캡슐을 취하여 시험액으로 물 900 mL를 써서 제 2 법에 따라 매분 50 회전으로 시험한다. 용출시험 시작 30 분 후에 용출액 20 mL 이상을 취하여 공경 0.45 μm이하의 멤브레인필터로 여과한다. 처음 여액 10 mL는 버리고 다음 여액 V mL를 정확하게 취하여 표시량에 따라 1 mL 중 클린다마이신염산염  (C18H33ClN2O5S) 약 83 μg (역가)을 함유하도록 물을 넣어 정확하게 V' mL로 하여 검액으로 한다. 따로 클린다마이신염산염표준품 약 17 mg (역가)을 정밀히 달아 물을 넣어 녹여 정확하게 200 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 클린다마이신의 피크면적 AT 및 AS을 측정한다. 이 약의 30 분간의 용출률이 80 % 이상일 때 적합하다.

클린다마이신염산염 (C18H33ClN2O5S)의 표시량에 대한 용출률 (%)

= 클린다마이신염산염표준품의 역가(mg) [eqn: ~times~{A_{T}}over{A_{S}}~times~{V~'}over{V~}~times~{1}over{C}~times~{450}]

C : 1 캡슐 중 클린다마이신염산염 (C18H33ClN2O5S)의 표시량 [mg (역가)]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm인 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 0.05 mol/L 인신이수소칼륨시액을 8 mol/L 수산화칼륨시액으로 pH 7.5로 조정한 액․아세토니트릴혼합액(550 : 450)

유  량 : 클린다마이신의 유지시간이 약 7분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 :  표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험할 때 이론단수는 3000 이상이고 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 실험을 6 회 반복할 때 클린다마이신염산염의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

제제균일성시험  다음과 같은 방법으로 함량균일성시험을 할 때 적합하다. 이 약 1 개를 취하여 이동상을 넣어 30분간 흔들어 섞은 다음 이 약의 표시량에 따라 1 mL 중에 클린다마이신염산염 0.75 mg (역가)을 함유하는 액이 되도록 이동상을 넣어 정확하게 V mL로 한다. 이 액을 원심분리하고 상징액을 검액으로 한다. 따로 클린다마이신염산염표준품 약 75 mg (역가)을 정밀히 달아 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이하 정량법에 따라 시험한다.

클린다마이신 (C18H33ClN2O5S)의 역가 (μg)

=  클린다마이신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}} TIMES {V} over {100}]

수    분  7.0 % 이하 (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 20 캡슐 이상을 가지고 그 내용물의 질량을 정밀히 단다. 표시역가에 따라 약 클린다마이신으로서 75 mg (역가)을 정밀히 달아 이동상을 넣어 30분간 흔들어 섞은 후 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 클린다마이신염산염표준품 약 75 mg (역가)을 정밀히 달아 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 클린다마이신염산염의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

클린다마이신 (C18H33ClN2O5S)의 역가 (μg)

=  클린다마이신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 250 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 8 mol/L 수산화칼륨용액으로 pH를 7.5로 조정한 0.05 mol/L 인산이수소칼륨․아세토니트릴혼합액(550 : 450)

유량 : 클린다마이신의 유지시간이 약 7분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 클린다마이신의 피크의 이론단수는 3000 이상이며 분리도는 2.0 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 클린다마이신의 피크면적의 상대 표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

클린다마이신포스페이트

Clindamycin Phosphate

이 약은 클린다마이신의 유도체이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 클린다마이신 (C18H33ClN2O5S : 424.98) 800 ∼ 846 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 메탄올에 조금 녹으며 에탄올(95)에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  이 약 및 클린다마이신포스페이트표준품을 100 ℃ 에서 2시간 건조하여 적외부스펙트럼측정법의 페이스트법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +115 ∼ +130° (환산한 무수물로서 0.25 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.10 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.5 ∼ 4.5이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 새로 끓여 식힌 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 1.0 mL를 넣는다 (5 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g를 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 0.1 g을 정밀하게 달아 이동상 100 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액의 클린다마이신포스페이트에 대한 상대유지시간이 약 1.8 인 클린다마이신의 피크면적은 표준액의 클린다마이신포스페이트의 피크면적의 1/2 보다 크지 않다. 또 검액 중 클린다마이신포스페이트 이외 피크면적의 합은 표준액의 클린다마이신포스페이트 피크면적의 4 배보다 크지 않다.

◦ 내부표준액  파라옥시벤조산메틸의 이동상용액(3 → 50000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소칼륨 10.54 g을 물 775 mL에 녹이고 인산을 넣어 pH를 2.5 으로 조정한 다음 아세토니트릴 225 mL를 넣어 정확하게 1000 mL로 한다.

유  량 : 클린다마이신포스페이트의 유지시간이 약 8 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 용매피크 다음부터 클린다마이신포스페이트의 유지시간 약 2 배 범위

시스템 적합성

검출의 확인 : 표준액 1.0 mL를 정확하게 취하여 이동상을 넣어 정확하게 10 mL로 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 클린다마이신포스페이트의 피크면적은 표준액의 클린다마이신포스페이트 피크면적의 7 ～ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 클린다마이신포스페이트표준품 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 내부표준액 25 mL에 녹이고 이동상으로 정확하게 100 mL로 하여 시스템적합성용액으로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 클린다마이신포스페이트, 내부표준물질의 순서로 유출하고 그 분리도는 4 이상이다.

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 6 회 반복 조작할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 클린다마이신포스페이트 피크면적비의 상대표준편차는 2.5 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 클린다마이신포스페이트 1 mg (역가) 당 0.58 EU 이하이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 녹여 mL 당 5 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다.

수    분  6.0 % 이하 (0.5 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 클린다마이신포스페이트표준품 약 20 mg(역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 각각에 내부표준액 25 mL를 정확하게 넣고 녹인 다음 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 클린다마이신포스페이트의 피크면적의 비 QT 및 QS를 구한다.

클린다마이신 (C18H33ClN2O5S)의 역가 (μg)

=  클린다마이신염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액 : 파라옥시벤조산메틸의 이동상용액(3 → 50000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 210 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 25 cm의 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥틸실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산이수소칼륨 10.54 g을 물 775 mL에 녹여 인산을 넣어 pH을 2.5로 조정한다. 이 액에 아세토니트릴 225 mL를 넣는다.

유  량 : 클린다마이신포스페이트의 유지시간이 약 8분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 클린다마이신포스페이트, 내부표준물질 순서로 유출하고 그 분리도는 4 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 클린다마이신포스페이트의 피크면적이 비의 상대표준편차는 2.5 % 이하이다..

저 장 법  기밀용기

테트라사이클린염산염

Tetracycline Hydrochloride

염산테트라사이클린	C22H24N2O8․HCl : 480.90

이 약은 Streptomyces aureofaciens의 배양에 의하여 얻어지는 항세균활성을 가지는 테트라사이클린계 화합물의 염산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 테트라사이클린염산염 (C22H24N2O8ㆍHCl) 950 ∼ 1010 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 황색 ∼ 엷은 갈황색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 에탄올에 조금 녹는다.

확인시험  1)  이 약 및 테트라사이클린염산염표준품의 용액(1 → 62500)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 테트라사이클린염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럽측정법의 염화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 약의 수용액(1 → 100)은 염화물의 정성반응 2)를 나타낸다.

pH  이 약 1.0 g을 물 100 mL에 녹인 액의 pH는 1.8 ∼ 2.8이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납표준액 1.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 25 mg을 정밀하게 달아 0.01 mol/L 염산시액 50 mL에 정화하게 녹여 검액으로 한다. 이 액 3 mL를 정확하게 취하여 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 정확하게 취하여 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정할 때 검액의 테트라사이클린 이외의 각각의 피크면적은 표준액의 테트라사이클린의 피크면적보다 크지 않다. 또한 검액의 테트라사이클린 이외의 각각의 피크면적의 합은 표준액의 테트라사이클린의 피크면적의 3 배보다 크지 않다.

조작조건

검출기, 칼럼, 칼럼온도, 이동상 및 유량은 정량법의 조작조건에 따른다.

측정범위 : 용매 피크의 이후로부터 테트라사이클린의 유지시간의 약 7 배 범위

시스템적합성

시스템의 성능은 정량법의 시스템적합성에 따른다.

검출의 확인 : 표준액 3 mL를 정확하게 취하여 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 20 μL로부터 얻은 테트라사이클린의 피크면적이 표준액의 테트라사이클린의 피크면적의 약 1 ∼ 5 %가 되는 것을 확인한다..

시스템의 재현성 : 시스템적합성용액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 테트라사이클린의 피크면적의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 테트라사이클린염산염 1 mg (역가) 당 0.5 EU 미만이다.

히스타민  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염주사액으로 mL 당 5.0 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액으로 하고 검액의 양은 0.6 mL로 한다.

건조감량  2.0 % 이하 (1.0 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  0.3 % 이하 (1.0 g)

정 량 법  이 약 및 테트라사이클린염산염표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀히 달아 이동상 A를 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 각각 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 테트라사이클린염산염의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

테트라사이클린염산염 (C22H24N2O8․HCl)의 역가 (μg)

= 테트라사이클린염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 280 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥틸실실릴화한실리카겔을 충전한다.

이동상 : 이동상 A․이동상 B 혼합액(950 : 50)을 3 mol/L 수산화암모늄 및 인산으로 pH 7.6 ～ 7.7로 조정한다.

이동상 A - 0.1 mol/L 암모늄옥살레이트․디메칠포름아미드혼합액 (680 : 270)

이동상 B - 0.2 mol/L 인산일수소암모늄

유  량 : 2.0 mL/분

저 장 법  차광한 기밀용기

테트라사이클린염산염 연고

Tetracycline Hydrochloride Ointment

정 량 법  ｢테트라사이클린염산염｣의 정량법에 따라 시험한다. 다만, 이 약의 표시역가에 따라 약 30 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 분액깔때기에 넣고 에테르 50 mL를 넣어 세게 흔들어 섞고 0.01 mol/L 염산시액 20 mL, 10 mL, 10 mL씩으로 3 회 추출하여 모든 추출액을 합하고 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 용액 적당량을 정확하게 취하여 이동상으로 표준액과 같은 농도로 희석하여 검액으로 한다.

테트라사이클린염산염 캡슐

Tetracycline Hydrochloride Capsules

확인시험  1)  이 약 내용물을 가지고 테트라사이클린 2 ～ 3 mg에 해당하는 양을 달아 황산 2 mL를 넣을 때 액은 적자색을 나타낸다.

2)  정량법의 검액에서 얻은 주피크의 유지시간은 표준액에서 얻은 주피크의 유지시간과 같다.

토브라마이신

Tobramycin

C18H37N5O9 : 467.51

이 약은 Streptomyces tenebrarius을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 아미노글리코사이드계 화합물이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 토브라마이신 (C18H37N5O9) 900 ∼ 1060 μg (역가)를 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황백색의 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 포름아미드에 잘 녹으며, 메탄올에 녹기 어렵고, 에탄올에 매우 녹기 어렵다.

이 약은 흡습성이 있다.

확인시험  1)  이 약 및 토브라마이신표준품 10 mg씩을 물 1 mL에 녹여 검액 및 표준액으로 한다. 이 액들을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 4 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 암모니아시액․1-부탄올․메탄올혼합액(5 : 5 : 2)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말린다. 여기에 닌히드린시액을 고르게 뿌린 다음 100 ℃에서 5 분간 가열할 때 검액에서 얻은 주반점 및 표준액에서 얻은 반점의 Rf 값은 같다.

2)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 125)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨을 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ5.1 ppm 부근에 이중선의 시그날 A를, δ2.6 ∼ 4.0 ppm 부근에 다중선의 시그날 B를, δ1.0 ∼ 2.1 ppm 부근에 다중선의 시그날 C를 보이며 각 시그날의 면적강도비 A : B : C는 1 : 8 : 2이다.

비선광도  [eqn: rm [ alpha ] _{D} ^{20}] : ＋138 ∼ ＋148° (환산한 무수물로서 1 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.10 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 9.5 ∼ 11.5 이다

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색 ∼ 미황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액으로 납표준액 3.0 mL를 넣는다 (30 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 80 mg을 달아 희석시킨 강암모니아수(1 → 250) 10 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 희석시킨 강암모니아수(1 → 250)을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액 및 표준액 5 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 다음에 강암모니아수․에탄올․2-부탄온 혼합액(1 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 10 cm 전개한 다음 박층판을 바람에 말리고 다시 110 ℃에서 10분간 건조한다. 곧바로 여기에 물․차아염소산나트륨시액 혼합액(4 : 1)을 뿌린 다음 바람에 말리고 다시 요오드화칼륨전분시액을 뿌릴 때 검액에서 얻은 주반점 이외의 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 진하지 않다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 토브라마이신 1 mg (역가) 당 2.0 EU 미만이다.

수    분  11.0 % 이하 (0.1 g, 용량적정법, 직접적정) 단, 수분측정용메탄올 대신에 수분측정용포름아미드․수분측정용메탄올 혼합액(3 : 1)을 사용한다.

강열잔분  1.0 % 이하 (0.5 g)

정 량 법  이 약 및 토브라마이신표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀히 달아 각각 물을 넣어 녹여 정확하게 250 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 4.0 mL씩을 정확하게 취하여 각각 50 mL 용량 플라스크에 넣고 2,4-디니트로플루오르벤젠시액 10 mL와 트리스히드록시메틸아미노메탄시액 10 mL를 넣어 흔들어 섞고 60 ± 2 ℃ 수욕에서 50 ± 5 분간 방치한 다음 실온에서 10 분간 방치한다. 아세토니트릴 약 20 mL를 넣고 실온으로 식힌 다음 아세토니트릴로 정확하게 50 mL로 하고 공경 0.5 μm 이하의 멤브레인 필터로 여과한 액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 토브라마이신의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

토브라마이신(C18H37N5O9)의 역가 (μg)

[eqn: =~토브라마이신표준품의~역가~( mu g)` TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 365 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 250 mm인 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 트리스히드록시메틸아미노메탄 2.0 g을 물 800 mL에 녹인다. 이 액에 0.5 mol/L 황산용액 20 mL를 넣고 아세토니트릴을 넣어 정확하게 2 L로 한다.

유  량 : 1.2 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : p-나프톨벤제인 5 mg을 정밀히 달아 아세토니트릴로 정확하게 100 mL로 한 액을 분리도측정액으로 하고, 분리도측정액과 표준액을 섞어서 주입할 때 토브라마이신에 대한 p-나프톨벤제인의 상대유지시간은 약 0.6이며, 두 피크 사이의 분리도는 4.0 이상이다.

저 장 법	기밀용기

토브라마이신 안연고

Tobramycin Ophthalmic Ointment

확인시험  ｢토브라마이신｣의 확인시험 1)에 따라 시험한다. 다만, 이 약 적당량을 달아 분액깔때기에 넣고 클로로포름 10 mL를 넣어 녹인 다음 물을 넣어 흔들어 섞고 두 액층이 완전히 분리될 때까지 방치한 다음 물층을 취하여 물로 희석하여 1 mL 중 3 mg (역가)이 함유되도록 하여 검액으로 한다. 따로 토브라마이신표준품 적당량을 달아 물을 넣어 녹여 1 mL 중 3 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액의 점적량은 5 μL로 한다.

토브라마이신 점안액

Tobramycin Ophthalmic Solution

확인시험  ｢토브라마이신｣의 확인시험 1)에 따라 시험한다. 다만, 이 약 및 토브라마이신표준품 적당량 씩을 달아 각각 물을 넣어 1 mL 중 3 mg (역가)을 함유하는 용액을 만들어 검액 및 표준액으로 한다.

티카실린나트륨

Ticarcillin Disodium

C15H14N2Na2O6S2 : 428.40

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 티카실린 (C15H16N2O6S2 : 384.43) 800 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 엷은 황백색의 가루이며 특이한 냄새가 있다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 메탄올에 잘 녹으며 에탄올에 조금 녹고 에테르에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 티카실린나트륨표준품 약 40 mg 씩을 각각 정밀히 달아 물에 녹여 정확하게 100 mL로 하고 이들 액 5 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 염산메탄올시액으로 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 0.1 mol/L 염산메탄올시액을 대조로 하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 200 ∼ 300 nm에서 흡수스펙트럼을 측정할 때 파장 230 nm 부근에서 흡수극대를 나타내며 각 파장의 흡수스펙트럼은 표준품과 같다.

2)  이 약의 수용액(1 → 20)은 나트륨의 정성반응을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{25}] : +172 ∼ +187° (환산한 무수물로서 1 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.1 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 6.0 ∼ 8.0이다.

순도시험  1) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀하게 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐 - 50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

2) 티카실린함량  이 약 및 티카실린나트륨표준품 약 40 mg 씩을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 용액 5.0 mL를 정확하게 취하여 0.1 mol/L 염산메탄올시액을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험하여 공시험액을 대조로 파장 230 nm에서 흡광도 AT 및 AS를 측정한다 (무수물로 환산할 때 80.0 ∼ 94.0 %).

티카실린의 함량

=티카실린나트륨표준품중 티카실린의 농도 (%)

◦ 0.1 mol/L 염산메탄올시액  염산 0.8 mL에 메탄올을 넣어 100 mL로 한다.

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 티카실린 1 mg (역가) 당 0.05 EU 미만이다.

수    분  6.0 % 이하 (0.2 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 및 티카실린나트륨표준품 약 50 mg (역가)씩을 정밀하게 달아 인산염완충액(pH 6.4)에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL 씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

티카실린 (C15H16N2O6S2)의 역가 (μg)

=  티카실린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {A _{T}} over {A _{S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 220 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 30 cm인 스테인레스강관에 3 ∼ 10 μm의 액체크로마토그래프용 옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 인산염완충액(pH 4.3)․아세토니트릴혼합액(95 : 5)

유  량 : 2 mL/분

시스템적합성

시스템의 성능 : 분리도시험용액을 가지고 위의 조건으로 조작할 때 클라불란산, 티카실린의 상대유지시간은 각각 약 0.2, 1.0 이고 분리도는 5.0 이상, 이론단수는 1000 이상, 대칭계수는 2.0 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액을 가지고 위의 조건으로 시험을 5 회 반복할 때 티카실린 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

◦ 인산염완충액 (pH 6.4)  인산이수소나트륨 6.9 g을 물 900 mL에 녹이고 10 mol/L 수산화나트륨으로 pH를 6.4 ± 0.1로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

◦ 인산염완충액 (pH 4.3)  인산이수소나트륨 13.8 g을 물 900 mL에 녹이고 10 mol/L 수산화나트륨으로 pH를 4.3 ± 0.1로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

◦ 분리도시험용액  티카실린나트륨표준품 약 25 mg (역가)을 정밀히 달아 1 mL 당 0.15 mg을 함유하는 클라불란산표준품의 인산염완충액(pH 6.4)용액 5 mL을 넣은 후 인산염완충액(pH 6.4)을 넣어 정확하게 25 mL로 한다.

저 장 법  기밀용기 (2 - 8 ℃)

페니실린 G 나트륨

Penicillin G Sodium

벤질페니실린나트륨	C16H17N2NaO4S : 356.37

이 약은 Penicillium 속을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 페니실린계 화합물의 나트륨염이다. 이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 페니실린 G (C16H18N2O4S : 334.39) 1500 ～1750 단위 (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정 또는 결정성 가루이며 냄새는 없든가 또는 약간 특이한 냄새가 있다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 아세톤에는 녹기 어렵다.

이 약은 ｢생리식염 주사액｣, ｢포도당 주사액｣에 썩 잘 녹는다.

확인시험  1)  이 약 및 페니실린 G 나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

pH  이 약 0.6 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.5이다.

열안정성  ｢페니실린 G 칼륨｣의 열안정성시험에 따라 시험한다 (손실역가 10 % 이하).

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 페니실린 G로서 100 단위 (역가) 당 0.01 EU 이하이다.

건조감량  1.5 % 이하 (0.1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

페니실린 G 나트륨 함량 (질량비율로서)  ｢페니실린 G 칼륨｣의 페니실린 G 칼륨 함량시험에 따라 시험한다 (85.0 % 이상). 다만, 계산은 다음과 같이 한다.

페니실린 G 나트륨 함량 (%)

[eqn: =` {N-에틸피페리딘페니실린``침전의`질량(mg) TIMES 159.3} over {이`약의`채취량(mg)}]

정 량 법  이 약의 표시역가에 따라 약 10 mg (역가)을 정밀히 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 페니실린 G 나트륨표준품 약 10 mg을 정밀히 달아 이동상에 녹여 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 페니실린 G 나트륨의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

페니실린 G 나트륨 (C16H17N2NaO4S) 의 양 (단위)

= 페니실린 G 나트륨표준품의 역가(단위)[eqn: ~times~{{A_T}}over{A_S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 220 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 150 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.01 mol/L 인산이수소칼륨용액․메탄올혼합액(3 : 2)

유  량 : 1.0 mL/분

저 장 법  기밀용기

페니실린 G 칼륨

Penicillin G Potassium

벤질페니실린칼륨                                      C16H17N2KO4S : 372.48

이 약은 Penicillium 속을 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 페니실린계 화합물의 칼륨염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg (역가)에 대하여 페니실린 G (C16H18N2O4S : 334.39) 1430 ∼ 1630 단위 (역가)를 함유한다. 그 1 단위는 페니실린 G 칼륨 0.57 μg에 대응한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정 또는 결정성 가루이다. 이 약은 물에 썩 잘 녹고 무수에탄올에 녹기 어렵다.

확인시험  1)  이 약 및 페니실린 G 칼륨표준품의 수용액(1 → 1000)을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 흡수스펙트럼을 측정할 때 같은 파장에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 및 페니실린 G 칼륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

3)  이 액은 칼륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

결 정 성  시험할 때 적합하다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +270 ∼ +300° (환산한 건조물로서 1 g, 물, 50 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 100 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.5이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색 ～ 밝은  황색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다. 다만 자제도가니를 써서 질산마그네슘육수화물․에탄올용액 (1 → 10) 10 mL를 넣은 다음 강과산화수소수 1 mL를 넣고 에탄올에 점화하여 연소한다 (2 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 40 mg을 정밀하게 달아 물을 넣어 정확하게 20 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법에 따라 측정할 때 검액 중 페니실린 G 이외의 각각의 피크면적은 표준액 중 페니실린 G의 피크면적보다 크지 않다. 또한 검액 중 페니실린 G 이외 피크면적의 합은 표준액 중 페니실린 G 의 피크면적의 3 배 보다 크지 않다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 25 cm인 스테인레스강관에 7 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 인산수소이암모늄액(33 → 5000)․아세토니트릴혼합액(19 : 6)에 인산을 넣어 pH를 8.0으로 조정한다.

유  량 : 페니실린 G 의 유지시간이 약 7.5 분이 되도록 조정한다.

측정범위 : 페니실린 G 의 유지시간 약 5 배 범위

시스템적합성

검출의 확인 : 표준액 10 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 20 μL에서 얻은 페니실린의 피크면적은 표준액 중 페니실린 피크면적의 7 ～ 13 %가 되는 것을 확인한다.

시스템의 성능 : 이 약 40 mg을 물 20 mL에 녹인다. 따로 파라옥시벤조산메틸 10 mg을 아세토니트릴 20 mL에 녹인다. 이 액 1 mL에 물을 넣어 20 mL로 한다. 이들 액 1 mL씩을 각각 취하여 물을 넣어 100 mL로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건에 따라 조작할 때 페니실린 G, 파라옥시벤조산메틸 순으로 유출되고 그 분리도는 8 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 5 회 반복할 때 페니실린 G 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

열안정성  정량 결과에 따라 이 약 약 50000 단위 (역가)를 정밀히 달아 (A 단위) 100 ± 1 ℃에서 96 시간 (4 일 간) 저장한 다음 다시 정량을 실시하여 그 역가를(B 단위) 측정한다 (손실역가 10 % 이하).

손실역가 비율

[eqn: = {A`단위`-`B`단위} over {A`단위} TIMES 100]

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 이 약은 페니실린 G로서 100 단위 (역가)당 0.01 EU 이하이다.

건조감량  1.0 % 이하 (3 g, 0.67 kPa 이하, 60 ℃, 3 시간)

페니실린 G 칼륨 함량 (질량비율로서)  이 약 60 ∼ 70 mg을 정밀히 달아 마개달린 원심분리관에 넣어 물 2.0 mL를 넣어 녹이고 0 ∼ 5 ℃로 식힌다. 이것에 0 ∼ 8 ℃로 식힌 페니실린용 아세트산아밀시액 2.0 mL와 희석시킨 인산(1 → 5) 0.5 mL를 넣어 마개를 꼭 막고 약 15 초 간 세게 흔들어 섞은 다음 약 20 초 간 원심 분리하여 두 액층으로 나눈다. 적당한 주사침이 달린 2.0 mL 주사기로 될 수 있는 대로 아세트산아밀층 (약 1.7 ∼ 1.8 mL) 전부를 뽑아낸 다음 황산나트륨무수물 0.1 g을 넣은 유리여과기 (직경 약 10 mm)에 넣어 그 둘레를 얼음으로 냉각시킨 작은 시험관에 흡인여과한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 미리 페니실린용 N-에틸피페리딘시액 0.5 mL와 페니실린용 아세톤시액 1.0 mL를 각각 넣어 미리 질량을 단 약 15 × 15 mm의 밑이 편평한 시험관에 넣는다. 이 때 검액을 산성으로 한 다음 여액을 넣을 때까지의 조작은 3 분 이내에 하여야 한다. 위의 시험관을 마개가 있는 칭량병에 넣어 마개를 하고 0 ∼ 8 ℃에서 2 시간 이상 방치한다. 침전은 미리 질량을 단 유리여과기 (G4, 직경 약 10 mm)에 주의하여 흡인여과하고 그 위에 주사기로 전체량 1 mL의 0 ∼ 8 ℃의 페니실린용 아세톤시액으로 씻는다. 먼저의 시험관에 유리여과기를 넣어 실온에서 감압하여 1 시간 말린 다음 질량을 단다 (85.0 % 이상).

페니실린 G 칼륨 함량 (%)

정 량 법	이 약의 표시역가에 따라 약 10 mg (역가)을 정밀하게 달아 이동상을 넣어 녹여 정확하게 100 mL로 하여 검액으로 한다. 따로 페니실린 G 칼륨표준품 약 10 mg을 정밀하게 달아 이동상에 녹여 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액 및 표준액 중의 페니실린 G 칼륨의 피크면적 AT 및 AS를 측정한다.

페니실린 G 칼륨 (C16H17N2KO4S) 의 양 (단위)

= 페니실린 G 칼륨표준품의 역가(단위)[eqn: ~times~{{A_T}}over{A_S}}]

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 220 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

이동상 : 0.01 mol/L 인산이수소칼륨용액․메탄올혼합액(3 : 2)

유  량 : 1.0 mL/분

저 장 법  기밀용기

포스포마이신나트륨

Fosfomycin Sodium

C3H5Na2O4P : 182.02

이 약은 Streptomyces fradiae의 배양 또는 합성으로 얻은 항세균활성을 가지는 화합물의 나트륨염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 포스포마이신 (C3H7O4P : 138.06) 725 ∼ 770 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 결정성 가루이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 메탄올에 조금 녹으며 무수에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 포스포마이신나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럽측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 300)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸프로판설폰산나트륨을 내부표준물질로 하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ1.5 ppm 부근에 이중선의 시그날을 보이고, δ2.8 ppm 부근에 2배의 이중선의 시그날을 보이고, δ3.3 ppm 부근에 다중선의 시그날을 보이며 δ1.3 ppm 부근에 시그날은 보이지 않는다.

3) 이 약의 수용액(1 → 500)은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -3.5 ∼ -5.5° (환산한 무수물로서, 0.5 g, 물, 10 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.70 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 8.5 ∼ 10.5이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g을 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색이며 맑다.

2) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 1 법에 따라 시험한다. 비교액은 납표준액 2.0 mL을 넣는다 (20 ppm 이하).

3) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 포스포마이신 1 mg (역가) 당 0.125 EU 이하이다.

수    분  3.0 % 이하 (0.2g, 용량적정법, 직접적정).

인 함 량  이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 과요오드산나트륨용액(107 → 10000) 40 mL 및 과염소산 2 mL를 정확하게 넣어 수욕에서 1 시간 가열한다. 식힌 다음 물을 넣어 정확하게 200 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 요오드화칼륨시액 1 mL를 정확하게 넣는다. 이 액이 무색이 될 때까지 티오황산나트륨시액을 넣고 다시 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액원액으로 한다. 따로 인산이수소칼륨 약 70 mg을 정밀히 달아 검액원액과 같은 방법으로 조작하여 표준원액으로 한다. 다시 이 약을 취하지 않고 검액원액과 같은 방법으로 조작하여 공시험원액으로 한다. 검액원액, 표준원액 및 공시험원액을 5 mL씩 정확하게 취하여 각각 25 mL 용량플라스크에 넣고 몰리브덴산암모늄ㆍ황산시액 2.5 mL 및 1-아미노-2-나프톨-4-설폰산시액 1 mL를 넣어 흔들어 섞은 다음 물을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 검액, 표준액 및 공시험액으로 한다. 이 액들을 20 ± 1 ℃로 30 분간 방치한 다음 각각의 액을 가지고 물을 대조로하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 740 nm에서 흡광도 AT, AS 및 AB을 측정한다 (16.2 ∼ 17.9 %).

인의 양(mg)

W : 인산이수소칼륨의 채취량 (mg)

0.22760 : 인산이수소칼륨 중의 인의 비율

정 량 법	원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지

펩톤     5.0 g	효모엑스     2.0 g

육엑스   3.0 g	한천         15 g

이상을 달아 정제수를 넣어 1000 mL로 하고 멸균 후의 pH가 6.5 ∼ 6.6이 되도록 한다.

(2) 시험용균  Proteus sp MB 838을 시험용균으로 한다.

(3) 시험용균액  시험용균을 사면으로 한 시험균이식용한천배지에 접종하여 37 ℃에서 40 ∼ 48 시간 배양하고 적어도 3 회 계대배양한다. 이 균을 배양병에 넣고 시험균이식용한천배지 300 mL의 표면에 접종하여 37 ℃에서 40 ∼ 48 시간 배양한 다음 이 균액을 물 30 mL에 부유시킨다. 이 액을 물로 10 배 희석하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 560 nm에서 투과율이 17 %가 되도록 조정한다. 이 균액은 10 ℃ 이하에서 저장하며 7 일 이내에 쓴다. 이 균액 1 ∼ 2 mL를 미리 녹여 48 ℃로 유지된 종층용한천배지 100 mL에 넣어 흔들어 섞어 시험용균액으로 한다.

(4) 이 약 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)을 넣어 10.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 포스포마이신페네틸암모늄표준품 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 표준원액으로 한다. 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 7 일 이내에 쓴다. 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)으로 희석하여 mL 당 10.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 하여 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  밀봉용기

포스포마이신칼슘수화물

Fosfomycin Calcium Hydrate

C3H5CaO4P․H2O : 194.14

이 약은 Streptomyces fradiae의 배양 또는 합성하여 얻은 항세균 활성을 가지는 화합물의 칼슘염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 포스포마이신 (C3H7O4P : 138.06) 725 ∼ 805 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 결정성 가루이다.

이 약은 물에 녹기 어렵고 메탄올, 무수에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 포스포마이신칼슘표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨측정법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약의 핵자기공명스펙트럼측정용 중수용액(1 → 300)을 가지고 핵자기공명스펙트럼측정용 3-트리메틸프로판설폰산나트륨을 내부표준물질로하여 핵자기공명스펙트럼측정법에 따라 1H를 측정할 때 δ1.5 ppm 부근에 이중선의 시그날을 보이고 δ2.9 ppm 부근에 2배의 이중선 시그날을 보이고, δ3.3 ppm 부근에 다중선의 시그날을 보이며 δ1.4 ppm 부근에 시그날은 보이지 않는다.

3)  이 약의 수용액(1 → 500)은 칼슘염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -2.5 ∼ -5.4° (환산한 무수물로서 0.5 g, 0.4 mol/L 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨시액, pH 8.5, 10 mL, 100 mm)

pH  이 약 40 mg을 달아 물 10 mL에 현탁시켜 약 5 ℃로 식혀 녹인 다음 실온으로 한 액의 pH는 8.0 ∼ 10.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g에 0.25 mol/L 아세트산용액 40 mL 및 물을 넣어 50 mL로 한다. 이것을 검액으로 하여 제 1 법에 따라 조작하여 시험한다. 비교액에는 납 표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 3 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

수    분  12.0 % 이하 (0.1g, 용량적정법, 직접적정) 단, 수분측정용 메탄올 대신에 수분측정용 포름아미드ㆍ수분측정용메탄올 혼합액(2 : 1)을 쓴다.

인 함 량  이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 과요오드산나트륨용액(107 → 10000) 40 mL 및 과염소산 2 mL를 정확하게 넣어 수욕에서 1 시간 가열한다. 식힌 다음 물을 넣어 정확하게 200 mL로 한다. 이 액 10 mL를 정확하게 취하여 요오드화칼륨시액 1 mL를 정확하게 넣는다. 이 액이 무색이 될 때까지 티오황산나트륨시액을 넣고 다시 물을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액원액으로 한다. 따로 인산이수소칼륨 약 70 mg을 정밀히 달아 검액원액과 같은 방법으로 조작하여 표준원액으로 한다. 검액원액과 같은 방법으로 조작하여 공시험원액으로 한다. 검액원액, 표준원액 및 공시험원액을 5 mL씩 정확하게 취하여 각각 25 mL 용량플라스크에 넣고 몰리브덴산암모늄ㆍ황산시액 2.5 mL 및 1-아미노-2-나프톨-4-설폰산시액 1 mL를 넣어 흔들어 섞은 다음 물을 넣어 정확하게 25 mL로 하여 검액, 표준액 및 공시험액으로 한다. 이 액들을 20 ± 1 ℃에서 30 분간 방치한 다음 각각의 액을 가지고 물을 대조로하여 자외가시부흡광도측정법에 따라 파장 740 nm에서 흡광도 AT, AS 및 AB을 측정한다 (15.2 ∼ 16.7 %.).

인의 양 (mg)

W : 인산이수소칼륨의 채취량 (mg)

0.22760 : 인산이수소칼륨 중의 인의 비율

칼슘함량  이 약 약 0.2 g을 정밀하게 달아 1 mol/L 염산시액 4 mL를 정확하게 넣어 완전히 녹을 때까지 흔들어 섞은 다음 물 100 mL, 수산화나트륨시액 9 mL 및 메틸티몰블루․염화나트륨지시약 0.1 g을 정확하게 넣어 0.05 mol/L 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨용액으로 적정한다. 적정의 종말점은 맑은 청색에서 회색 또는 회자색으로 변할 때로 한다. 같은 방법으로 공시험을 하여 보정한다. (19.6 ∼ 21.7 %)

0.05 mol/L 에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨 1 mL = 2.004 mg Ca

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  ｢포스포마이신나트륨｣의 정량법 (1)의 배지를 쓴다.

(2) 시험용균  Proteus sp MB 838을 시험용균으로 한다.

(3) 시험용균액  ｢포스포마이신나트륨｣의 정량법 (3)에 따른다.

(4) 이 약 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)에 녹이고 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 적당량을 정확하게 취하여 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)을 넣어 mL 당 10.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 포스포마이신페네틸암모늄표준품 약 20 mg (역가)을 정밀히 달아 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)을 넣어 녹여 정확하게 50 mL로 하여 표준원액으로 한다. 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 7 일 이내에 쓴다. 정량할 때 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 0.05 mol/L 트리스완충액(pH 7.0)을 넣어 mL 당 10.0 및 5.0 μg (역가)이 함유되도록 희석하여 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 역가시험법 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  기밀용기

폴리믹신 B 황산염

Polymyxin B Sulfate

폴리믹신 B1  R1 = 6-메틸옥타노산

R2 = L-α-γ-디아미노부티르산

폴리믹신 B2  R1 = 6-메틸헵타노산

R2 = L-α-γ-디아미노부티르산

Thr 트레오닌	Phe 페닐알라닌	Leu 류신

황산폴리믹신 B

이 약은 Bacillus polymyxa의 배양하여 얻은 항세균활성을 가지는 펩타이드계 화합물의 혼합물의 황산염이다.

이 약은 정량할 때 환산한 건조물 1 mg에 대하여 폴리믹신 B (C55∼56H96∼98N16O13) 6500 단위 (역가) 이상을 함유한다. 1 단위는 폴리믹신 B 황산염(C55∼56H96∼98N16O13․1∼2H2SO4) 0.129 μg에 해당한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황갈색의 가루이다.

이 약은 물에 잘 녹고 무수에탄올에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약의 수용액(1 → 10) 5 mL에 수산화나트륨용액(1 → 10) 5 mL를 넣고 흔들어 섞으면서 황산구리(Ⅱ)오수화물용액(1 → 100) 5 방울을 넣을 때 액은 자색을 나타낸다.

2)  이 약 및 폴리믹신 B 황산염표준품 5 mg씩을 각각 마개달린 시험관에 달아 희석시킨 염산(1 → 2) 1 mL에 녹이고 마개를 막아 135 ℃에서 5 시간 가열한 다음 수욕에서 증발건고하고 염산냄새가 나지 않을 때까지 가열을 계속한다. 잔유물을 물 0.5 mL에 녹이고 검액 및 표준액(1)로 한다. 따로 L-류신, L-트레오닌, 페닐알라닌 및 L-세린 20 mg 씩을 각각 물 10 mL에 녹여 표준액(2), 표준액(3), 표준액(4) 및 표준액(5)로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 검액, 표준액(1), 표준액(2), 표준액(3), 표준액(4) 및 표준액(5) 3 μL씩을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 점적한다. 이 박층판을 포화시킨 전개용매의 증기에 15시간 쪼인 다음 페놀․물 혼합액(3 : 1)을 전개용매로 하여 차광하여 약 13 cm 전개한다. 전개한 박층판을 110 ℃에서 5 분간 건조하고 여기에 닌히드린․아세트산시액을 고르게 뿌리고 110 ℃에서 5 분간 가열할 때 검액에서 얻은 각각의 반점의 Rf 값은 표준액(1)로부터 얻은 각각의 반점의 Rf 값과 같다. 또한 검액에서 얻은 반점은 각각 표준액(2), 표준액(3) 및 표준액(4)로부터 얻은 반점에 대응하는 위치에 보이며 표준액(5)로부터 얻은 반점에 대응하는 위치에는 보이지 않는다.

3)  이 약의 수용액(1 → 20)은 황산염의 정성반응을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : -78 ∼ -90° (환산한 건조물로서 0.5 g, 물, 25 mL, 100 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 50 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.0이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 제 2 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (20 ppm 이하)

2) 페닐알라닌  이 약 0.375 g을 정밀하게 달아 0.1 mol/L 염산시액에 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액을 가지고 자외가시부흡광도측정법에 따라 시험하여 파장 252 nm, 258 nm, 264 nm, 280 nm 및 300 nm에서 흡광도 A1, A2, A3, A4 및 A5를 측정한다. 다음 식에 따라 페닐알라닌의 양을 측정할 때 9.0 ～ 12.0 %이다.

[eqn: 페닐알라닌의~양`(%)```=`` {A _{2} `-`0.5A _{1} `+`0.5A _{3} `-`1.8A _{4} `+`0.8A _{5}} over {W _{T}} ` TIMES `9.4787]

WT : 환산한 건조물로서 이 약의 취한 양 (g)

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

발열성물질  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 다만, 이 약 적당량을 달아 생리식염 주사액으로 녹여 mL 당 20000 단위 (역가)를 함유하는 용액을 만들어 검액으로 한다. 단, 시험주사량은 토끼의 체중 Kg 당 검액 1.0 mL로 한다.

건조감량  6.0 % 이하 (1 g, 감압, 60 ℃, 3 시간)

강열잔분  0.75 % 이하 (1 g)

정 량 법  원통평판법  (1) 배지  종층용 및 기층용한천배지

펩톤	10.0 g	육엑스	3.0 g

염화나트륨	30.0 g	한천	20.0 g

물 1000 mL에 녹이고 멸균한다. 단, 멸균 후의 pH는 6.5 ∼ 6.6이 되게 한다.

(2) 시험용균  Esherichia coli NIHJ를 시험용균으로 한다.

(3) 이 약 약 200000 단위 (역가)에 해당하는 양을 정밀히 달아 인산염완충액(pH 6.0)에 녹여 정확하게 20 mL로 한다. 이 용액 적당량을 정확하게 취하여 인산염완충액(pH 6.0)으로 mL 당 4000 및 1000 단위 (역가)가 함유하도록 희석하여 각각 고농도검액 및 저농도검액으로 한다. 따로 폴리믹신 B 황산염표준품 약 200000 단위 (역가)를 정밀히 달아 인산염완충액(pH 6.0)에 녹여 정확하게 20 mL로 하여 표준원액으로 한다. 표준원액은 5 ℃ 이하에서 저장하며 14 일 이내에 쓴다. 정량할 때 이 표준원액 적당량을 정확하게 취하여 인산염완충액(pH 6.0)을 넣어 mL 당 4000 및 1000 단위 (역가)가 함유하는 액을 만들어 각각 고농도표준액 및 저농도표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 항생물질의 미생물학적 Rf 값 가)(8)에 따라 시험한다.

저 장 법  차광한 기밀용기

피브메실리남염산염

Pivmecillinam Hydrochloride

염산피브메실리남	C21H33N3O5S․HCl : 476.03

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 메실리남 (C15H23N3O3S : 325.43) 630 ∼ 710 μg (역가)을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색 ∼ 황백색의 결정성 가루이다.

이 약은 메탄올 또는 아세트산무수물에 썩 잘 녹고 물 또는 무수에탄올 (99.5)에 잘 녹으며 아세토니트릴에 녹는다.

확인시험  1)  이 약 및 피브메실리남염산염표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약 0.5 mg을 물 10 mL에 녹이고 묽은질산 1 mL 및 질산은시액 1 방울을 넣을 때 흰색 침전이 생긴다.

비선광도  [eqn: [α]_{D}^{20}] : +200 ∼ +220° (환산한 무수물로서 1 g, 물, 100 mL, 100 mm)

pH  이 약 0.5 g을 물 10 mL에 녹인 액의 pH는 3.0 ∼ 4.5이다.

순도시험  1) 중금속  이 약 1.0 g을 달아 질산마그네슘육수화물․에탄올용액 (1 → 10) 10 mL를 넣고 에탄올에 불을 붙여 연소시킨 다음 천천히 가열하여 회화한다. 탄화물이 남아 있을 때는 소량의 질산으로 적시고 다시 강열하여 회화한다. 식힌 다음 잔류물에 염산 3 mL를 넣고 수욕에서 가온하여 녹인 다음 증발건고한다. 잔류물에 물 10 mL를 넣고 수욕에서 가온하여 녹이고 식힌 다음 암모니아시액을 한 방울씩 넣어 pH를 3 ～ 4로 맞춘 다음 묽은아세트산 2 mL를 넣고 필요하면 여과하고 물 10 mL로 씻어 여액과 씻은 액을 비색관에 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이것을 검액으로 하여 시험한다. 비교액은 납표준액 2.0 mL를 취하여 검액의 조제법과 같이 조작한다 (20 ppm 이하).

2) 비소  이 약 1.0 g을 달아 제 4 법에 따라 조작하여 시험한다 (2 ppm 이하).

3) 유연물질  이 약 50 mg을 정밀하게 달아 아세토니트릴․아세트산(100) 혼합액 (97 : 3) 4.0 mL에 녹여 검액으로 한다. 따로 피브메실리남염산염표준품 2.0 mg을 정밀하게 달아 물 4.0 mL에 녹여 표준액으로 한다. 이들 액을 가지고 박층크로마토그래프법에 따라 시험한다. 표준액을 박층크로마토그래프용실리카겔을 써서 만든 박층판에 2 μL를 점적하고 30 분간 방치한 다음 검액 2μL를 점적하고 아세톤․물․아세트산(100) 혼합액(10 : 1 : 1)을 전개용매로 하여 약 12 cm 전개한다. 박층판을 바람에 말린 후 요오드증기 중에서 10 분간 방치할 때 검액에서 얻은 반점은 표준액에서 얻은 반점보다 크거나 진하지 않다. 또한 검액에서는 표준액의 반점에 해당하는 위치 이외에서 반점이 나타나지 않는다.

수    분  1.0 % 이하 (0.25 g, 전량적정법)

정 량 법  이 약 및 피브메실리남염산염표준품 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 각각을 이동상에 적절하게 녹이고 내부표준액 10 mL씩을 정확하게 넣은 다음 이동상을 넣어 정확하게 100 mL로 하여 검액 및 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 10 μL를 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크면적에 대한 피브메실리남의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다.

메실리남 (C15H23N3O3S)의 역가 (μg)

=  피브메실리남염산염표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  디페닐의 이동상용액(1 → 12500)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계(측정파장 : 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4 mm, 길이 약 30 cm의 스테인레스강관에 10 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세트산암모늄 0.771 g을 물 약 900 mL에 녹이고 아세트산무수물을 넣어 pH를 3.5로 조정한 다음 다시 물을 넣어 1000 mL로 한다. 이 액 400 mL에 아세토니트릴 600 mL을 넣는다.

유  량 : 피브메실리남의 유지시간이 약 6.5 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 피브메실리남, 내부표준물질의 순서로 유출하고 그 분리도는 4 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 10 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크면적에 대한 피브메실리남의 피크면적비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  기밀용기

피페라실린나트륨

Piperacillin Sodium

C23H26N5NaO7S : 539.54

이 약은 정량할 때 환산한 무수물 1 mg에 대하여 피페라실린 (C23H27N5O7S : 517.55) 863 μg (역가) 이상을 함유한다.

성    상  이 약은 흰색의 가루 또는 덩어리이다.

이 약은 물에 썩 잘 녹고 메탄올 또는 에탄올에 잘 녹고 아세토니트릴에는 거의 녹지 않는다.

확인시험  1)  이 약 및 피페라실린나트륨표준품을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법에 따라 시험할 때 같은 파수에서 같은 강도의 흡수를 나타낸다.

2)  이 약은 나트륨염의 정성반응 1)을 나타낸다.

비선광도  [eqn: [alpha]_D^20] : +175 ∼ +190° (환산한 무수물로서 0.8 g, 물, 20 mL, 100200 mm)

pH  이 약 1.0 g을 물 4 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.0이다

순도시험  1) 용해상태  이 약 1.0 g에 물 10 mL에 녹일 때 액은 무색이고 투명하다.

2) 중금속  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 시험한다. 비교액에는 납표준액 2.0 mL를 넣는다 (10 ppm 이하).

3) 비소  이 약 2.0 g을 달아 제 4 법에 따라 시험한다 (1 ppm 이하).

4) 유연물질  이 약 약 0.1 g을 정밀하게 달아 이동상 A에 녹여 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 1 mL를 정확하게 취하여 이동상 A를 넣어 정확하게 100 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 정확하게 취하여 다음의 조작조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하고 각 액의 각각의 피크면적을 자동적분법으로 측정하여 각 액의 피크면적을 측정할 때 검액의 유지시간 약 7 분의 암피실린의 피크면적은 표준액의 피페라실린의 피크면적의 1/2보다 크지 않으며 유지시간 약 17 분 및 약 21 분의 유연물질 Ⅰ의 피크의 면적의 합은 표준액의 피페라실린의 피크면적의 2 배보다 크지 않고, 유지시간이 약 56 분의 유연물질 Ⅱ의 피크면적은 표준액의 피페라실린의 피크면적보다 크지 않다. 또한 피페라실린 이외의 피크면적의 합은 표준액의 피페라실린의 피크면적의 5 배보다 크지 않다. 단, 암피실린, 유연물질 Ⅰ, 유연물질 Ⅱ의 피크면적은 측정된 피크면적에 각각의 감도계수 1.39, 1.32 및 1.11을 곱한 값으로 한다.

조작조건

검출기: 자외부흡광광도계(측정파장 : 220 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 15 cm의 스텐인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 이동상 A 및 이동상 B를 가지고 아래와 같이 단계적 또는 농도기울기적으로 제어한다.

이동상 A - 물․아세토니트릴․0.2 mol/L 인산이수소칼륨시액 혼합액(45 : 4 : 1)

시간 (분)	이동상 A (vol%)	이동상 B (vol%)
0 ～ 7 7 ～ 13 13 ～ 41 14 ∼ 56 56 ∼ 60	100 100 → 33 83 83 → 20 20	0 0 → 17 17 17 → 80 80

이동상 B - 아세토니트릴․물․0.2 mol/L 인산이수소칼륨시액 혼합액(25 : 24 : 1)

유  량 : 1.0 mL/분. 이 조건일 때 피페라실린의 유지시간은 약 33분이다.

측정범위 : 용매 피크 이후부터 피페라실린의 유지시간의 약 1.8배의 범위

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 피페라실린의 피크의 이론단수는 각각 15000 이상이고 대칭계수 1.5 이하이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 3 회 반복할 때 피페라실린의 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

5) 디메틸아닐린  이 약 약 1.0 g을 정밀히 달아 1 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL와 내부표준액 1 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 검액으로 한다. 따로 디메틸아닐린 약 50 mg을 정밀히 달아 염산 2.0 mL를 넣고 물을 넣어 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 정확하게 취하여 물을 넣어 정확하게 250 mL로 한다. 이 액 1.0 mL를 정확하게 취하여 1 mol/L 수산화나트륨시액 5.0 mL를 넣고, 내부표준액 1.0 mL를 넣은 다음 필요하면 원심분리하여 상층액을 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 각 1 μL씩을 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래프법에 따라 시험하여 검액과 표준액 중의 내부표준물질의 피크면적에 대한 디메틸아닐린의 피크면적비 QT 및 QS를 구한다 (20 ppm 이하).

내부표준액  나프탈렌 50.0 mg을 시클로헥산을 넣어 녹여 50 mL로 한다. 이 액 5.0 mL를 취하여 시클로헥산으로 100 mL로 한 액을 내부표준액으로 한다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

칼  럼 : 안지름 약 2 mm, 길이 약 2 m인 관에 기체크로마토그래프용규조토에 질량의 3 %의 기체크로마토그래프용 50 % 페닐-50 % 메틸폴리실록산을 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 120 ℃

검체도입부, 검출기온도 : 150 ℃

운반기체 : 질소

유  량 : 30 mL/분

무균시험  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다.

엔도톡신  무균제제의 제조에 쓰이는 경우 시험할 때 적합하다. 이 약은 피페라실린 1 mg (역가) 당 0.07 EU 이하이다.

수    분  1.0 % 이하 (3 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 약 0.1 g (역가)씩을 정밀하게 달아 물에 녹여 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하고 내부표준액 5 mL를 정확하게 넣어 검액으로 한다, 따로 피페라실린표준품 약 0.1 g (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 이동상에 녹이고 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하고 내부표준액 5 mL를 정확하게 넣어 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 5 μL를 가지고 다음의 조건으로 액체크로마토그래프법에 따라 시험하여 내부표준물질의 피크 높이에 대한 피페라실린의 피크높이의 비 QT 및 QS를 구한다.

피페라실린 (C23H26N5O7S)의 역가 (μg)

=피페라실린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  아세트아닐리드의 이동상용액(1 → 5000)

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 254 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 150 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 25 ℃ 부근의 일정온도

이동상 : 아세트산무수물 60.1 g 및 트리에틸아민 101.0 g을 달아 물을 넣어 정확하게 1000 mL로 한다. 이 액 25 mL에 묽은 아세트산 25 mL 및 아세토니트릴 210 mL를 넣어 다시 물을 넣어 정확하게 1000 mL로 한다.

유  량 : 피페라실린의 유지시간이 약 5 분이 되도록 조정한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 내부표준물질, 피페라실린의 순서로 유출하고 그 분리도는 3 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 5 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 내부표준물질의 피크높이에 대한 피페라실린의 피크높이의 비의 상대표준편차는 1.0 % 이하이다.

저 장 법  밀봉용기

주사용 피페라실린나트륨

Piperacillin Sodium for Injection

이 약은 쓸 때 녹여 쓰는 주사제로 정량할 때 표시량의 93.0 ∼ 107.0 %에 해당하는 피페라실린 (C23H27N5O7S : 517.55)을 함유한다.

제    법  이 약은 ｢피페라실린나트륨｣을 가지고 주사제의 제법에 따라 만든다.

성    상  이 약은 흰색의 가루 또는 덩어리이다.

확인시험  ｢피페라실린나트륨｣의 확인시험1), 2)에 따라 시험한다.

pH  이 약의 표시량에 따라 피페라실린나트륨으로서 1.0 g (역가)에 해당하는 양을 물 4 mL에 녹인 액의 pH는 5.0 ∼ 7.0이다.

순도시험  1) 용해상태  이 약의 표시량에 따라 피페라실린나트륨으로서 4.0 g (역가)에 해당하는 양을 물 17 mL에 녹일 때 액은 무색이고 맑다.

2) 유연물질  ｢피페라실린나트륨｣의 순도시험 4)를 따른다.

무균시험  시험할 때 적합하다.

엔도톡신  이 약은 피페라실린 1 mg (역가) 당 0.04 EU 미만이다.

제제균일성시험  질량편차시험을 할 때 적합하다.

불용성이물시험  시험할 때 적합하다.

주사제의 불용성미립자시험  시험할 때 적합하다

수    분  1.0 % 이하 (3 g, 용량적정법, 직접적정)

정 량 법  이 약 10 개 이상을 취하여 내용물의 질량을 표시량에 따라 피페라실린나트륨으로서 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 물에 녹이고 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL를 정확하게 넣어 검액으로 한다. 따로 피페라실린표준품 약 20 mg (역가)에 해당하는 양을 정밀하게 달아 이동상에 녹이고 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 내부표준액 5 mL를 정확하게 넣어 표준액으로 한다. 이하  ｢피페라실린나트륨｣의 정량법에 따라 시험한다.

피페라실린 (C23H26N5O7S)의 역가 (μg)

=  피페라실린표준품의 역가 (μg) [eqn: TIMES ` {Q _{T}} over {Q _{S}}]

내부표준액  아세트아닐리드의 이동상액(1 → 5000)

저 장 법  밀봉용기. 이 약은 플라스틱제수성주사제용기를 쓸 수 있다.

[별지 2]

64. 표준품, 시약․시액, 용량분석용표준액, 표준액, 색의 비교액, 파장 및 투과율보정용 광학필터, 계량기․용기, 멸균법 및 무균조작법

2) 시약․시액

다음을 신설한다.

과요오드산나트륨  NaIO4  [최순품]

기체크로마토그래프용폴리에틸렌글리콜 600  기체크로마토그래프용으로 만든 것

기체크로마토그래프용폴리에틸렌글리콜 1500  기체크로마토그래프용으로 만든 것

니트로에탄  C2H5NO2

밀도 : 1.048 ∼ 1.053 g/cm3 20 ℃

수분 : 0.1 % 미만

0.2 % 닌히드린․물포화 1-부탄올시액  닌히드린 2 g에 물로 포화시킨 1-부탄올을 넣어 1000 mL로 한다.

N-데메틸록시트로마이신  C36H6NO13  흰색 ∼ 엷은 황백색의 가루

N,N-디메틸아세트아미드  CH3CON(CH3)2  이 약은 무색의 액이다.

융점 : 163 - 165 ℃(분해)

비중 [eqn: d`] : 1.072 ∼ 1.075 (제 3 법)

수분 : 0.2 % 이하 (0.1 g, 전량분석)

순도시험 : 이 약 3 μL를 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래법에 따라 시험한다. 각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 면적백분율법에 따라 N,N-디메틸아세트아미드의 양을 구할 때 98.0 % 이상이다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

컬럼 : 안지름 약 0.25  mm, 길이 약 30 m의 용융 실리카관에 기체크로마토그래프용폴리에틸렌글리콜 20M을 두께 0.5 μm로 입힌다.

주입부온도 : 70 ℃ 부근의 일정온도

검출기온도 : 200 ℃ 부근의 일정온도

칼럼온도 : 70 ℃에서 1 분간 유지 후  200 ℃까지 1 분 당 10 ℃씩 상승시킨 후 200 ℃에서 3 분간 유지시킨다.

운반기체 : 헬륨

유  량 : 약 30 cm/분

측정범위 : N,N-디메틸아세트아미드의 유지시간의 약 3 배 범위

시스테적합성

검출의 확인 : 이 약 약 1.0g을 정밀히 달아 아세톤을 넣어 정확하게 100 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 아세톤을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 1 에서 얻은 N,N-디메틸아세트아미드의 피크면적이 풀스케일의 약 40 ∼ 60 %가 되도록 조정한다.

시스템의 재현성 : 표준액 3 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 피리딘의 피크높이의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

N,N-디벤질에틸렌디아민디아세트산  흰색 ∼ 약간 엷은 황백색의 결정 또는 결정성 가루

확인시험 : 이 약을 가지고 적외부스펙트럼측정법의 브롬화칼륨정제법으로 측정할 때 파수 1530 cm-1, 1490 cm-1, 1460 cm-1, 1400 cm-1 및 1290 cm-1 부근에 흡수가 있다.

함량 : 99.0 % 이상이다.

정량법 : 이 약 약 25 mg (역가)씩을 정밀히 달아 메탄올 25 mL에 녹이고 무수인산수소이나트륨 1.02 g과 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 무수인산수소이나트륨 1.02 g과 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액․메탄올혼합액(1 : 1)로 넣어 정확하게 20 mL로 하여 검액으로 한다. 따로,  아세트산무수물 약 8 mg을 정밀히 달아 메탄올 25 mL를 넣고 무수인산수소이나트륨 1.02 g과 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 무수인산수소이나트륨 1.02 g과 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액․메탄올혼합액(1 : 1)로 넣어 정확하게 20 mL로 하여 표준액으로 한다. 검액 및 표준액 20 μL씩을 가지고 다음 조건으로 액체크로마토그래법에 따라 시험한다. 각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 면적백분율법에 따라 N,N-디벤질에틸렌디아민디아세트산의 양을 구한다.

조작조건

검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 220 nm)

칼  럼 : 안지름 약 4.6 mm, 길이 약 250 mm인 스테인레스강관에 5 μm의 액체크로마토그래프용옥타데실실릴실리카겔을 충전한다.

칼럼온도 : 40 ℃ 부근의 일정 온도

이동상 : 물․메탄올․0.25 mol/L 인산이수소칼륨시액(pH 3.5)혼합액(11 : 7 : 2)

유  량 : N,N-디벤질에틸렌디아민디아세트산의 유지시간이 약 4 분 되도록 한다.

시스템적합성

시스템의 성능 : 벤자틴페니실린 G 약 85000 단위에 해당하는 양을 정밀하게 달아 메탄올 25 mL에 녹인 후 무수인산수소이나트륨 1.02 g과 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액을 넣어 정확하게 50 mL로 한다. 이 액 5 mL를 정확하게 취하여 무수인산수소이나트륨 1.02 g 및 인산이수소칼륨 6.80 g을 물에 녹이고 1000 mL로 한 액 · 메탄올혼합액(1 : 1)을 넣어 정확하게 20 mL로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 조작할 때 N,N-디벤질에틸렌디아민디아세트산, 벤자틴페니실린 순으로 유출되고  두 피크의 분리도는 20 이상이다.

시스템의 재현성 : 표준액 20 μL를 가지고 위의 조건으로 시험을 6 회 반복할 때 N,N-디벤질에틸렌디아민디아세트산 피크면적의 상대표준편차는 2.0 % 이하이다.

9,10-디페닐안트라센  C26H18  황색의 결정성 가루. 디에틸에티르에 녹고 물에 거의 녹지 않는다.

융 점 : 약 248 ℃

락토비온산  C12H22O12  무색의 결정 또는 흰색의 엷은 결정성 가루이다.

융 점 : 113 -118 ℃

순도시험 : 이 약 0.1 g을 달아 메탄올․물혼합액(3 :2) 10 mL에 녹인 다음 이 액 10 μL를 가지고 포비돈의 에리트로마이신락토비온산 확인시험 2)에 따라 시험할 때 주반점 이외의 반점은 없다.

레소르시놀  C6H4(OH)2  [최순품]

메틸티몰블루염화나트륨지시약  메틸티몰블루 0.25 g과 염화나트륨 10g을 혼합하여 교반한다.

4,4'-비스(디에틸아미노)벤조페논  (C2H5)2NC6H4〕2CO  엷은 황색의 결정이다.

함량: 98% 이상

정량법 이 약 약 0.25 g을 정밀하게 달아 아세트산무수물 50 mL에 녹이고  0.1 mol/L 과염소산으로 적정한다(전위차적정법). 같은 방법으로 공시험을 하여 보정한다.

0.1 mol/L 과염소산 1 mL = 16.22 mg C21H28N2O

시클로세린반응용시액  니트로프루싯나트륨용액(1 → 25)과 수산화나트륨용액(4 → 25)을 같은 용량 씩 넣고 잘 섞는다. 이 시액은 갈색병에 보관하고 24 시간 이내에 쓴다.

시트르산․인산염․아세토니트릴시액  시트르산일수화물 2.1 g, 인산수소이칼륨 13.4 g 및 인산이수소칼륨 3.1 g에 물을 넣어 1000 mL로 한 액․아세토니트릴(3:1)

아세트산시액, 0.25 mol/L  아세트산무수물 3 g에 물을 넣어 200 mL로 한다.

아세트산암모늄시액, 0.5 mol/L  아세트산암모늄 38.5 g에 물을 넣어 녹여 1000 mL로 한다.

p-아세트아니시니드  C9H11NO2  흰색 ∼ 자백색의 결정 또는 결정성 가루이고 특이한 냄새가 있다. 에탄올 (95), 아세토니트릴에 잘 녹고 물에  매우 녹기 어렵다.

융점 : 126 - 132 ℃

함량 : 98.0 % 이상.

정량법 : 이 약 약 0.1 g을 에탄올 (95) 5 mL에 녹인 후 이 액 3 μL를 가지고 다음 조건으로 기체크로마토그래법에 따라 시험한다. 각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정한다. p-아세트아니시니드의 피크면적은 총피크면적의 98.0 % 이상이다.

조작조건

검출기 : 불꽃이온화검출기

컬럼 : 안지름 약 3 mm, 길이 약 2 m인 유리관에 기체크로마토그래프용알킬렌글리콜프탈레이트에스테르를 177 ∼ 125 μm의 기체크로마토그래프용산처리실리화한규조토에 1 %의 비율로 입힌 것을 충전한다.

칼럼온도 : 210 ℃ 부근의 일정온도

운반기체 : 질소

유  량 : 약 30 ∼ 50 mL/분(p-아세트아니시니드의 유지시간이 약 11 ∼ 14 분이 되게 한다.)

측정범위 : 용매 피크 이후로부터 p-아세트아니시니드의 유지시간의 약 3 배 범위

β-아포옥시테트라사이클린  C22H22N2O8  녹갈색 ∼ 갈색의 가루.

순도시험 유연물질 : 이 약 8 mg을 0.01 mol/L 수산화나트륨시액 5 mL에 녹인 다음 0.01 mol/L 염산시액을 넣어 100 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 「옥시테트라사이클린염산염」의 순도시험 1)에 따라 각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 면적백분율법에 따라 측정할 때 β-아포옥시테트라사이클린 이외의 피크면적의 합은 10 % 이하이다.

액체크로마토그래프용헥실실릴화한실리카겔  액체크로마토그래프용으로 만든 것.

염산히드록실아민시액  염산히드록실아민용액(34.8 → 100)․초산나트륨․1 mol/L 수산화나트륨시액․에탄올(1 : 1 : 4)을 혼화한다.

3-에톡시-4-히드록시벤즈알데히드  C9H10O3  흰색 ∼ 엷은 황백색의 결정성 가루로 에탄올(95)에 잘 녹고 물에는 녹기 어렵다.

융점 : 76 ∼ 78 ℃

함량 :  98.0 % 이상

정량법 : 이 약을 오산화인을 건조제로 한 데시케이터 속에서 4 시간 건조하고 약 0.3 g을 정밀하게 달아 디메틸포름아미드을 넣어 녹여 0.1 mol/L 나트륨메톡시드액으로 적정한다 (지시약 : 티몰블루시액). 같은 방법으로 공시험을 하여 보정한다.

0.1 mol/L 나트륨메톡시드 1 mL = 16.62 mg C9H10O3

에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨시액, 0.4 mol/L, pH8.5  에틸렌디아민테트라아세트산이수소디나트륨이수화물 148.9 g에 물을 넣어 녹이고 8 mol/L 수산화나트륨 액으로 pH를 8.5로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

4-에피옥시테트라사이클린  C22H24N2O9  녹갈색 ∼ 갈색의 가루.

순도시험 유연물질 : 이 약 20 mg을 0.01 mol/L 염산시액 25 mL에 녹여 검액으로 한다. 이 액 20 μL를 가지고 「옥시테트라사이클린염산염」의 순도시험 1)에 따라 각 피크면적을 자동적분법에 따라 측정하여 면적백분율법에 따라 측정할 때 4-에피옥시테트라사이클린 이외의 피크면적의 합은 10 % 이하이다.

이미다졸  C3H4N2  흰색 ∼ 밝은 노란색의 결정. 물에 잘 녹는다.

인산수소이나트륨시액, 0.05 mol/L  무수인산수소이나트륨 7.098 g을 물에 녹여 1000 mL로 한다.

인산수소이나트륨시액, 0.2 mol/L  무수인산수소이나트륨 28.3928 g을 물에 넣어 녹여 1000 mL로 한다.

인산수소이나트륨시액, 0.5 mol/L  무수인산수소이나트륨 70.982 g을 물에 녹여 1000 mL로 한다.

인산수소이나트륨․시트르산완충액, 0.05 mol/L, pH 6.0  0.05 mol/L 인산수소이나트륨시액 1000 mL에 시트르산일수화물 5.25 g을 물에 녹여 1000 mL로 한 액을 pH 6.0이 될 때 까지 넣는다.

인산염완충액, pH 6.0  인산이수소칼륨 8.63 g 및 인산수소이나트륨무수물 1.37 g에 물 약 750 mL를 넣어 녹이고 필요하면 수산화나트륨시액 및 희석한 인산용액(1 → 15)으로 pH 6.0로 한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

인산이수소나트륨시액, pH 2.5  인산이수소나트륨이수화물 2.7 g을 물 1000 mL에 녹이고 인산을 넣어 pH를 2.5로 조정한다.

인산이수소칼륨시액, 0.33 mol/L  인산이수소칼륨 4.491 g을 물을 넣어 녹여 1000 mL로 한다.

인산이수소칼륨시액, 0.25 mol/L pH 3.0  인산이수소칼륨 4.491 g에 물 약 900 mL를 넣어 녹이고 인산으로 pH를 3.5로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

인산일수소나트륨․시트르산완충액 0.05 mol/L, pH 6.0  인산수소이나트륨․시트르산완충액, 0.05 mol/L, pH 6.0 참조

카나마이신황산염  C18H36N4O11·xH2SO4  [의약품각조, 「카나마이신황산염」]

테트라부틸암모늄히드록시드액, 0.005 mol/L  테트라부틸암모늄히드록시드시액 10 mL에 물 700 mL을 넣고 희석한 인산(1 → 10)으로 pH를 4.0로 조정한 다음 물을 넣어 1000 mL로 한다.

2,4,6-트리니트로벤젠설폰산  C6H2(NO2)3SO3H2․H2O  엷은 황색 ∼ 연한 황색의 결정이다.

수분 : 11 ∼ 15 % (0.1 g, 용량적정법, 직접적정)

함량: 98% 이상

정량법 이 약 약 0.3 g을 정밀하게 달아 물 50․에탄올 (99.5)혼합액(1 : 1) mL에 녹이고  0.1 mol/L 수산화나트륨으로 적정한다(전위차적정법). 같은 방법으로 공시험을 하여 보정한다.

0.1 mol/L 수산화나트륨 1 mL = 29.32 mg C6H2(NO2)3SO3H2․H2O

티오아세타미드시액  4 w/v% 티오아세타미드용액 0.2 mL에 1 mol/L 수산화나트륨액․물․85 % 글리세린혼합액(15 : 5 : 20) 1 mL를 넣고 수욕에서 20 초간 가열하여 식힌다. 쓸 때 만든다.

티오아세타미드· 글리세린염기성시액  티오아세타미드시액 0.2 mL에 글리세린염기성시액 1 mL을 넣고 수욕에서 20 초간 가열하여 식힌다. 쓸 때 만든다.

ο-프탈알데히드용액  ο-프탈알데히드 1.0 g을 달아 메탄올 5 mL에 넣어 녹이고 미리 4 mol/L 수산화칼륨용액으로 pH를 10.4로 조정한 0.4 mol/L 붕산용액 95 mL를 넣고 치오글리콜산 2 mL를 넣는다. 4 mol/L 수산화칼륨용액으로 pH를 10.4로 조정한다.

핵자기공명스펙트럼측정용중수  D2O  핵자기공명스펙트럼측정용으로 만든 것.

핵자기공명스펙트럼측정용중수소화디메틸설폭시드  (CD3)2SO  핵자기공명스펙트럼측정용으로 만든 것.

핵자기공명스펙트럼측정용3-트리메틸실릴프로판설폰산나트륨  (CH3)3SiCD2CD2COONa  핵자기공명스펙트럼측정용으로 만든 것.

m-히드록시아세토페논  C8H8O2S  흰색 ∼ 엷은 황색의 결정성 가루

융점 : 96 ℃

순도시험 유연물질 m-히드록시아세토페논의 pH 4.5의 0.1 mol/L 인산염완충액메탄올용액(1 → 200) 10 μL를 가지고 세팔렉신 정량법에 따라 시험할 때 세팔렉신을 검출을 방해하는 피크가 없다.

N-(3-히드록시페닐)아세트아미드  C8H9NO2  흰색 ∼ 미황백색 결정으로 에탄올(95)에 잘 녹고 물에 조금 녹는다.

융점 : 146 ∼ 149 ℃

순도시험  용해상태 : 이  약 0.5 g에 물 50 mL에 녹일 때 액은 무색이며 맑다.

유연물질 : 이 약 0.1 g을 물에 녹여 1000 mL로 한다. 이 액 10 mL를 취하여 아세토니트릴 6.5 mL를 넣고 물을 넣어 정확하게 50 mL로 하여 검액으로 한다. 이 액 10 μL를 가지고 「아스폭시실린수화물」의 정량법의 조작법에 따라 시험할 때 주성분피크와 용매피크 이외의 피크가 나타나지 않는다.

[별지 3]

3) 용량분석용 표준액

0.1 mol/L 염화바륨액  1000 mL 중 염화바륨이수화물 (BaCl2․2H2O : 244.26) 24.426 g을 함유한다.

조    제  염화바륨이수화물 24.5 g에 물을 넣어 녹여 1000 mL로 하고 다음과 같이 표정한다.

표    정  조제한 염화바륨액 20 mL를 정확하게 취하여 염산 3 mL를 넣어 가온한다.  미리 가온한 희석시킨 황산(1 → 130) 40 mL를 넣어 수욕에서 30 분간 가열한 다음 하룻밤 방치한다. 이 액을 여과하고 여과지 위의 잔류물을 여액에 질산은시액을 넣을 때 혼탁이 생기지 않을 때까지 물로 씻은 다음 여과지와 같이 도가니에 옮겨 강열하여 회화한다. 방냉하고 황산 2 방울을 넣고 다시 700 ℃로 2 시간 강열한다. 방냉한 다음 잔류물의 질량를 정밀하게 달아 황산바륨 (BaSO4)의 양으로 하여 규정도계수를 계산한다.

0.02 mol/L 염화바륨액 1 mL = 23.34 mg BaSO4

0.005 mol/L 요오드액  1000 mL 중 요오드 (I : 126.90) 1.2690 g을 함유한다.

조    제  쓸 때 0.05 mol/L 요오드액에 물을 넣어 정확하게 10 배 용량으로 한다.